环状RNACdr1as/miR-7/SP1轴调控乳腺癌细胞侵袭和转移的研究

目的探讨环状RNACdr1as/miR-7/SP1轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞转染miR-7模拟物、sh-Cdr1as、转录因子SP1siRNA前后,正常乳腺MCF-10A细胞及乳腺癌组织中环状RNACdr1as、miR-7、SP1mRNA的表达水平;MDA-MB-231、MCF-7细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）mRNA的表达水平;采用Transwell实验分析MDA-MB-231、MCF-7细胞的侵袭和迁移能力;Westernblot法检测MDA-MB-231、MCF-7细胞中E-cadherin及Vimentin蛋白的表达情况。结果与MCF-10A细胞相比,MDA-MB-231、MCF-7细胞环状RNACdr1as表达上调,miR-7表达下调,SP1mRNA表达上调（均P＜0.05）。与转染前相比,MCF-7、MDA-MB-231细胞转染sh-Cdr1as后,miR-7表达上调（均P＜0.05）,SP1mRNA表达下调（均P＜0.05）;而转染miR-7mimics后,SP1mRNA表达下调（均P＜0.05）。与转染前相比,MDA-MB-231、MCF-7细胞转染sh-Cdr1as后,侵袭细胞数明显减少（均P＜0.05）。与乳腺导管原位癌患者相比,乳腺浸润性导管癌环状RNACdr1as表达上调（P＜0.05）;与无腋窝淋巴结转移患者相比,有腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者环状RNACdr1as表达上调（P＜0.05）;Pearson相关性分析显示环状RNACdr1as与miR-7的表达存在负相关（r=-0.541,P＜0.05）,miR-7与SP1mRNA的表达也存在负相关（r=-0.467,P＜0.05）。MDA-MB-231、MCF-7细胞转染SP1siRNA后,E-cadherinmRNA、蛋白表达均上调（均P＜0.05）,VimentinmRNA、蛋白表达均下调（均P＜0.05）。结论乳腺癌细胞环状RNACdr1as表达上调,通过环状RNACdr1as/miR-7/SP1调控轴促使癌细胞发生上皮间质转化,使乳腺癌细胞发生侵袭和转移。环状RNACdr1as可能成为乳腺癌治疗的新靶点。     

Hsa_circ_0001946/miR-7/KLF4轴调控乳腺癌进展的研究

目的探讨环状RNAhsa_circ_0001946在乳腺癌组织中的表达情况及hsa_circ_0001946/miR-7/Kruppel样因子4（KLF4）轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的机制。方法收集2018年6月至2019年8月在温州医科大学附属第三医院切除的乳腺癌组织标本及其癌旁正常乳腺组织标本91例。采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌及其癌旁正常组织中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4mRNA表达情况及乳腺癌细胞株MCF-7中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）mRNA表达情况;采用细胞侵袭实验分析乳腺癌MCF-7细胞株的侵袭能力;采用Westernblot法检测乳腺癌细胞株MCF-7中E-cadherin及N-cadherin蛋白表达情况。结果与癌旁正常乳腺组织比较,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946和KLF4mRNA表达水平均升高,miR-7表达水平下降（均P＜0.05）。与正常乳腺组织、乳腺导管原位癌组织比较,乳腺浸润性导管癌组织中hsa_circ_0001946mRNA表达水平升高（均P＜0.05）。分析82例乳腺浸润性导管癌患者发现,有淋巴结转移者hsa_circ_0001946mRNA表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.05）。Pearson相关显示,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946mRNA的表达与miR-7的表达呈负相关（r=-0.418,P＜0.05）,miR-7的表达与KLF4mRNAmRNA的表达呈负相关（r=-0.340,P＜0.05）。与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组MCF-7细胞中miR-7表达升高,KLF4mRNA表达下降（均P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染miR-7mimics组MCF-7细胞中KLF4mRNA表达下降（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组侵袭细胞数减少（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染KLF4siRNA组MCF-7细胞中E-cadherinmRNA及蛋白表达水平均升高,N-cadherinmRNA及蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）。结论Hsa_circ_0001946在乳腺癌细胞中表达升高,可通过miR-7/KLF4调控轴使癌细胞发生上皮-间质转化,促进癌细胞的侵袭和转移。     

三阴性乳腺癌的研究进展

三阴性乳腺癌(TNBC)是乳腺癌的一种病理亚型,具有高侵袭性、高复发性。本文就TNBC的病理特征、影响预后的因素（有利因素、不利因素）及治疗方法（内分泌治疗、放疗、化疗、靶向治疗、免疫治疗、生物治疗）等研究进展作一综述。     

腹腔镜下胃癌D2淋巴结清扫的临床疗效及中期随访报告

目的比较腹腔镜胃癌D2根治术与开腹手术的疗效,探讨腹腔镜胃癌D2根治术的可行性。方法选取浙江省瑞安市人民医院2008年10月-2013年8月收治的胃癌患者,根据患者采取的手术方式不同分为两组,其中175例腹腔镜手术患者纳入腹腔镜组,163例开腹手术患者纳入开腹组。比较两组患者的术中及术后情况、淋巴结清扫数目、并发症及肿瘤根治程度等。结果腹腔镜组清扫淋巴结(26.3±13.9)枚,开腹组清扫淋巴结(26.8±10.2)枚,差异无统计学意义(t=-0.40,P=0.684)。腹腔镜组术中出血情况以及术后排气时间均优于开腹组。腹腔镜组患者术后住院时间小于开腹组,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。腹腔镜组的3年生存率为92.00%,与开腹组92.63%相比较,差异无统计学意义(χ2=1.54,P=0.262)。结论腹腔镜胃癌D2根治术具有安全、术后恢复快和创伤小等优点,同时能够达到与开腹组相近的淋巴结清扫效果。     

