miRNA-29a和miRNA-10a-5p对脓毒症所致急性肾损伤患者28d死亡率的预测价值

目的 探讨miR-29a和miR-10a-5p对评估脓毒症伴有急性肾损伤(AKI)患者28 d死亡率的预测价值.方法 收集我院124例急性肾损伤患者(AKI)血清样本,分为观察组(74例脓毒症所致AKI)和对照组(脓毒症无AKI)41例,记录患者一般情况,并用RT-PCR检测其中miR-29a和miR-10a-5p的表达情况,随访28 d,记录患者生存情况,采用Pearson相关分析检验miR-29a和miR-10a-5p与观察组患者血清肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)和肾损伤分子1(KIM-1)的相关性;多因素Logistic回归分析miR-29a、miR-10a-5p、Scr、Cys-C、KIM-1以及其他危险因素与脓毒症患者28 d死亡率的相关性.ROC曲线分析比较miR-29a和miR-10a-5p与Cys-C和Scr在脓毒症患者预后评估中的价值,最后进一步用统计学方法分析miR-29a和miR-10a-5p联合与Scr及Cys-C联合对脓毒症患者预后评估的价值.结果 随访28 d后:(1)74例AKI患者中21例死亡,占整体人数的35.53％;(2)相比于生存组,死亡组患者血清Scr及Cys-C表达上升(P＜0.05),死亡组患者血清中miR-29a和miR-10a-5p表达升高,有统计学意义(P＜0.05);(3)Pearson相关分析结果显示miR-29a和miR-10a-5p分别与Scr、Cys-C及KIM-1表达呈正相关;(4)多因素回归结果显示,miR-29a和miR-10a-5p均为脓毒症患者死亡的独立危险因素;(5)ROC曲线分析结果显示miR-29a和miR-10a-5p曲线下面积(auRoC)分别为0.82(95％CI,0.71-0.89)及0.75(95％CI,0.64-0.85),Cys-C、Scr和KIM-1曲线下面积分别为0.72(95％CI,0.66-0.86)、0.71(95％CI,0.63-0.84)及0.81(95％CI,0.72-0.81).miR-29a及miR-10a-5p二者联合检测的auROC值优于单一检测miR-29a、miR-10a-5p、Cys-C、Scr和KIM-1(P＜0.05).结论 miR-29a和miR-10a-5p在评估脓毒症患者死亡率时具有良好的预测价值.     

结肠癌细胞总RNA电穿孔法体外转染成熟树突状细胞

目的：探讨结肠癌细胞总RNA电穿孔法转染成熟树突状细胞（mDCs）的转染效率及对树突状细胞(DCs）特征和功能的影响,为DCs核酸肿瘤疫苗的制备及其在临床应用奠定基础。方法： 用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）、重组人白细胞介素4（rhIL-4）将人外周血单核细胞(PBMC)诱导成未成熟树突状细胞（imDCs）,肿瘤细胞坏死因子-α（TNF-α）作用24 h刺激其成熟。实验设为imDCs组和mDCs组。Trizol法提取特异表达癌胚抗原(CEA)的结肠癌细胞SW480总RNA,电穿孔法将总RNA转染mDCs,设为RNA转染DCs组。流式细胞术检测各组细胞表面分子标志变化和转染DCs组的CEA蛋白表达情况。ELISA法检测各组细胞IL-12分泌水平。结果：rhGM-CSF、rhIL-4、TNF-α能将PBMC诱导成具有典型毛刺样突起形态学特征的DCs。imDCs组DCs表面CD1a表达呈阳性,CD80弱阳性,CD83阴性。mDCs组DCs表面CD1a、CD83、CD80表达均呈阳性。RNA转染DCs组DCs表面CD1a、CD83、CD80表达均呈阳性。总RNA转染mDCs后4 h检测到CEA蛋白表达。mDCs组、RNA转染DCs组IL-12分泌量与imDCs组比较均显著升高（P＜0.01), 而mDCs组与RNA转染DCs组比较差异无显著性（P>0.05)。结论：结肠癌细胞总RNA可通过电穿孔法转染mDCs并表达CEA蛋白,电穿孔不改变mDCs的表面分子特征及功能。     

