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1.
目的 通过对 1例中国遗传性多发性外生骨软骨瘤 (hereditary multiple exostosis, HME) 家系临床资料的整理及在 EXT1 8q23~ 24.1, EXT2 11p11~ 12的基因编码序列进行突变检测,寻找 HME 的致病基因,为发现该病临床表现的遗传学特点及发现新的基因突变以期待此研究可能预防遗传性多发性外生骨软骨造成患者肢体功能残存的发生. 方法 在 EXT1、 EXT2基因内设计引物,经 PCR和 DNA测序对基因编码序列及其临近内含子进行突变检测. 结果 在 EXT1、 EXT2的编码序列内没有发现突变. 结论 排除了 EXT1、 EXT2为该遗传性多发性外生骨软骨瘤家系治病基因的可能,为进一步研究发现新的基因突变提供了可能. 相似文献
2.
目的:了解以纤维蛋白胶(Fibrin sealant,FS)为载体的注射型骨修复材料[骨形态发生蛋白(BMP)]异位诱导成骨的作用。方法:实验分组为:实验组b(FS+bBMP)、对照组b(bBMP)、实验组r(FS+rhBMP-2)、对照组r(rhBMP)、对照组FS(FS)及空白对照组。将各组材料注射或植人小鼠肌袋内,采用用放射学、形态学、碱性磷酸酶(ALP)检测等方法对其成骨效应进行研究。结果:在以bBMP为成骨因子的实验区中,实验组b具有高效的骨诱导活性,其成骨量显著高于对照组b、对照组FS及空白对照组(P&;lt;0.01);在以rhBMP-2为成骨因子的实验区中,实验组r同样具有高效的骨诱导活性,其成骨量也显著高于对照组r、对照组FS及空白对照组(P&;lt;0.01)。结论:以FS为载体复合BMP的注射型骨修复材料具有高效的骨诱导活性。 相似文献
3.
兔髂骨生长板细胞的培养及体内成软骨作用的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 建立大量生产髂骨生长板软骨细胞的培养及保存方法,观察髂骨生长板细胞在裸鼠体内的成软骨作用,为生长板组织工程提供种子细胞。方法 取二周龄兔髂骨生长板软骨,经机械剪切和化学消化作用后,接种、培养及液氮保存,通过显微镜观察其生物学表现,并通过甲苯胺兰、碱性磷酸酶染色及Ⅱ型胶原染色对其生物学特性进行签定。将生长良好的第二代细胞注入裸鼠背部,于第四周取材,进行组织学观察。结果 细胞可在体外大量增殖并在六代内无明显反分化,但缺乏向肥大细胞进一步分化的能力。冷冻复苏细胞存活率为92%。注射的细胞悬液可在裸鼠体内形成软骨组织,并进一步向肥大细胞转化。结论 成功建立了髂骨生长板细胞的培养及冻存方法,证明髂骨生长板细胞可在体内进一步形成软骨组织并向肥大期细胞转化。 相似文献
4.
遗传性骨软骨瘤软骨细胞的生物学特性 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:观察遗传性骨软骨瘤软骨细胞的生物学特性。方法:采用透射电镜、细胞培养等方法观察肿瘤软骨细胞形态特征;同时观察肿瘤软骨细胞的增殖、贴附能力,与正常人关节软骨细胞做对照。结果:透射电镜(TEM)发现肿瘤软骨细胞膜附近含有大量的微丝结构,集结成束,与细胞突起有关;体外单层培养发现肿瘤软骨细胞突起增多,细胞呈现星形;骨软骨瘤软骨细胞的增殖与贴附能力随着传代的增加减慢和减低,传4代细胞增殖能力和贴附能力均与肿瘤原代细胞及正常关节软骨细胞具有明显差别(P<0.1)。结论:骨软骨瘤软骨细胞虽然与正常软骨细胞大体相似,但生物学特性存在明显区别:细胞形态改变,微丝增加,细胞增殖与贴附能力等均不同于正常软骨细胞。 相似文献
5.
可注射型骨修复材料对兔MSC增殖及分化的影响 总被引:17,自引:5,他引:12
目的:观察以纤维蛋白胶为载体的骨修复材料对兔骨髓基质细胞(marrow stromal cell,MSC)增殖及分化的影响。方法;采用细胞培养及组织化学等方法对各材料组兔MSC的增殖、碱性磷酸酶(alkaline phosphase,ALP)的活性和染色、细胞贴壁率及I型胶原表达进行研究。结果:(1)各组材料对细胞贴壁率及促增殖作用的影响总体上由强到弱依次是:对照组2→实验组→对照组1[纤维蛋白胶(fibrin sealant,FS)]→对照组3→单纯对照组,差异有显著性(P<0.05)。(2)各组细胞的I型胶原表达水平和ALP活性由强到弱依次是:实验组→对照组3→对照组1→对照组2→单纯对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论:以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料可显著保进MSC贴壁率和向成骨细胞方向的分化水平。 相似文献
6.
