CatWalk步态分析系统分析大鼠大脑中动脉阻塞模型的行为学特征

目的 探讨以CatWalk步态分析系统对大鼠暂时性大脑中动脉阻塞(MCAO)模型进行行为学评价的可行性.方法 30只SD雄性大鼠按随机数字表法分为MCAO模型组和对照组,其中模型组以线栓法制作成暂时性MCAO模型.分别于模型制作后第1、3、7、14、28天应用传统的18分制mNSS评分以及CatWalk步态分析系统对2组大鼠进行行为学特征分析.结果 CatWalk结果 显示MCAO模型组大鼠的四肢压强、接触面积和运行速度均比对照组大鼠减小减慢;在协调性方面,模型组大鼠造模后第3天时同为后侧的左后肢→右后肢的时间较对照组明显缩短,且其同为左侧的左前肢→左后肢的时间亦较对照组明显缩短,这一变化在第28天时仍然存在;在造模后第3天模型组出现了在对照组中并未见到的Ra型(1.5％)和Rb型(2.3％)步序;但步调、站立时间、抬爪时间和规律指数等参数在2组间差别不明显.结论 CatWalk步态分析系统在压强、速度、接触面积、步态以及协调性等方面可反映脑缺血造成的损伤及其随时间变化的过程,可用于动物模型的多种行为学特征的综合分析.     

慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞

背景:原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法。目的:验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况。将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况。结果与结论:基因转染48h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减。转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上。提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究。     

高温高湿环境颅脑火器伤脑组织病理变化研究

目的研究高温高湿环境颅脑火器伤后脑组织病理学的改变,方法选用杂种狗6只,在高温高湿环境下采用国产54式军用手枪,7.62mm手枪弹,枪口距动物30 cm远,于狗额部冠状方向致狗脑火器伤。伤后脑组织大体病理及切片进行光、电镜下形态学变化观察。结果脑组织挫伤出血,神经毯疏松,神经胶质细胞肿胀,白质内大量轴索损伤;脑血管周围间隙明显增宽和脑内血管痉挛表现;皮层下细胞存在液化坏死,皮层细胞空泡变性及坏死;外伤性蛛网膜下腔出血。结论高温高湿环境颅脑火器伤白质内轴突损伤严重,除原发伤道区、挫伤区和震荡区外,枪伤可引起皮层神经细胞的反弹性损害和皮层下组织细胞的挤压性破坏。     

高温高湿环境下颅脑火器伤血液流变学变化研究

目的研究高温高湿环境下颅脑火器伤伤前和伤后2 h血液流变学变化。方法选用杂种狗6只,采取高温高湿环境下手枪弹致颅脑火器伤模型。伤前和伤后2 h抽血进行血液流变学检测及相关血气分析。结果高温高湿环境下颅脑火器伤后血液流变学高切、中切、低切和血浆粘度无明显改变,血液PO2值和PaCO2值下降。结论高温高湿环境下颅脑火器伤后早期血液流变学变化不明显。     

高温高湿颅脑火器伤血气分析和电解质变化

目的研究高温高湿环境下颅脑火器伤血气分析和电解质变化。方法选用杂种狗6只,采取高温高湿环境下手枪弹致颅脑火器伤模型。检测伤前与伤后2 h血气分析和电解质改变。结果伤后血液PO2、BE、HCO3-、PaCO2、TCO2下降,血钠、钙离子浓度无明显变化,血钾离子浓度降低。结论高温高湿环境下颅脑火器伤中可引起低氧、呼吸性碱中毒和低钾血症。     

高温高湿环境下运动对战士血红蛋白的影响

本实验通过部队战士在高温高湿环境下进行野外跑步实验,测定运动前后战士红细胞比容的改变,分析3组战士的红细胞比容的改变差别,为战士今后训练提供指导,同时也为我们临床治疗脑外伤和脑出血后出现的高热提供依据。1　对象和方法1.1　对象　随机选择高温高湿环境下生活的南沙守礁战士90例,全部为男性,其中新战士6 0例,入伍2 a内,年龄16～2 2岁,随机分为两组,新战士组,平均年龄19.2 3岁,新战士服药组(口服乌拉地尔片剂,商品名:利喜定,西安利君制药厂生产,剂量30 mg/片) ,平均年龄19.86岁;老战士30例,入伍2 a以上,年龄2 2～2 8岁,平均年龄2 4 …     

高温高湿环境下运动前后人体相关生化指标的变化

目的：观察高温高湿环境下运动前后人体相关生化指标影响的改变情况，为运动训练提供指导及理论依据。方法：选取在高温高湿环境下生活了1年以上海军守礁健康男性战士90名，按年龄分成老战士组(n=30)和新战士组，其中新战士组随机分为新战士对照组(n=30)和新战士服药组(n=30)，在高温高湿环境下20min内跑步3000m，其中新战士服药组在运动前7h和3h口服乌拉地尔片剂(西安利君制药厂生产，30mg／片，批号：040321)30mg。测定跑步前后的血钾离子、钠离子、氯离子、尿素氮和血糖的改变。结果：3组战士运动后的钠离子[老战士组、新战士组和新战士服药组分别为(142，80&;#177;1.94)，(144，42&;#177;4.41)和(141．27&;#177;1，17)mmol／L]、氯离子水平[以上3组分别为(110．43&;#177;1．81)，(107．67&;#177;2，75)和(108，93&;#177;1.48)mmol／L]高于运动前，差异有显著性意义(t=-14，082～-4.230，P均&;lt;0．01)，而血钾离子、血糖与运动前比较，差异无显著性意义。结论：高温高湿环境对人体有关的生化指标影响较大，新老战士在此环境下出现的耐受和适应性不同，口服乌拉地尔片剂可以降低和减少运动前后的钠离子、氯离子水平。     

高温高湿环境下颅脑火器伤对狗肝脏组织的损害作用

目的研究高温高湿环境下,颅脑火器伤对狗肝脏组织的影响。方法选取杂种狗,随机分为高温高湿对照组5只和高温高湿颅脑枪伤组6只,在高温高湿环境下使用手枪弹致颅脑火器伤模型。检测体温、呼吸、心率改变,血液凝血功能和血气分析,伤后肝脏组织病理检查。结果伤后体温增高、心率增快,出现低氧血症、低碳酸血症,凝血因子变化;肝脏肿大、肝窦扩张,其内充有大量红细胞的肝淤血表现。结论高温高湿环境颅脑火器伤对肝脏组织有损害作用。     

人类GAD67基因转染骨髓基质源性神经干细胞及初步检测

目的利用转基因技术将人类谷氨酸脱羧酶（GAD）67基因转染骨髓基质源性神经干细胞仍MSCs-D-NSCs），获得GAD67修饰的成体专能干细胞。方法以PCR、双酶切及测序鉴定pEGFP-C2-GAD67和pcDNA3.1-GAD67重组子；利用密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs并促其向NSCs方向分化，将编码人类GAD67基因的真核表达质粒pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3．1-GAD67分别转染BMSCs-D-NSCs，荧光显微镜下观察并用流式细胞仪检测转染效率。结果pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD6，均可扩增出约1800bp目的条带，经双酶切和基因测序证实。荧光显微镜下观察可见大量绿色荧光细胞，两种载体转染效率分别为39.3％和40.5％。结论pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD67真核表达载体重组正确，利用脂质体介导人类GAD6，基因能有效转染BMSCs-D-NSCs，为进一步观察其GAD67基因和蛋白的表达提供了前提条件。