流感病毒血凝素茎部螺旋区和串联重复M2蛋白胞外区域融合蛋白的免疫效果研究

目的探索含有流感病毒血凝素茎部α螺旋区(HAα)和6个串联重复M2蛋白胞外区域(6M2e)的融合蛋白的表达和制备方法, 并对其在小鼠体内的免疫效果进行评价。方法采用去除高变区的鞭毛蛋白序列, 将HAα和6M2e插入到原高变区位点, 构建重组质粒pET28a-FljBΔD2D3-HAα-6M2e。在大肠埃希菌中诱导表达后进行纯化和鉴定, 并评估其细胞毒性。最后将制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠, 采用ELISA方法检测小鼠血清特异性抗体效价, 实时荧光PCR法检测小鼠IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-ɑ的mRNA水平, CCK-8法检测脾细胞的增殖。结果成功构建重组质粒pET28a-FljBΔD2D3-HAα-6M2e, 蛋白表达最适条件为1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37 ℃诱导10 h, 通过镍柱纯化获得高纯度的无毒融合蛋白。免疫小鼠后抗M2e-IgG和抗HAα-IgG的抗体ELISA效价均达到1∶102 400, 且与对照组相比差异有统计学意义(t=0.33, P=0.774;t=7.60, P=0.001)。各类细胞因子的mRNA水平升...     

ABCA1通过激活EGFR/STAT3信号通路对胃癌上皮间质转化的影响

目的 探讨ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)对人胃癌侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法 基于网络数据库进行生物信息学分析ABCA1在人胃癌中的表达及其与胃癌患者预后的关系。RT-qPCR检测25对临床胃癌组织样本中ABCA1表达情况;RT-qPCR及Western blot分析ABCA1在不同人胃癌细胞系中的表达;利用基因沉默技术构建稳定低表达ABCA1胃癌细胞株。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot测定EMT及表皮生长因子受体(EGFR)/信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)信号通路相关蛋白的表达。结果 生物信息学分析结果显示ABCA1在胃癌中高表达,且与胃癌的分级、分期及不良预后呈正相关。RT-qPCR结果显示ABCA1在胃癌组织和胃癌细胞HGC-27中高表达;Transwell实验结果表明,敲低ABCA1能够抑制HGC-27细胞侵袭和迁移。Western blot结果表明,ABCA1敲低组间质细胞标记蛋白(Vimentin、N-Cadherin)和EMT相关的转录因子(Twist、Zeb1及Snail)表达下调,而上皮细胞...     

多部门合作信息追溯模块在医院外来器械管理中的应用

总结医院多部门合作构建外来器械信息追溯模块的使用效果.由医工信息部、消毒供应中心、手术室、临床骨科病房多部门协作,联合信息系统对医院各部门信息模块进行改进,完善医院外来器械的管理流程,加强对医院外来医疗器械的管理,保证外来器械在院内的医疗安全.多部门合作信息追溯模块构建并实施后,外来器械及植入物的接收登记合格率从88.97％提高到100.00％,外来器械使用后清洗消毒执行率从81.97％提高到97.55％,差异有统计学意义(P＜0.001).     

组织工程化子宫片层构建的实验研究

目的利用组织工程方法体外构建了与子宫壁内膜和肌层相近的子宫片层。方法将分离培养的兔子宫平滑肌细胞和基质细胞分别与液态Ⅰ型胶原支架材料混合,依次接种于自制静态力学拉伸模具中,再将上皮细胞接种在基质层上,形成组织工程化子宫组织。采用组织学和免疫组织化学方法观察所构建的组织工程化子宫的组织学特征,扫描电镜检测上皮细胞微结构。结果分离培养的兔子宫平滑肌细胞、基质细胞和内膜上皮细胞的纯度均达到95％以上。在静态力学拉伸下培养14天后,在胶原凝胶上生长的平滑肌细胞和基质细胞按拉伸方向有序排列,上皮细胞生长在最上层。激素处理后,扫描电镜观察显示上皮细胞表面有羽状突或纤毛,并且附有大量的微绒毛。结论由平滑肌细胞、基质细胞、上皮细胞和Ⅰ型液态胶原构建,并经静态力学拉伸构建的组织工程化子宫片层能较好地模拟自然子宫的形态结构和功能。     

