两种检测抗双链DNA抗体方法对系统性红斑狼疮的诊断价值比较

目的 探讨间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)同时检测对于系统性红斑狼疮(SLE)诊断的价值.方法 回顾性研究,回顾北京大学第一医院2011年6月1日至9月30日所有抗dsDNA抗体检测的病例2712例,记录每份病例的抗dsDNA抗体检测结果及其临床诊断.计算IIF和ELISA方法检测敏感度、特异度,运用Kappa检验进行一致性检验.结果 ELISA方法检测抗dsDNA抗体的阳性率(16.3％)要略高于IIF方法(13.1％),但二者的总体结果基本一致(Kappa=0.641,P＜0.05).在不一致(9.2％)中以IIF法阴性同时ELISA法阳性多见(6.2％).以SLE的临床诊断为金标准,IIF与ELISA检测结果诊断SLE的准确性分别为84.8％和84.4％,差异无统计学意义(x2 =0.25,P＞0.05).IIF诊断SLE的敏感度和特异度为46.1％和99.2％,ELISA诊断SLE的敏感度和特异度为51.3％和96.7％.结论 应将IIF和ELISA 2种方法同时应用于抗dsDNA抗体的检测.若先用ELISA筛查,阳性标本再加测IIF,会将至少3.0％的ELISA阴性IIF阳性标本误判为阴性.IIF阴性ELISA阳性标本应进一步检测抗dsDNA抗体亲和力来辅助SLE的诊断和病情评估.     

捕获法ELISA检测抗蛋白酶3抗体对韦格纳肉芽肿的临床应用价值

目的探讨捕获法ELISA检测血液中抗蛋白酶3抗体对韦格纳肉芽肿(Wegener's granulomatosis,WG)的敏感性和特异性以及与间接免疫荧光法(indirec timmunofluorescence assay,IIF)的相关性。方法用捕获法ELISA、经典ELISA及IIF检测72例WG患者、206例健康献血员和24例其他自身免疫性疾病患者血清中的抗蛋白酶3(proteinase3,PR3)抗体和胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(cytoplasmic anti-neutrophil cytoplasmic antibodies,cANCA)。结果PR3捕获法ELISA、经典ELISA测抗PR3对WG的敏感性分别为87.5%和73.6%,二者的特异性均为100%;单独用捕获法ELISA或IIF检测,对WG的检出率分别为87.5%和84.7%,而联合应用检出率可达到91.6%。结论捕获法ELISA检测抗PR3对WG的敏感性以及与IIF的相关性优于经典ELISA,对可疑WG患者,两法联合应用可提高WG的诊断率。     

酶联免疫吸附试验检测人血清抗双链DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的性能评估

目的对人血清抗双链DNA(dsDNA)抗体的酶联免疫吸附检测试剂盒Anti-dsDNA-NcX ELISA行实验室检测性能评估及在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用评价。方法对Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒进行实验性能评价;并用间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)两种方法共三种试剂盒,同时检测健康体检正常者30例、非系统性红斑狼疮自身免疫病患者27例及SLE患者92例血清抗dsDNA抗体。以SLE的临床诊断为金标准,评价Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒用于SLE的诊断性能。结果 Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒达到了各项实验室检测性能指标,试剂盒的最低检测限为2.7 U/m l,线性相关系数为0.998,批内精密度变异系数(CV)<6%,批间精密度CV<10%,溶血、脂血、黄疸对检测结果没有干扰,与类风湿性关节炎、干燥综合征等非SLE自身免疫病患者血清间不存在交叉反应。健康体检正常者血清抗dsDNA抗体水平P97.5为67.0 U/m。l92例狼疮性肾炎患者,两种ELISA试剂的阳性率(60.9%)均高于IIF(20.6%),差异有统计学意义(P...     