目的:观察脂质体介导质粒pEGFP-N1、重组腺病毒Ad5-EGFP、重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP基因转染人脂肪来源成体干细胞后增强型绿色荧光蛋白的表达及细胞毒性,探讨适用于脂肪来源的成体干细胞的转基因方法。方法:实验于2006-01/07在国家人类基因组北方中心和北京大学第三医院完成。全髋关节置换术患者的皮下脂肪由北京大学第三医院骨科提供,均征得患者及其家属同意。pEGFP-N1(Clotech公司),Ad5-EGFP,rAAV-2/1-EGFP(本元正阳公司)。②自成人皮下取少量脂肪组织,经机械剪切及Ⅰ型胶原酶消化后获取脂肪来源的成体干细胞,体外培养扩增。③采用脂质体介导质粒pEGFP-N1、重组腺病毒Ad5-EGFP、重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP3种转染方法,观察增强型绿色荧光蛋白的表达及对细胞毒性的影响。④细胞转染后24h,将5×104细胞悬液接种于24孔板中,每周换液3次,绘制细胞生长曲线。以正常未转染细胞作为正常对照。观察不同转染方法对细胞增殖的影响。结果:①不同转染方法的感染效率比较:pEGFP-N1脂质体转染后细胞毒性较大,且感染效率低,仅为10.5%。重组腺病毒Ad5-EGFP转染率高,当感染复数为5×102时,感染效率达82.5%;当感染复数低于1×103时,对细胞无明显损害。重组腺相关病毒rAAV-2/1-EGFP转染法不能有效感染人脂肪来源的成体干细胞。②不同转染方法对细胞增殖的影响:重组腺病毒Ad5-EGFP转染和重组腺相关病毒AAV-2/1-EGFP转染人脂肪来源的成体干细胞后,对细胞增殖能力无明显影响,基本同正常对照细胞(P>0.05)。而pEGFP-N1脂质体转染后细胞增殖能力较正常对照明显下降,转染后3~10d差异有显著性意义(P<0.05)。结论:重组腺病毒Ad5-EGFP可作为一种高效的脂肪来源成体干细胞的示踪工具,提示5型复制缺陷型腺病毒是其合适的转基因载体。 相似文献
7.
目的:通过对人遗传性骨软骨瘤软骨细胞的体外培养,观察肿瘤软骨细胞的生长特性及相关生物学特点,为进一步研究骨软骨瘤细胞学起因奠定基础。方法:原代培养遗传性骨软骨瘤组织中的软骨细胞并进行传代,进行活细胞形态观察,同时测定细胞增殖能力及贴壁率,与正常人关节软骨细胞做对照。结果:原代细胞在经过完全消化后,细胞活力仍达到95%。传代后骨软骨瘤细胞体积增大,细胞呈现星形,树突增多,细胞内颗粒多且明显。骨软骨瘤细胞增殖随着传代的增加减慢,第2代细胞增殖能力已经与原代细胞产生明显差别(P<0.01,t=3.203)。原代骨软骨瘤细胞在24h内大部分贴壁,随着传代的增加,细胞贴附能力下降,第4代细胞贴壁率与原代细胞产生明显区别(P<0.01,t=4.611)。结论:体外培养的骨软骨瘤细胞从形态,生物学特性(细胞增殖情况、细胞贴附能力)均不同于正常软骨细胞,为今后更加深入的研究遗传骨软骨瘤的病因学奠定一定的体外培养基础。 相似文献
8.
中国遗传性多发性骨软骨瘤的临床资料及突变检测1例报告 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:通过对1例中国遗传性多发性外生骨软骨瘤(hereditary multiple exostosis,HME)家系临床资料的整理及在EXT1 8q23~24.1,EXT2 11p11~12的基因编码序列进行突变检测,寻找HME的致病基因,为发现该病临床表现的遗传学特点及发现新的基因突变以期待此研究可能预防遗传性多发性外生骨软骨造成患者肢体功能残存的发生。方法:在EXT1、EXT2基因内设计引物,经PCR和DNA测序对基因编码序列及其临近内含子进行突变检测。结果:在EXT1、EXT2的编码序列内没有发现突变。结论:排除了EXT1、EXT2为该遗传性多发性外生骨软骨瘤家系治病基因的可能,为进一步研究发现新的基因突变提供了可能。 相似文献
9.
目的调查分析白水县6岁以下儿童生长发育与营养状况,了解白水县儿童生长发育与营养状况存在的主要问题,为进一步制定营养改进措施提供依据。方法按中国CDC"6岁以下儿童状况调查"方案,对陕西省国家贫困县白水县323名6岁以下儿童进行身高、体重的测量和血红蛋白检测,并以问卷的形式对以上儿童的家长进行了喂养方式及辅食添加状况进行调查。结果 6岁以下儿童低体重率为1.55%,生长迟缓率为3.41%,消瘦率为0.62%,贫血率10.53%。结论婴幼儿辅食添加的时间、质量和数量上尚存在不科学之处。原因与经济贫困有关外,还与当地的婴幼儿家长缺乏婴幼儿喂养知识有关。 相似文献
10.
人胚肋软骨静止区细胞的体外培养及生物学特性研究 总被引:1,自引:2,他引:1
目的:研究体外培养的人胚肋软骨静止区细胞的生物学特性及分化规律,为组织工程生长板的研究提供种子细胞。方法:采用Ⅱ型胶原酶消化的方法获取人胚肋软骨静止区细胞.观察细胞形态学变化;测定细胞生长曲线;借助特殊染色、免疫荧光染色的方法了解糖胺聚糖、碱性磷酸酶、Ⅱ型胶原酶的合成情况。结果:贴壁后细胞呈多角形,从第6代开始绝大多数细胞转变为成纤维细胞状,细胞培养至第2代开始分泌大量Ⅱ型胶原。结论:体外单层培养的人胚肋软骨静止区细胞具有正常的生长增殖与分化能力,可分化至成熟期软骨细胞。 相似文献