重症监护病房236例脓毒症患者临床资料回顾性研究

目的探讨脓毒症患者临床诊疗中的特点及影响预后的关键因素。方法回顾性分析重庆市中医院重症监护病房(ICU)2009年1月至2012年12月收治的236脓毒症患者的病历资料,将所有患者分为28d存活组和28d死亡组,录入相关临床数据进行统计学分析。结果相当一部分脓毒症患者诊断前缺乏全面的临床评估,早期集束化治疗达标率低,影响患者存活率的疾病因素包括:年龄、急性生理和慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分、前降钙素原水平、受累脏器数、早期集束化治疗达标率(P<0.05),不同感染部位,不同白细胞、C反应蛋白水平患者存活率差异无统计学意义(P>0.05)。结论脓毒症是ICU常见病种,病死率高,建立脓毒症早期预警机制,提高集束化治疗达标率,规范脓毒症诊疗流程是提高存活率的关键。     

薯蓣皂苷元对人胃低分化粘液腺癌细胞作用的研究

目的观察薯蓣皂苷元(Diosgenin,Dio)对人胃低分化粘液腺癌(MGC-803)细胞的作用,并初步探讨其作用机制.方法MTT法测Dio对MGC-803细胞的抑制作用;考察Dio对MGC-803细胞分裂和集落形成能力的影响;采用3H-TdR掺入法检测Dio对MGC-803细胞DNA合成的影响.结果一定浓度范围内Dio对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;Dio明显抑制MGC-803细胞分裂和集落形成,半数抑制浓度(IC50)为13.17 mg/L,Dio能显著抑制MGC-803细胞DNA合成.结论Dio对MGC-803细胞的抑制作用与抑制该细胞DNA合成有关.     

降钙素原、超敏C反应蛋白、胰石蛋白联合检测对脓毒症患儿预后的预测价值

目的探讨降钙素原（procalcitonin,PCT）、超敏C反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）、胰石蛋白（pancreatic stone protein,PSP）对评估脓毒症患儿预后的价值。方法收集我院ICU收住的确诊为脓毒症的患儿106例,平均（4.4±1.6）岁。记录患儿一般情况及小儿危重病例评分（PCIS）。入院后第1天抽取静脉血,检测所有患者血清中PCT、hs-CRP、PSP的表达情况。随访28 d,记录患儿生存情况。Pearson 相关分析检验PCT、hs-CRP、PSP与 PCIS 的相关性;多因素logistic回归分析PCT、hs-CRP、PSP以及其他危险因素与脓毒症患儿预后生存（28 d 死亡与否）的相关性。ROC曲线分析比较PCT、hs-CRP、PSP单独或联合检测在脓毒症患儿预后评估中的价值。结果 [随访28 d,34例患儿死亡,占整体的32.08%。相比于生存组,死亡组PCIS评分降低（P<0.001）;同时,死亡组患者血清中PCT、hs-CRP、PSP表达升高（P<0.001）。Pearson相关分析显示PCT与PCIS呈负相关（ r=-0.437 2,P<0.001）;hs-CRP与PCIS呈负相关（ r=-0.649 7,P<0.001）;PSP与PCIS呈负相关（ r=-0.645 3,P<0.001）。多因素logistic回归结果显示,高水平PCT〔标准偏回归系数（B’）=0.481,P=0.000〕、hs-CRP（B’=0.392,P=0.014）、PSP（B’=0.314,P=0.041）,都是脓毒症患儿28 d死亡的独立危险因素。ROC曲线分析结果显示PCT、hs-CRP以及PSP曲线下面积（AUC）分别为0.86〔95%可信区间（CI）,0.78～0.92〕、0.70（95%CI,0.61～0.79）以及0.69（95%CI,0.60～0.78）。PCT、hs-CRP和PSP三者联合(0.481×PCT+0.392×hs-CRP+0.314×PSP)检测的AUC值〔0.92（95%CI,0.85～0.96）〕优于单一检测PCT、hs-CRP或PSP（P<0.001）;联合检测值＜122.3时脓毒血症患儿预后好（28 d生存）,≥122.3时预后差（28 d死亡）。结论血清PCT、hs-CRP、PSP均与PCIS呈负相关,且这3个血清学指标联合检测在评估脓毒症患儿预后时具有良好的预测价值。     

