1例不同方法学对甲、戊型肝炎病毒抗体检测结果的差异分析

目的：分析1例不同方法学对甲、戊型肝炎病毒抗体检测结果的差异。方法：选取2021年9月广西中医药大学附属瑞康医院收治的1例初次检测及复查结果均显示为甲型肝炎病毒(HAV-IgM)弱阳性、戊型肝炎病毒(HEV-IgM)阳性的患者作为研究对象。患者初次采用酶联免疫吸附法检测，结果显示HAV-IgM弱阳性、HEV-IgM阳性，复查结果与初次检测结果保持一致；随后前往其他医院检测(化学发光法)，结果均为阴性。为探讨检测结果矛盾的原因，分别采用多家公司试剂盒及免疫印迹法进行验证。结果：该例患者HAV-IgM为阳性，初检及复查的安图结果与实验室罗氏验证的结果一致；HEV-IgM为阴性，安图结果与免疫印迹结果一致。结论：HAV-IgM、HEV-IgM具有多种不同方法学试剂，实验室应根据自身临床实验室的条件选择适合的方法学开展项目检测。针对异常结果应积极与临床沟通，结合临床症状判断，或采用准确度更高的方法学复查，并建议受检者定期复检。     

利用华支睾吸虫的排卵规律和消炎利胆片提高虫卵检出率的研究

目的利用华支睾吸虫的排卵规律和服用消炎利胆片来提高华支睾吸虫虫卵的检出率。方法将300例血清肝吸虫免疫球蛋白G(IgG)抗体阳性的疑似华支睾吸虫感染者随机分成3组,第1组为常规方法留取标本的对照组,第2组为服用消炎利胆片组,第3组则根据华支睾吸虫的排卵周期,分别于第1天、10天、20天留取粪便标本;各组送检的粪便标本均采用改良加藤厚涂片法、水洗沉淀法和醚醛沉淀法三种方法检测华支睾吸虫卵,并对检测结果进行χ^2检验分析。结果第2组和第3组检测华支睾吸虫卵的检出率明显高于第1组,差异有统计学意义(P<0.05);第2组和第3组的检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用华支睾吸虫的排卵规律留取标本和服用消炎利胆片均能明显提高华支睾吸虫虫卵检出率,有助于明确华支睾吸虫病的诊断,在临床上合理用药。     

重叠延伸PCR合成风疹病毒E1蛋白抗原肽基因及其表达

目的:利用重叠延伸PCR合成风疹病毒E1基因的抗原肽段,构建其原核表达载体并表达蛋白,为进一步获得高质量的rE1重组抗原肽奠定基础。方法:利用软件对风疹病毒E1基因进行生物信息学分析,根据大肠杆菌密码子偏爱性对其密码子进行优化;设计多对寡核苷酸引物,以重叠延伸PCR法合成相应抗原肽段,克隆后测序鉴定。再以酶切连接的方法将合成的抗原肽序列克隆导入原核表达载体pET32a;利用IPTG诱导抗原肽段的表达,SDS-PAGE和West-ern blot法分析表达产物。结果:经过6轮重叠延伸PCR扩增,成功获得与预期目的序列一致的风疹病毒E1基因抗原肽并构建获得重组质粒pET32-rE1;在37℃下分别以终浓度为1 mmol/L和0.5 mmol/L的IPTG诱导抗原肽表达,SDS-PAGE和Western blot法检测到预期的蛋白条带;且以IPTG终浓度为1 mmol/L诱导6 h后表达量最高。结论:成功合成了密码子优化的风疹病毒E1基因抗原肽段,构建其原核表达载体pET32-rE1并表达该抗原肽。     

深圳地区HIV-1感染者的本底耐药水平调查初探

[目的]建立一套完善,可靠,适合深圳人群的HIV-1耐药性基因型检测方法,调查分析深圳地区未接受抗病毒治疗的HIV感染者/AIDS患者的病毒株耐药突变及其本底流行情况. [方法]从未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆中提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增目的基因片断,并对扩增片断进行序列测定和分析. [结果]通过HIV-1耐药性基因型检测法能够获得1300 bp长度的目的基因片断.经序列分析所得的21份RT基因结果中有8份对NRTI产生耐药突变(38.5%),5份对NNRTI产生酎药突变(23.81%);另外分析所得的12份PR基团结果中1份产生对蛋白酶抑制剂主要耐药突变(8.33%),5份产生对蛋白酶抑制剂次要耐药突变(41.67%). [结论]HIV-1耐药性基因型检测法能有效地监测HIV-1感染者血浆中的耐药性病毒株的存在,并且检测结果表明,深圳地区未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者中已经存在耐药突变株.     

艾滋病和丙型肝炎病毒感染吸毒者的树突状细胞表面分子基因多态性分析

目的 研究吸毒人群中艾滋病病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染者与未感染者中,等位基因树突状细胞表面特异性分子同源物(DC-SIGNR)的分布情况,筛选出HIV或HCV抗性基因.方法 选择深圳市戒毒所吸毒人群血液样本500份,其中313份来自静脉注射吸毒者,对他们进行HIV及HCV抗体筛查,并提取外周血基因组DNA,对DC-SIGNR颈区基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测和基因序列测定分析.结果 检出97例HIV阳性吸毒者,均为静脉注射吸毒者,且全部为HCV阳性;HIV阴性吸毒人群中,HCV抗体阳性率57.57%(232/403);HIV阴性静脉注射吸毒者中,HCV阳性率63.89%(138/216);而采用鼻吸等其他方式吸毒者的阳性率为50.26%(94/187),静脉注射吸毒与其他方式吸毒者阳性率的差异具有统计学意义(x2=7.61,P=0.0058).x2检验结合确切概率法分析显示,HIV阳性的吸毒者中,DC-SIGNR颈区5/6和5/8等位基因型的出现频率[4.55%(4/88)和2.27%(2/88)]高于HIV未感染组[1.04%(4/384)和0(0/384),确切概率法P=0.043和P=0.034],具有统计学意义;HCV阳性吸毒人群中,各类杂合子及纯合子的出现频率与HCV阴性吸毒人群间差异无统计学意义,静脉注射吸毒者与其他方式吸毒者之间差异无统计学意义.结论 在吸毒人群中,DC-SIGNR颈区等位基因分布与HCV感染无明显相关性,而等位基因型5/6可能与HIV感染相关,但由于频率较低,仍需进一步验证.     

SAST教学模式在临床生物化学检验实验教学中的应用研究

目的 探讨SAST教学模式在临床生物化学检验实验教学中的应用效果。方法 选取2017～2019级医学检验技术专业的本科生303名,随机分为试验组和对照组,分别采用SAST教学模式和传统教学模式。通过综合试卷实验考核、学生对各项能力提高程度的自我评价及对SAST教学模式满意度的评价等指标来比较两组的教学效果。结果 试验组学生的综合试卷实验考核优于对照组,总成绩差异有统计学意义(P<0.05);问卷调查统计提示试验组对各项能力提高程度的自我评价明显优于对照组(P<0.05);98.7%的试验组学生对SAST教学模式的教学效果感到满意。结论 SAST教学模式可提高学生的自主学习能力,培养学生的科研创新思维和团队协作精神,从而提高了临床生物化学检验技术学科的教学质量,值得进一步推广应用。