大肠癌中miR-10b和HOXD10mRNA的表达与临床意义

目的通过检测大肠癌组织及大肠正常黏膜组织中miR-10b和HOXD10mRNA的表达情况,并分析其与患者临床病理特征的关系。方法采用real-timePCR技术检测53例大肠癌组织及其5cm以远正常大肠黏膜组织中miR-10b和HOXD10mRNA的表达水平,采用免疫组化SP法检测53例大肠癌组织及5cm以远正常大肠黏膜组织中HOXD10蛋白的表达。结果在53例大肠癌组织中,34例（65.38%）miR-10b的表达升高,miR-10b相对表达量在大肠癌组织中为1.672（1.167~1.945）,大肠正常黏膜组织中为0.648(0.215~0.946)（P＜0.05）;在53例大肠癌组织中,32例（60.38%）HOXD10mRNA表达下降,HOXD10mRNA相对表达量在大肠癌中为0.341(0.134~0.963),大肠正常黏膜组织中为0.810(0.524~1.027)（P＜0.05）。在53例大肠癌组织中,HOXD10蛋白表达阳性20例（37.7%）,而在53例大肠正常黏膜组织中,HOXD10蛋白表达阳性41例（77.4%）（P＜0.05）。大肠癌患者miR-10b的表达在有无淋巴结转移情况和不同临床分期之间者有统计学差异（均P＜0.05）,而在不同年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度者之间均无统计学差异（均P＞0.05）,HOXD10mRNA的表达在有无淋巴结转移和不同临床分期者之间有统计学差异（均P＜0.05）,而在不同年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度者之间差异均无统计学意义（均P＞0.05）。在大肠癌组织中,miR-10b与HOXD10mRNA的表达呈负相关（P＜0.05）。结论大肠癌患者中miR-10b和HOXD10mRNA的异常表达与大肠癌的侵袭和转移相关,miR-10b可成为大肠癌患者生物治疗的新靶点。     

miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采集行手术治疗的52例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常黏膜组织,实时定量PCR法检测两种组织中miR-30c-1-3p的表达水平并作比较;进一步分析结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平与患者临床特征的关系。结果结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平明显低于癌旁正常黏膜组织（P＜0.05）。结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平与患者有无淋巴结转移及临床分期有关,有淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期的患者结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平均较低（均P＜0.05）;而与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置、分化程度、浸润深度等均无关（均P＞0.05）。结论miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中表达下调,与有无淋巴结转移、临床分期有关,提示miR-30c-1-3p可能与结直肠癌的转移侵袭相关。     

环状RNA CDR1as在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨环状RNA（circRNA）CDR1as在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：收集2018 年6月至2019 年9月在温州医科大学附属第三医院甲乳外科行手术切除的97 例乳腺癌患者,采用实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测乳腺癌组织及其癌旁正常乳腺组织中circRNA CDR1as的表达情况。结果：与正常乳腺组织相比,在乳腺癌组织中circRNA CDR1as表达升高（P ＜0.05）;与乳腺导管原位癌相比,乳腺浸润性导管癌中circRNA CDR1as表达升高（P ＜0.05）;circRNA CDR1as在不同乳腺癌的大小、淋巴结转移情况及临床分期表达差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论：circRNA CDR1as可能与乳腺癌的大小、淋巴结转移情况及临床分期有关。     

下调赖氨酸特异性去甲基酶1表达对于结肠癌LoVo细胞黏附能力的影响北大核心CSCD

目的 探讨赖氨酸特异性去甲基酶1 （Lysine specific demethylase 1,LSD1）的表达水平对结肠癌LoVo细胞黏附能力的影响及其分子机制.方法 选取人结肠癌LoVo细胞株,通过LSD1-shRNA质粒瞬时转染人结肠癌LoVo细胞株,RT-PCR和Western blot检测处理后LoVo细胞中KSD1的表达情况,黏附试验检测转染后LoVo细胞的同质性黏附和异质性黏附能力变化,RT-PCR检测处理后LoVo细胞TGF-β1、HES-1、VEGF-C、CD44v6、MMP7、β-catenin等分子的mRNA水平变化.多个样本比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 LSD1-shRNA质粒瞬时转染人结肠癌LoVo细胞株1h及2h后,细胞的同质性黏附能力均增加（F=151.52和96.47,均P＜0.05）,异质性黏附能力下降（F=87.54和81.50,均P＜0.05）;RT-PCR检测显示VEGF-C、CD44v6、MMP7和β-catenin基因表达水平下降（均P＜0.05）.结论 LSD1下调可以引起LoVo细胞黏附能力改变,过程涉及到β-catenin分子信号通路.