多种免疫球蛋白参与Rho(D)血型抗体活性的研究

目的研究骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者体内效价高达２３０的抗Ｒｈｏ（Ｄ）活性抗体，弄清此抗体的免疫球蛋白组分，为多种免疫球蛋白参与Ｒｈ系统血型抗体活性提供客观实验依据。方法用配组红细胞在菠萝酶和抗人球蛋白介质中鉴定该患者血清抗体的特异性，用Ｒｈｏ（Ｄ）阳性红细胞测定其效价；再用Ｒｈｏ阳性红细胞吸附该血清中的抗Ｒｈｏ抗体，用枸橼酸放散法将抗体从红细胞上释放出来，获取精提液。通过免疫电泳、琼脂扩散、双抗体夹心酶联免疫吸附法检测该精提液中免疫球蛋白的种类和含量。５年１０个月后用全自动特种蛋白与药物分析仪复验－３０℃保存的样本。结果该患者血清中仅含有单一特异性的抗Ｒｈｏ抗体，其效价为２３０。用Ｒｈｏ阳性红细胞吸收和放散试验获取的精提液中仅含有抗Ｒｈｏ活性抗体。免疫生物化学的分析和鉴定结果表明该精提液中含有ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ五种免疫球蛋白和补体Ｃ３。结论该患者实验结果提示该患ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ与ＩｇＧ、ＩｇＭ一道参与了Ｒｈ系统血型抗体活性     

化学发光免疫分析测定EB病毒衣壳抗原IgM抗体的方法学评价

目的　对化学发光免疫分析法 (chemiluminescentimmunoassay ,CLIA)测定EB病毒衣壳抗原的IgM抗体 (EBV VCAIgM)进行方法学评价 ,同时将其对儿童传染性单核细胞增多症 (infectiousmononucleosis,IM)的诊断准确性与传统的ELISA测定相比较。方法　在全自动CLIA仪上测定 88例血清标本 ,同时用ELISA法测定。结果　CLIA测定EBV VCAIgM的灵敏度为 0 .6 4U/ml;低、中、高浓度时的批内CV分别为 4 .1%、1.7%和 1.4 % ,批间CV分别为 4 .9%、2 .8%和 2 .4 % ;回收率为 93%～ 10 7% ,理论值与实测值间的回归方程为Y =0 .0 96 7 1.0 0 93X ,相关系数r =0 .9996 (P <0 .0 0 0 1) ;ROC曲线显示CLIA测定敏感性和特异性均在 90 %以上 ,曲线下面积为 0 .992 ,显著高于ELISA(P <0 .0 5 )。结论　CLIA是目前测定EBV VCAIgM较好的方法 ,适用于临床检测 ,可提高小儿IM诊断水平     

1212例就诊患者血清抗嗜肺军团菌1～14血清型抗体水平调查

目的了解我院近5年来门诊及住院患者血清嗜肺军团菌的抗体阳性率以及1～14血清型的分布特点。方法用间接免疫荧光法检测患者血清抗嗜肺军团菌血清抗体,并查询临床资料。结果1212例患者血清抗嗜肺军团菌抗体阳性163例,总阳性率为13.4%。14个血清型中,4型的抗体阳性率最高,为12.0%;其次为12型(8.5%)、5型(7.8%)、14型(6.1%)、10型(5.9%);其余血清型的抗体阳性率较低。在阳性结果中,3种血清型同时阳性最为多见,占21.0%;其次为4种或5种同时阳性。各个科室中,呼吸病科嗜肺军团菌抗体阳性检出率最高,为23.3%,其中又以4型最为多见,为19.0%,其次为12型(17.2%)。结论我院就诊患者存在不同血清型的嗜肺军团菌感染,其中以4型最为多见,不同于既往报道的西方国家1型和国内6型。嗜肺军团菌与其他病原微生物以及自身各血清型之间可能存在交叉反应,研制血清型特异的抗原用于临床检测将有助于提高抗嗜肺军团菌抗体检测的准确性。     

血清学抗体检测对炎症性肠病的诊断价值

炎症性肠病(IBD)是胃肠道非特异性炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎(UC)及克罗恩病(CD).IBD的诊断需对患者的临床表现、内镜和(或)影像学表现及病理组织学检查等进行综合判断,目前尚缺乏特异性血清学诊断指标[1].IBD的发病机制尚不清楚,多数认为是环境因素与遗传因素相互作用引起的自身免疫性疾病.因此,自身抗体的检测有可能成为:IBD诊断的血清学指标之一[2].本研究旨在探讨抗胰腺外分泌腺抗体(PAB)、抗酿酒酵母抗体(ASCA)、抗杯状细胞抗体(GAB)及抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的检测在IBD诊断中的应用价值.