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正精准医疗依赖于分子生物学检验技术的发展[1,2],医院检验科开展的分子诊断项目和技术平台越来越多,新的分子诊断技术逐步得到应用[3-6],国家也出台了一些新项目检测技术指南[7]。分子生物学检验从以手工操作为主,逐步进入半自动或全自动化操作的阶段,随着检测项目和检测平台多样化,给医院检验科分子生物学检验实习带教工作带来了困难和挑战。2012年9月教育部对高校医学检验专业进行学制改革[8],即将五年制医学检验专业改为四年 相似文献
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目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性与大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)治疗后肝功能异常的相关性。方法:收集2017年10月至2020年3月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院66例ALL患儿HD-MTX治疗的临床资料,检测MTHFR C677T的基因多态性,根据基因型将患儿分为野生型(CC)和突变型(CT+TT),比较2组患儿经HD-MTX治疗后不良反应的发生率、肝功能指标PA、ALT、AST、AST/ALT、TP、ALB、LDH、GGT、TBIL、CHE以及48 h、72 h血药浓度的差异。结果:MTHFR C677T突变型与野生型相比肝功能异常的发生率更高(P<0.05),其中血清AST、ALT、CHE含量异常的患儿比例显著升高(P<0.05),其他肝功能指标差异无统计学意义(P>0.05)。进一步分析不同基因型患儿HD-MTX血药浓度的差异,结果显示与野生型相比,突变型48 h、72 h血药浓度均升高(P<0.05)。结论:MTHFR C677T突变型患儿HD-MTX治疗后,血清AST、ALT、CHE含量异常的患儿比例较高,检测MTHFR C677T基因型对预测HD-MTX治疗后肝功能异常有一定的临床应用价值。 相似文献
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目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)和常规细胞学(CC)在骨髓异常增生综合征(MDS)患者中的应用。方法采用R显带技术对186例MDS患者进行CC分析,同时应用6组组合探针进行FISH检测,并采用统计学分析,比较2种方法的检出率。结果 186例MDS患者染色体核型异常检出率为33. 5%,而FISH异常检测率为41. 9%; CC分析联合FISH可以检测出46. 8%的异常检出率;采用修订版国际预后积分系统(IPSS-R)进行等级评分,FISH阳性率也明显高于CC,其中极高危组患者差异有统计学意义(χ2=4. 710,P 0. 05);在世界卫生组织(WHO)分型评分中,难治性贫血伴原始细胞增多-1(RAEB-1)组的FISH检测异常阳性率高于CC法,差异有统计学意义(χ2=4. 952,P 0. 05)。结论 FISH能有效提高MDS患者染色体的异常检出率,特别是针对核型分析失败及小克隆异常的患者,而CC联合FISH可以为MDS患者的诊断和预后分层提供重要依据。 相似文献
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前列腺按摩后尿液DD3 mRNA的定量检测及临床应用评价 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨前列腺按摩后尿液DD3(differential display code3,DD3)基因mRNA含量在前列腺癌诊断中应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者21例、良性前列腺增生(BPH)40例,在前列腺穿刺活检前收集前列腺按摩后的尿液,离心取细胞沉淀物,用实时荧光定量RT-PCR方法检测DD3 mRNA和PSA mRNA含量。以DD3 mRNA/PSA mRNA比值表示尿液DD3 mRNA含量。用受试者工作曲线(ROC)评价尿DD3 mRNA对PCa的诊断价值。分析尿液DD3 mRNA阳性率与临床分期和病理分级的相关性。对DD3 mRNA PCR产物进行测序分析。结果DD3 mRNA PCR扩增产物经测序分析证实为DD3 mRNA特异度片段。PCa组尿液DD3 mRNA含量明显高于BPH组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。尿液DD3 mRNA诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.705(95%CI:0.578—0.832),以DD3 mRNA/PSA mRNA比值0.116为截断值时,其敏感度和特异度为66.7%和80,0%。尿液DD3 mRNA的阳性率与临床分期和病理分级无关。结论尿DD3 mRNA检测对前列腺癌诊断具有较高特异度和敏感度,作为Pca早期诊断指标具有良好的应用前景。 相似文献
