斑马鱼mcm3合子基因敲除实验模型的构建与鉴定

目的 构建斑马鱼mcm3合子基因突变体,研究mcm3合子基因在斑马鱼胚胎早期发育中的作用.方法 利用系统发育树分析不同物种间mcm3基因的保守性;利用国家生物技术信息中心(NCBI)网站及Jalview软件序列比对,分析斑马鱼MCM3蛋白与人类MCM3蛋白之间的氨基酸同源性;用CRISPR/Cas9技术构建可稳定遗传的斑马鱼mcm3合子基因缺失突变体;提取胚胎的基因组DNA后进行基因测序,检测斑马鱼mcm3合子基因突变类型;利用原位杂交检测mcm3突变体中mcm3 mRNA的表达水平.结果 斑马鱼合子基因mcm3与人类mcm3基因同源,且高度保守;可稳定遗传的mcm3合子基因突变体成功构建;在mcm3突变体斑马鱼中,胚胎从第3天开始出现头和眼睛,其外部表型较野生型斑马鱼小,且mcm3纯合子胚胎在第8天后相继死亡;运用整胚原位杂交发现,mcm3在野生型斑马鱼的头部、眼睛、中后脑边缘、鳃、胸腺及内胚层组织中高表达,但在mcm3突变体斑马鱼中,mcm3 mRNA的表达水平明显降低.结论 斑马鱼mcm3基因缺失突变体成功构建,并且mcm3基因在斑马鱼的早期胚胎发育中起重要作用.     

卵黄囊瘤临床病理分析

卵黄囊瘤(yolk sac tumor,YST),(又名内胚窦瘤,endoder-m al sinus tumors)是一种起源于生殖细胞的高度恶性肿瘤。大约占原始生殖细胞肿瘤的20%。在20岁以下的女性它们与无性细胞瘤同样常见。它们最常发生在儿童和青春期,平均年龄19岁,40岁以上极为罕见。常发生于性腺部位,也可     

肺小细胞癌45例临床病理分析

目的回顾分析45例肺小细胞癌的病理形态及免疫组化特点,复习相关文献资料,研究肺小细胞癌的病理诊断依据。方法收集本院45例肺小细胞癌临床病理学资料,进行常规HE切片及免疫组化染色。结果 45例肺小细胞癌中病免疫病理检查结果显示:EMA 41例、NSE 40例、CK 39例、5-HT 36例均多呈阳性反应。结论肺小细胞癌向上皮及神经内分泌分化,表明肺小细胞癌组织起源于多能干细胞。     

上皮样血管平滑肌脂肪瘤临床病理诊断及误诊分析

本文报道3例发生于肾、肝的上皮样血管平滑肌脂肪瘤（angiomyolipoma，AML），并结合近年来国内外文献，从临床病理学、免疫组织化学、组织起源及误诊原因等方面进行研究探讨。     

肛管直肠原发性恶性黑色素瘤临床误诊与病理诊断分析

我院1984～2004年收治恶性黑色素瘤（以下简称“恶黑”）5例，均经病理最终证实，并结合文献对其临床病理形态学特点、组织发生、免疫组织化学及误诊原因等进行探讨。     

恶性卵黄囊瘤12例临床病理分析

恶性卵黄囊瘤,又名内胚窦瘤,是一种起源于生殖细胞的高度恶性肿瘤。在临床和病理上常易漏诊或误诊近年我科遇12例,现将病理诊断等分析如下 1 临床资料 12例中男2例,女10例,年龄在4～27岁间,平均年龄15岁,多见青少年。发生部位卵巢10例,其中双侧1例,睾丸2例。症状出现至就诊时间在7天～9个月,平均为3个月。主要症状有腹部及睾丸肿块、腹     

斑马鱼叶酸多聚谷氨酸合成酶基因的生物信息学特征及胚胎发育表达

目的 探索斑马鱼叶酸多聚谷氨酸合成酶（FPGS）的生物信息学特征及在胚胎发育中的表达模式。方法 利用Ensemble数据库及ClustalW程序进行序列比对,分析斑马鱼与哺乳动物FPGS蛋白之间的氨基酸同源性;利用系统发育树分析不同物种间fpgs基因的保守性;运用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析fpgs基因在斑马鱼重要器官及胚胎早期发育中的表达;运用整胚原位杂交技术检测野生型斑马鱼fpgsmRNA的表达。结果 生物信息学分析显示,斑马鱼FPGS蛋白在进化上与哺乳动物同源物高度保守。RT-PCR结果显示,斑马鱼fpgs基因不仅在胚胎的各个发育阶段均有表达,且在成鱼的脑、肝和胃组织中高表达。原位杂交结果显示,fpgs基因在斑马鱼胚胎4细胞期广泛表达,而在尾芽期开始仅在卵黄合体细胞层中表达;在斑马鱼胚胎20体节期,fpgs在产生初级造血祖细胞的中间细胞团、眼睛和后脑区域呈现特异性表达;从斑马鱼胚胎受精后48～96 h,fpgs基因在其肝脏及端脑与后脑的交界处特异性表达。结论 斑马鱼的FPGS蛋白与哺乳动物同源物高度保守,且fpgs基因在斑马鱼发育中的初级造血区、肝脏、后脑区及眼睛特异性...     

斑马鱼丝氨酸羟甲基转移酶1基因的生物信息学和表达分析

目的 探索斑马鱼丝氨酸羟甲基转移酶1(shmt1)基因的生物学结构和基因表达模式.方法 利用生物信息学方法对斑马鱼shmt1的基因结构、物种间同源性、物种间进化、蛋白质二级结构和三级结构等进行分析和预测,并用整胚原位杂交技术探究斑马鱼shmt1在重要器官及胚胎早期发育中的表达.结果 斑马鱼shmt1位于3号染色体(ZDB-GENE-040426-1558)上,全长15142 bp,能编码481个氨基酸,属于天冬氨酸转氨酶(AAT)超家族,其二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,且斑马鱼shmt1蛋白与其他哺乳动物同源物在进化上高度保守.反转录定量PCR(RT-PCR)结果显示,斑马鱼shmt1不仅在胚胎发育的各个时期表达,而且也在成年鱼的肾脏、心脏和性腺中高表达.原位杂交结果显示,shmt1除了在卵黄多核层、鼻翼板中脑区、视顶盖和视泡等处集中表达,还在肝脏特异性表达.结论 shmt1作为一碳代谢叶酸循环中的重要蛋白,在斑马鱼发育早期的胚胎卵黄多核层、鼻翼板中脑区、视顶盖和视泡、肝脏特异性表达.该研究为今后以斑马鱼为模型动物探究shmt1基因在器官发育中的功能研究奠定基础.     

快速冰冻切片在乳腺病变病理诊断中的应用分析

目的 探讨术中快速冰冻切片在乳腺病变病理诊断的临床意义及应用.方法 回顾分析东台市人民医院2006-01-2010-12 285例乳腺病变手术中快速冰冻切片的病理资料.结果 285例乳腺病变冰冻切片,确诊病例为277例(97.19%),延迟诊断病例为7例(2.46%),误诊1例(0.35%该例为假阴性病例),无假阳性病例.285例确诊病例中,良恶性病变之比为1∶2.56.良性病变为79例(27.72%);其中非肿瘤性病变27例(9.47%);恶性肿瘤186例(65.26%).结论 术中快速冰冻切片病理诊断快速实用,且准确率较高,是乳腺恶性肿瘤切除术中一种常规的检查方法.