DNA测序建立甘肃当归、大黄种子rRNA基因图谱的研究

目的：对甘肃地道性中药材当归、大黄种子中rRNA基因内转录间隔区进行碱基序列测定，以期建立从分子水平对中草药种子进行鉴定的一种新方法。方法：提取当归、大黄种子中核DNA，利用特异性引物对其rRNA基因内转录间隔区进行套式PCR扩增，并将扩增产物进行碱基序列测定。结果：经琼脂糖凝胶电泳证实：以上述方法可获得当归、大黄种子DNA中rRNA基因内转录间隔区PCR扩增产物；并经测序后得到了当归、大黄种子rRNA基因内转录间隔区的碱基序列，且具有明显的差异和可对比性。结论：不同植物性中药材种子rRNA基因内转录间隔区碱基序列可做为从分子水平进行鉴定的标记。     

经鼻、吻合口负压吸引联合肠内营养支持治疗贲门癌术后胸腔瘘的疗效观察

目的:观察经鼻、吻合口持续负压吸引治疗贲门癌术后胸腔瘘的有效性及安全性。方法:介入下经X线引导,将胃管经鼻通过吻合口的瘘口置入脓腔内,接负压持续吸引,同期置入十二指肠或空肠营养管进行营养支持。结果:运用此方法可以缩短患者愈合时间,且无明显并发症。结论:早期应用经鼻、吻合口负压吸引治疗贲门癌术后胸腔瘘具有较好的疗效及较高的安全性。     

抗体芯片筛选黄芩苷诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用靶点

目的采用凋亡抗体芯片筛选黄芩苷诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用通路和靶点,探讨黄芩苷诱导胃癌细胞凋亡的相关机制。方法采用MTT法检测黄芩苷对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用人凋亡抗体芯片双抗体夹心检测法筛选出黄芩苷(120μmo L·L~(-1))组与对照组的差异表达蛋白;采用Western Blot法对筛选出的差异蛋白Caspase-3、Caspase-8、Fas L、XIAP进行验证,增加对Fas、Caspase-9、TRAIL蛋白的检测。结果与对照组比较,20~320μmo L·L~(-1)的黄芩苷在24~96 h不同时间点可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖(P0.05,P0.01,P0.001),且呈浓度和时间依赖性;80,120,160μmo L·L~(-1)黄芩苷均可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡(P0.01),且呈浓度依赖性;凋亡抗体芯片检测结果表明,120μmo L·L~(-1)黄芩苷组的bad、Caspase-3、Caspase-8、Fas L、HSP60、TRAIL R4、IGF-I、IGF-II、p21、p27、p53和SMAC等蛋白表达明显上调,而XIAP蛋白表达显著下调,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。Western Blot验证实验结果表明,160μmo L·L~(-1)浓度组的Fas L蛋白相对表达量显著上升(P0.001);120,160μmo L·L~(-1)浓度组的Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas、TRAIL蛋白相对表达量显著上升(P0.01,P0.001),XIAP蛋白相对表达量显著下调(P0.001)。结论黄芩苷诱导胃癌细胞凋亡的抗肿瘤作用机制与Fas L、TRAIL介导的死亡受体有关;抗体芯片是有效的靶点筛选手段,可用于药物作用靶点和药理机制研究。     

生长激素受体在结直肠癌发生过程中表达上调

目的:研究生长激素受体(GHR)在结直肠正常黏膜-非肿瘤性息肉-腺瘤-结直肠癌序列中的表达,以探讨其在结直肠癌发生发展中的作用. 方法:应用免疫组化(IHC)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常结直肠黏膜、非肿瘤性息肉、结直肠腺瘤、结直肠癌共124例病人的标本中GHR表达. 结果:免疫组化结果表明,与正常结直肠黏膜相比,结直肠腺瘤和结直肠癌的GHR蛋白表达显著上调(P＜0.001);半定量RT-PCR结果同样表明,与正常结直肠黏膜相比,结直肠腺瘤和结直肠癌的GHR mRNA表达也显著上调(P＜0.001). 结论:GH/GHR在结直肠癌的发生发展过程中可能起着重要的作用,对结直肠癌病人应谨慎使用重组人生长激素.     