雌激素与孕激素在兔子宫内膜上皮细胞体外增殖中的作用

目的 探讨雌激素E2和孕激素P4不同水平对家兔子宫内膜上皮细胞体外增殖的影响。方法 离心法获取家兔子宫内膜上皮细胞;用上皮角蛋白抗体的免疫荧光细胞染色对细胞进行鉴定,用流式细胞仪检测上皮细胞的纯度。设不同雌激素和孕激素水平组合添加于培养液,利用MTT法间接测定上皮细胞的体外增殖能力。结果 利用离心法可获得高纯度的子宫内膜上皮细胞（96％）;雌激素（100nmol／L）和少量孕激素（10nmol／L）对上皮细胞增殖有促进作用。免疫荧光细胞检测结果表明,经激素刺激的子宫内膜上皮细胞对上皮角蛋白抗体反应呈阳性。结论 性腺激素对体外培养的子宫内膜上皮细胞有促进增殖的作用,而且不会使其分化为其他类型细胞。     

胃溃疡69例临床分析

胃溃疡是消化系统常见的疾病之一,严重影响患者身体健康[1-3],合并症较多使得溃疡面愈合较慢.本研究对69例胃溃疡患者临床治疗情况进行观察和分析,报告如下.     

基于流感病毒M2蛋白胞外区的双层蛋白质纳米颗粒的制备及免疫学效果评价

目的通过两步脱溶剂-交联法制备携带流感病毒血凝素茎部α螺旋区(HAα)、6个串联重复的M2蛋白胞外域(6M2e)和鞭毛蛋白(Flg)的双层蛋白质纳米颗粒, 探究其在小鼠体内的免疫效果。方法采用脱溶剂-交联法将融合蛋白FljB-6M2e-△D2D3-HAα和HAα-6M2e制备成双层蛋白质纳米颗粒。通过透射电镜和纳米颗粒跟踪分析仪进行物理表征后评估其细胞毒性。免疫小鼠后采用ELISA方法进行特异性抗体效价测定, ELISPOT检测细胞免疫水平, CCK-8法检测脾细胞的增殖情况。结果本研究成功制备了粒径为(130.03±2.96) nm的双层蛋白质纳米颗粒FljB-6M2e-△D2D3-HAα/ HAα-6M2e。免疫小鼠后产生的抗M2e-IgG抗体效价为1∶25 600, 抗HAα-IgG抗体效价为1∶12 800, 高于对照组小鼠, 差异均具有统计学意义(t=3.051和3.780, P=0.038和0.019)。与对照组相比, 多肽刺激可以使小鼠脾细胞显著增殖[M2e刺激增殖率:(154.18±2.34)%, HAα刺激增殖率:(151.51±1.56)%](t=12.942和24...     

伊托必利联合铝碳酸镁治疗胆汁反流性胃炎的临床观察

胆汁反流性胃炎是消化系统一种特殊的胃炎,其多是由于幽门功能不全,胃窦十二指肠运动障碍,胃排空延迟、胆囊功能障碍等不同因素导致有胆汁的十二指肠肠液反流到胃,从而引起胃黏膜化学性损失[1-4].本研究通过对86例胆汁反流性胃炎患者治疗情况进行观察和分析,现报告如下.     

伊托必利联合铝碳酸镁治疗胆汁反流性胃炎的临床观察

胆汁反流性胃炎是消化系统一种特殊的胃炎,其多是由于幽门功能不全,胃窦十二指肠运动障碍,胃排空延迟、胆囊功能障碍等不同因素导致有胆汁的十二指肠肠液反流到胃,从而引起胃黏膜化学性损失[1-4].本研究通过对86例胆汁反流性胃炎患者治疗情况进行观察和分析,现报告如下.     

胰高糖素样肽-1改善晚期糖基化终末产物诱导人主动脉内皮细胞铁死亡的机制研究

目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGE)诱导人主动脉内皮细胞(HAEC)铁死亡的作用及可能机制。方法将HAEC分为6组:对照组、AGE组、AGE+铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、AGE+GLP-1(7～37)组、AGE+GLP-1(9～36)组、AGE+GLP-1(28～36)组。每组设置3个平行组。培养48 h后, 试剂盒检测细胞活力及丙二醛(MDA)含量, 实时荧光定量聚合酶链反应检测铁死亡相关基因[前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]mRNA表达水平, Western blotting法检测细胞GPX4、ACSL4、苏氨酸蛋白激酶(LKB1)、磷酸化LKB1(p-LKB1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p‐AMPK)蛋白水平。组间比较采用单因素方差分析和t检验。结果与对照组相比, AGE组细胞线粒体出现形态异常, 且显著抑制细胞活力(P<0.05), AGE+Fer-1组细胞活力明显回升(P<0.05)。AGE组铁死亡正向调控基...