腓骨支架固定治疗Pilon骨折16例分析

随着建筑业、交通运输业的迅速发展Pilon骨折明显增加。由于本病系胫骨远端的粉碎性骨折，使胫骨负重面产生不同程度的碎裂，多伴有胫骨骨质缺损及远端松质骨压缩，常合并腓骨骨折，其高度的不稳定性，且其并发症及合并症发生率高，因此它是骨科临床中较难治疗的一种创伤，有关临床研究亦非常活跃。     

Evans综合征两例报告

<正> Evans综合征,又称自身免疫性溶血性贫血—特发性血小板减少性紫瘢,Fisher—Evans综合征国内报告尚少,我院遇二例,报告如下: 病例摘要例1 崔××,男性,58岁。患者于一个多月前出现头晕、牙齦出血伴鼻衄,并发现四肢有散在出血点、黑便、茶色尿。后病情渐重,感活动后心悸、气短。在当地医院以“血小板减少”治疗无效。于     

肱骨外髁骨折患者临床治疗体会

目的探讨肱骨外髁骨折患者的临床治疗效果。方法收集我院近年来收治的50例肱骨外髁骨折患者的资料进行回顾性分析。结果 50例患者随访1～3年,优者28例,良者18例,有效2例,无效2例。结论正确诊断、有效治疗,是保证患者康复的关键。     

针刺治疗急性胃痛的应用及疗效分析

目的:探讨针刺治疗急性胃痛的应用及疗效。方法:选取我院74例急性胃痛患者,随机分组,药物治疗组采取常规药物治疗,药物联合针刺组则采取常规药物加针刺治疗。比较两组疗效、1h内胃痛缓解程度、不良反应。结果:药物联合针刺组疗效、1h内胃痛缓解程度相比药物治疗组更好,P0.05。两组治疗过程中生命体征平稳,无明显不良反应。结论:常规药物联合针刺治疗急性胃痛效果好。     

CEA mRNA转染的成熟树突状细胞体外诱导特异性抗肿瘤作用

目的:将体外转录的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)mRNA转染入成熟树突状细胞(dendritic cell,DCs),观察其体外诱导的特异性抗肿瘤作用。方法:GM-CSF、IL-4、TNF-α体外诱导成熟DCs并用流式鉴定。构建pcDNA3.1-CEA载体,体外转录为CEA mRNA,电穿孔法将CEA mRNA转染入DCs。流式细胞术检测转染后DCs中CEA蛋白的表达;MTT法检测DCs刺激T细胞增殖能力;LDH法检测DCs体外诱导的CTL的特异性抗肿瘤作用;ELISA法检测诱导的CTL上清中IFN-γ的水平。结果:CEA mRNA转染后DCs细胞内CEA蛋白显著高于对照组(83.32%vs3.34%,P<0.01)。CEA mRNA转染组DCs在效靶比为1∶10时,刺激T细胞增殖作用最强,明显高于未转染组[(19.11±1.89)%vs(15.59±0.70)%,P<0.05]。CEAmRNA转染组DCs能产生CEA特异性的CTL效应,在效靶比为5∶1、10∶1、20∶1和40∶1时杀伤率分别为[(5.42±0.87)%、(14.09±1.13)%、(27.16±0.72)%、(32.49±0.84)%,P<0.01],而未转染组和对照靶细胞均无杀伤作用。转染组DCs诱导的CTL上清中IFN-γ分泌量显著高于未转染组[(141.73±28.61)vs(9.45±4.63)pg/ml,P<0.01]。结论:CEAmRNA转染的成熟DCs体外能产生特异性抗肿瘤作用,为研制CEA RNA-DCs疫苗提供了实验依据。