以手术为主的综合疗法治疗结直肠癌伴肝转移患者的疗效评价

目的：评价结直肠癌肝转移患者以手术为主综合治疗的临床疗效。方法：总结手术结合术前介入、术中腹腔低渗化疗、术后介入和静脉交替化疗加免疫疗法，治疗结直肠癌肝转移患者49例的临床资料。结果：该组49例结直肠癌患者原发癌均获切除，同时一期切除肝转移癌。全组患者1、3和5年累积无病生存率分别为94％、47％和32％，累积总生存率分别为100％、61％和44％。结论：结直肠癌肝转移患者以手术为主的综合治疗安全有效。     

莪芪抗瘤方剂对白血病HL-60细胞凋亡的作用及机理研究

目的：研究中药复方莪芪抗瘤方剂在体外对白血病HL-60细胞凋亡影响，并探讨凋亡发生的可能机制。方法：通过血清药理学方法，选择10％浓度的含药血清与白血病HL-60细胞共同培育24、48、72、96h后，应用荧光显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测凋亡峰（亚二倍体峰），用Fura-2荧光负载方法测定细胞内Ca^2＋浓度的变化；比色法检测凋亡相关基因Caspase-3活性变化。结果：10％浓度的含药血清处理组细胞体积缩小，细胞核固缩，膜起泡，核断裂及形成凋亡小体等，以72h最为明显；可见DNA含量低于G1期的凋亡细胞群，这群细胞的凋亡百分率随时间的递增而增加。10％浓度的含药血清处理组的细胞内Ca^2＋浓度也明显高于对照组（P〈0．01），Caspase-3基因活性明显高于对照组相（P〈0．01．P〈0．05）。结论：莪芪抗瘤方剂含药血清诱导白血病HL-60细胞发生凋亡，这种变化可能与细胞内Ca^2＋水平上调，Caspase-3活性增强有关。     

梁金菇多糖促人急性早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)细胞凋亡研究

目的 :观察梁金菇多糖对人类早幼粒细胞白血病细胞系 (HL 6 0 )是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究半胱天冬酶 3(Caspase 3)基因在此过程中的作用。方法 :四氮唑蓝比色法 (MTT法 )观察梁金菇多糖对HL 6 0细胞的抑制率 ,应用形态学、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡的发生。应用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测凋亡相关基因Caspase 3mRNA表达的变化。结果 :梁金菇多糖对HL 6 0细胞的生长有明显的抑制作用 ,并诱导肿瘤细胞发生凋亡 ;在HL 6 0细胞凋亡过程中 ,凋亡相关基因Caspase 3转录水平比用药前增强。结论 :梁金菇多糖促HL 6 0细胞凋亡 ,且与Caspase 3基因表达有关     

直肠癌术前放疗前后肿瘤细胞化学发光变化的研究

化学发光(CL)是生物体的一种自然现象[1],肿瘤细胞和其他生物体一样具有发光能力,通过测定发光强弱可反映其活力,目前只有少数相关报道[2].为此,我们对放疗前后直肠癌细胞进行化学发光检测,研究其与直肠癌放疗疗效的相关性,现报告如下.     

人生长激素对人结肠癌细胞LS-174-T增殖周期的影响

研究人生长激素 (h GH)对体外培养的结肠癌细胞株增殖周期和 DNA倍体的影响和意义。取指数生长期的结肠癌细胞株 L S- 174- T(简称 174) ,以顺铂和 (或 )不同浓度的 h GH体外培养 ,2 4h后以流式细胞仪测定细胞增殖周期等指标。结果 :h GH能诱导 174细胞 S期数率显著上升 (P<0 .0 1) ,G2 / M期参数下调 (P<0 .0 1) ,DNA指数未见增高。加用顺铂后细胞大量凋亡 ,细胞存活率显著下降 (P<0 .0 1) ,各组 S期百分数或显著下降 ,或与对照组无差异。结论 :h GH体外作用于 174细胞 ,能促使细胞进入对化疗药敏感的 DNA合成期 ,没有上调 DNA…     

直肠癌术前放射治疗的相关组织病理学观察报告

目的　观察直肠癌术前放射治疗后组织病理学变化。方法　将 80例pTNMⅡ期和Ⅲ期直肠癌患者按入院先后次序 ,分为对照组和放射治疗组 ,每组 40例。使用西门子M 6740直线加速器 ,采用前后对穿射野和等中心剂量 ,总剂量为 40Gy ,每次剂量为 2Gy ,共 2 0次。放疗结束后 1～ 2周手术。治疗前后 ,在直视下分别钳取距癌灶 2cm的正常黏膜和肿瘤组织 ,经常规处理后进行病理组织学观察。结果　放射治疗组 40例患者中 ,直肠癌消退分级 (RCRG ) 1级 14例 ( 3 5 .0 % ) ,2级 18例 ( 4 5 .0 % ) ,3级 8例 ( 2 0 .0 % )。放疗组坏死发生率为 72 .5 % ,对照组为 45 .0 % (P =0 .0 0 4) ;放疗组间质组织纤维化变性率和血管内膜增厚分别为 80 .0 %和 77.5 % ,而对照组分别为 2 0 .0 %和 40 .0 % (P =0 .0 0 0 1和P =0 .0 0 1)。结论　直肠癌术前放射治疗可以使癌组织坏死 ,癌组织和间质产生纤维变性 ,降低了分期 ,有利于肿瘤的切除