构建大鼠减体积肝移植模型的肝脏信号转导差异蛋白表达

背景：蛋白质组学是目前医学界比较热门的科学研究技术,已经在肝移植的相关研究中得到初步应用,但未曾报道有在大鼠减体积肝移植相关研究中的应用。目的：利用蛋白质组学相关技术探讨大鼠减体积肝移植后与肝脏信号转导蛋白相关的差异蛋白。方法：在成功建立大鼠减体积肝移植模型的基础上,分别于移植后1,3,7 d获取移植肝脏组织,然后与预先获取冻存的供体和受体肝脏组织采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术,建立双向凝胶电泳图谱,再利用串联质谱（MS-MS）分析及数据库对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果与结论：实验中以变化倍数大于10倍为标准进行差异蛋白点的选择,总共发现了72个差异点,最终鉴定到了功能比较明确的32个蛋白,其中有4个蛋白参与了信号转导的过程,其分布于肝移植后的第3天和第7天,占6%。结果显示在大鼠减体积肝移植模型的成功和稳定建立的基础上,利用蛋白组学的相关技术,研究了大鼠减体积肝移植后参与肝脏信号转导的差异蛋白,为下一步深入研究调控这些蛋白的 MicroRNA 提供了有力的前期基础研究数据。     

ABO血型不合肝移植四例

我院移植中心2009年9月至2010年4月成功进行了4例ABO血型不合肝移植,现报告如下. 临床资料 一、一般情况 4例均为男性,年龄43～53岁,平均46.5岁,原发病均为乙型病毒性肝炎后肝硬化,其中1例并发原发性肝癌(符合米兰标准).3例肝功能Child分级为C级,1例为Child B级.供者ABO血型为AB型,受者为O型者2例;供者为AB型,受者为A型者1例;供者为A型,受者为O型者1例.4例术前均签署知情同意书.     

手法复位治疗肱骨外科颈骨折的疗效观察

目的：观察手法复位治疗肱骨外科颈骨折的临床效果。方法：回顾性分析我院近年收治的128例肱骨外科颈骨折患者的临床资料。结果：本组128例患者进行手法复位后均进行功能锻炼,固定时间为4～6周,平均5．4周;治愈98例,好转28例,未愈2例,总有效率为98．4％。结论：手法复位治疗肱骨外科颈骨折效果理想。     

脐血造血干细胞对原发性肝细胞癌的抑制作用

背景:原发性肝细胞癌是一种临床常见的恶性肿瘤,虽然近年来各种治疗方式如外科手术、射频消融以及选择性动脉栓塞等治疗方式均取得了进展,但对于某些进展期肝癌患者,这些治疗方法具有一定的局限性.在这样的背景下,干细胞对恶性肿瘤的治疗或抑制作用正逐渐成为人们关注的焦点.目的:对原发性肝细胞癌的发病情况、肿瘤免疫编辑过程、肿瘤微环境以及脐血造血干细胞对原发性肝细胞癌和其他实体肿瘤的抑制作用进行综述.方法:检索万方医药网及外文生物医学期刊数据库2000-01/2010-09有关原发性肝细胞癌发病情况、免疫微环境以及造血干细胞对包括肝细胞癌在内的实体肿瘤抑制作用的文章,中文检索词为"肝癌,造血干细胞,免疫微环境",英文检索词为"hepatocellular carcinoma,hematopoietic stem cell,microenvironment".最终筛选出33篇文献作进一步分析.结果与结论:肿瘤的发生及发展与机体免疫系统的变化密切相关,在已发生肿瘤的机体内,免疫系统处于抑制状态,对于恶性肿瘤细胞无反应或者低反应.脐血造血干细胞具有免疫原性低、分裂能力强、分化谱系广等特点,在接受移植的机体内能够分化为多种谱系的细胞,其中包括多种免疫细胞,从而弥补机体原有免疫系统的缺陷,起到杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤生长的作用.然而其作用机制、适应证及不良反应等仍需进一步深入研究.     

甲状腺外科手术中喉返神经的处理

喉返神经损伤是甲状腺手术常见的严重并发症,损伤发生部位最高处系喉返神经入喉处。损伤的原因多为术中直接切断、结扎、挫夹、牵拉等。甲状腺初次手术喉返神经损伤的发生率为2．8％,再次手术则高达21．7％。因此,甲状腺外科手术中喉返神经的处理至关重要,充分认识喉返神经的解剖走行,术中处理精细、规范,以尽量避免损伤喉返神经。     

