艾司氯胺酮通过上调miR-138-5p表达抑制LPS诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的分子机制研究

目的 探讨艾司氯胺酮对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法 星形胶质细胞HA1800分为对照(NC)组,0.5、1.0、2.0μg/mL LPS组,低、中、高剂量组,miR-138-5p组,miR-con组,高剂量+anti-miR-138-5p组、高剂量+anti-miR-con组;流式细胞术检测HA1800细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测微小RNA(miR)-138-5p表达水平。结果 浓度越高的LPS诱导的星形胶质细胞HA1800凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高(P<0.05)。剂量越高的艾司氯胺酮处理后,LPS诱导的HA1800细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3表达水平、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低,miR-138-5p表达水平...     

Sev对低氧缺糖诱导的脑神经元细胞损伤的影响

目的 研究七氟醚(Sev)调控Toll样受体4 (TLR4)/核转录因子κB (NF-κB)信号通路抑制低氧缺糖对脑神经元细胞损伤的保护作用。方法 将大鼠皮质神经元细胞分为对照组、模型组、1.0MAC和2.0 MAC七氟醚组;细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。试剂盒检测丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)水平;蛋白印迹法(Western blot)检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、TLR4、磷酸化核因子κB抑制蛋白α (p-IκBα)和核因子κB抑制蛋白α (IκBα)蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组细胞存活率、SOD、CAT活性降低(^均P<0.05),凋亡率、MDA含量、TNF-α、IL-6、IL-8水平升高(P<0.05),TLR4、p-IκBα蛋白表达升高;与模型组比较,Sev显著升高细胞存活率、SOD、CAT活...     

老年全麻术患者血清HIF-1α，S-100β蛋白，BDNF水平及rSO2的动态检测与围术期神经认知紊乱的相关性分析

目的　探讨老年全身麻醉患者血清低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、S-100β蛋白、脑源性神经营养因子(BDNF)、脑氧饱和度（rSO2）变化与围术期神经认知紊乱（PND）的相关性。方法　选择2019年3月～2020年9月海口市第三人民医院手术室接诊的141例接受全身麻醉手术的老年患者,将术后7天MMSE评分<26分和（或）MoCA评分<26分患者归为PND组（33例）,其余为认知功能正常组（108例）。分别于术前、术后1天、3天、7天检测血清HIF-1α,S-100β蛋白、BDNF水平以及rSO2。分析HIF-1α,S-100β蛋白、BDNF,rSO2与MMSE评分、MoCA评分相关性。结果　PND组年龄大于认知功能正常组（t=3.106,P<0.05）,初中文化程度比例高于认知功能正常组（χ2=10.517,P<0.05）,差异均有统计学意义。PND组和认知功能正常组围术期间MMSE评分、MoCA评分、BDNF水平呈先降低后升高变化趋势（F=8.005~13.054,均P<0.001）,血清HIF-1α,S-100β蛋白水平、rSO2呈先升高后降低趋势（F=7.882~17.154,P<0.001）。PND组术后1天、3天、7天 MMSE评分、MoCA评分、BDNF水平低于认知功能正常组（F=12.54~18.094,均P<0.05）,血清HIF-1α,S-100β蛋白水平、rSO2高于认知功能正常组（F=15.346~25.134,均P<0.05）。Pearson相关分析结果显示认知障碍组患者血清HIF-1α,S-100β蛋白水平、rSO2与MoCA评分、MMSE评分均呈负相关（MoCA:r= -0.506~ -0.563,MMSE:r=-0.532~-0.601,均P<0.001）,BDNF水平与MoCA评分、MMSE评分均呈正相关（r=0.597,0.534,均P<0.001）。联合HIF-1α,S-100β蛋白、BDNF,rSO2诊断老年全身麻醉患者围术期PND的曲线下面积（AUC）为0.901,高于单独诊断的0.709,0.717,0.718和0.705（P<0.05）。结论　老年全身麻醉手术围术期血清HIF-1α,S-100β蛋白水平、rSO2升高,BDNF水平降低与认知功能损伤密切相关,可作为老年全身麻醉术后PND早期识别和病情评估的参考指标。     

罗哌卡因对骨关节炎疼痛大鼠炎症反应及PKA/CREB通路的影响

目的：探讨罗哌卡因对骨关节炎（OA）疼痛大鼠炎症反应及蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白（CREB）通路的影响。方法：大鼠随机分为假手术组、OA组（建模）及罗哌卡因低、中、高剂量组（建模+腹腔注射0.5、1、2mg/kg罗哌卡因）,每组16只,切断前交叉韧带建模2周后进行给药,给药两周。测定模型复制前、模型复制2周、给药2周时大鼠的压痛阈值,酶联免疫（ELISA）法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,实时荧光定量PCR法测定软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α、PKA、CREB mRNA表达水平,Western Blot法测定软骨组织p-PKA/PKA、p-CREB/CREB水平,苏木精-伊红染色观察软骨组织病变。结果：给药2周,与假手术组相比,OA组大鼠压痛阈值显著降低（P<0.05）,血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及软骨组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、PKA、CREB mRNA表达水平、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,软骨组织出现明显的病变现象;与OA组相比,罗哌卡因低、中、高剂...     

普鲁卡因对缺氧诱导的N9细胞、PC12细胞损伤的影响及分子机制

[目的]探讨普鲁卡因对缺氧诱导的N9细胞、PC12细胞损伤的影响及分子机制。[方法] N9细胞、PC12细胞分为对照组、缺氧组、低、中、高剂量普鲁卡因组(缺氧+2、6、18 mg/L普鲁卡因)、anti-miR-con组、anti-miR-369-3p组、miR-con+高剂量普鲁卡因组(转染miR-con+缺氧+18 mg/L普鲁卡因)、miR-369-3p+高剂量普鲁卡因组(转染miR-369-3p+缺氧+18 mg/L普鲁卡因)。流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)水平,RT-qPCR检测miR-369-3p表达水平。[结果]相比于对照组,缺氧组N9细胞、PC12细胞凋亡率升高,MDA、ROS含量升高,SOD活性降低,TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高,miR-369-3p表达水平升高(P<0.05)。相比于缺氧组,低、中、高剂量普鲁卡因组N9细胞和PC12细胞凋亡率降低,MDA、ROS含量...