两种分离脐血间充质干细胞的方法比较

背景：目前分离脐血间充质干细胞的方法很多,尚没有确定一种为最有效的方法。目的：寻找一种最为可靠的脐血间充质干细胞分离方法。方法：应用Percoll分离液法和羟乙基淀粉沉降法对脐血进行分离得到单核细胞,在含体积分数15%新生牛血清的DMEM/F12培养基中进行培养并传代。观察不同分离方法脐血单核细胞的回收率,每次传代的时间和细胞增值速度,培养过程中间充质干细胞形态的变化情况,并用流式细胞仪检测第3代细胞表面标志物CD90、CD44、CD34的表达。结果与结论：与Percoll分离液法相比羟乙基淀粉沉降法获得的单核细胞多,单核细胞回收率高（P〈0.01）,第1次传代时间短（P〈0.01）。然而两种方法获得的细胞经培养在形态的变化和表面标志物CD90、CD44、CD34的表达上差异并无显著性意义（P〉0.05）。所以羟乙基淀粉沉降法的分离效率较高,培养时间短,但是并不能获得质量较高的脐血间充质干细胞。     

恒河猴肝移植术后急性排斥反应时肝组织中转化生长因子-β1的表达

目的检测转化生长因子(TGF)-β1在恒河猴肝移植术后急性排斥反应时肝组织中的表达水平,以评价其作为肝移植术后急性排斥反应早期诊断指标的价值。方法采用改良血管袖套+胆道支撑管+动脉吻合法建立稳定的恒河猴肝移植模型,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗)。继而分别在肝移植术后6 h、12 h、24 h和72 h四个时间点分别收集血清及肝组织,通过肝功能指标检测及移植肝组织苏木精-伊红染色Banff评分评价其移植排斥反应情况,并应用免疫组织化学、Western blot法分别检测TGF-β1蛋白表达情况。结果 1 2组恒河猴肝移植术后12 h、24 h和72 h均有急性排斥反应发生,尤其肝移植后72 h时实验组肝组织急性排斥反应重于对照组,Banff分级水平高于对照组(P<0.05)。2 2组术后ALT、AST和TBIL水平均随着时间的延长呈上升趋势(P<0.05),在移植术后6 h和12 h时2组ALT、AST和TBIL水平比较差异无统计学意义(P>0.05);在移植术后24 h和72 h时实验组ALT、AST和TBIL水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3免疫组织化学检测TGF-β1蛋白表达结果:实验组肝移植术后12 h后肝组织中TGF-β1免疫组织化学染色阳性面积百分率随着时间延长不断升高,且均明显高于对照组相应时相(P<0.05)。4 Western blot检测TGF-β1蛋白表达的半定量结果:实验组和对照组均在6 h即开始随着时间的延长呈现上调趋势,而实验组上调的幅度较对照组大,在6 h、12 h、24 h和72 h时实验组均分别明显高于对照组相应时相,差异有统计学意义(P值分别是0.003、0.001、0.001、0.001)。结论肝移植术后肝组织中TGF-β1水平升高提示机体细胞免疫功能增强,对肝移植术后急性排斥反应的早期诊断可能有一定意义。     

恒河猴肝移植模型移植后急性排斥反应时肿瘤坏死因子α的变化

背景：肿瘤坏死因子α是一种炎性细胞因子,参与移植免疫反应并增加移植物抗原表达,并在其中发挥着重要作用。目的：分析恒河猴肝移植后肝组织中肿瘤坏死因子α的变化与急性排斥反应的关系。方法：采用改良血管袖套＋胆道支撑管＋动脉吻合法建立稳定的恒河猴肝移植模型,将其随机分为实验组（围手术期不给予免疫抑制治疗）和对照组（围手术期给予免疫抑制治疗）。分别在移植后6,12,24和72h4个时间点分别收集血清及肝脏组织,检测肝功指标变化,通过苏木精-伊红染色Banff评分评定其移植排斥反应情况,并最终应用免疫组织化学技术、蛋白印迹分析分别检测肿瘤坏死因子α的表达水平。结果与结论：实验组和对照组肿瘤坏死因子α的表达在移植后6h即开始增高,至12h时达到高峰,24-72h降低,并且实验组变化最明显。移植后6,12,24和72h4个时间点组实验组肿瘤坏死因子α蛋白表达明显高于对照组（P〈0.05）,此变化早于肝组织病理学及肝功能的改变。提示肝移植后肝组织肿瘤坏死因子α的表达水平变化,对肝移植后急性排斥反应的早期诊断具有重要意义。     

甲状腺乳头状微小癌146例外科治疗

目的：探讨甲状腺乳头状微小癌的临床诊治新特点。方法：回顾性分析我院近年来收治的甲状腺微小癌146例的临床资料。结果：肿瘤直径≤5 mm 38例（26.0%）。行中央区淋巴结切除病例中,肿瘤直径≤5 mm,转移率为15.4%;肿瘤直径〉5 mm,转移率为34.1%。结论：甲状腺乳头状微小癌中央区淋巴结转移的比率较高;肿瘤直径≤5 mm的患者比率有增高的趋势,术中建议行颈中央区淋巴结切除。