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目的 探讨RON mRNA及其变异体在膀胱肿瘤组织中的表达与临床意义。方法选择63例膀胱移行上皮癌(TCCB)、7例膀胱内翻性乳头状瘤(IPB)、9例膀胱低度恶性潜能尿路上皮瘤(PUNLMP)患者和12例外伤性膀胱破裂且经病理证实无肿瘤细胞的正常膀胱黏膜组织患者。其中,病理Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级患者分别为30、15和18例,临床Tis+ T1和T2 +T3 +T4期患者分别为44例和15例;用实时荧光定量RT-PCR检测其RON mRNA相对表达量,以GAPDH mRNA为内标物,用RONmRNA/GAPDH mRNA比值表示RON mRNA相对表达量;用RT-PCR检测RON mRNA选择性剪切形成的变异体;用测序检测PCR产物中可能存在的变异体,并分析变异体在不同组织间及TCCB中不同病理分级及临床分期间阳性表达率的差异。结果RON mRNA在TCCB、IPB、PUNLMP及正常膀胱黏膜组织中均见阳性表达,其RON mRNA/GAPDH mRNA比值分别为4.9×10-3(1.8×10-3 ~1.0× 10-2)、3.8×10-3(2.4×10-3~1.7×10-2)、4.9×10-3(1.7×10-3~1.1 ×10-2)、1.0×10-3(4.5×10-4 ~2.8×10-3),且不同组织间的表达差异均有统计学意义(x2K-W= 17.278,P<0.05);RON mRNA/GAPDH mRNA比值在TCCB病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级分别为3.7×10-3(1.3×10-3 ~7.5×10-3)、4.9×10-3(1.9X10-3~1.1 ×10-2)、8.9×10-3(2.7×10-3~8.0×10-2),且差异有统计学意义(x2K-W=7.341,P<0.05);RON mRNA/GAPDH mRNA比值在TCCB临床Tis+ T1、T2 +T3 +T4期分别为3.5×10-3(1.2×10-3 ~7.7×10-3)、9.7× 10-3(2.9×10-3~5.3 ×10-2),差异也有统计学意义(Z= -2.306,P<0.05)。但正常膀胱黏膜组未发现RON mRNA变异体,而在膀胱肿瘤组织中外显子11剪切缺失(E11△)的阳性表达率为70%( 55/79)。在TCCB、IPB、PUNLMP中E11△阳性表达率分别为71% (45/63)、57% (4/7)、67% (6/9),而不同病理组织中的E11△阳性表达率差异无统计学意义(x2=0.620,P>0.05);在不同TCCB病理分级和临床分期中其阳性率差异亦无统计学意义(Z值分别为0.221、0.538,P均>0.05)。发现1种正常黏膜组织中没有的新变异体,即RON基因外显子的3 476~3 539 bp剪切缺失形成的变异体(E3 476 ~3 539△)。膀胱肿瘤组织中E3 476~3 539△的阳性表达率为56% (44/79),在TCCB、IPB、PUNLMP中E 3 476 ~3 539△的阳性表达率分别为57%( 36/63)、43% (3/7)、56% (5/9),但各病理组织间的阳性率差异无统计学意义(x2=0.517,P>0.05);在TCCB不同病理分级和临床分期中其阳性率分别为40% (12/30)、67% (10/15)、78% (14/18)、48%(21/44)、80% (12/15),差异有统计学意义(Z值分别为7.285、5.041,P均<0.05)。结论 RONmRNA的表达与TCCB病理分级及临床分期相关,RON可能在TCCB发生发展的过程中发挥重要作用;在正常膀胱黏膜中未见RON mRNA剪切形成的变异体,而在膀胱肿瘤组织中都有不同程度的表达;E 3 476~3 539△的表达与TCCB病理分级及临床分期相关,RON mRNA变异体可能参与了膀胱肿瘤的发生。 相似文献
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目的了解本地区成人呼吸道嗜血杆菌的感染情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗提供参考.方法用嗜血杆菌专用巧克力培养基(HAE)进行分离培养,用NHI鉴定卡和ATB-NH药敏检测条鉴定其生物种型及其对多种抗生素的耐药性,用Nitrocefin纸片法测定被试菌的β-内酰胺酶.结果 1190例呼吸道感染病人痰液和咽拭标本中检出147株嗜血杆菌,总检出率12.35%,其中流感嗜血杆菌32株(21.77%),副流感嗜血杆菌113株(76.87%),杜克雷嗜血杆菌2株(1.36%).检测株对头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、利福平的耐药率较低,分别为6.12%、10.88%、19.05%.产β-内酰胺酶的共64株,产酶率为43.54%.结论本地区成人呼吸道嗜血杆菌感染中以副流感嗜血杆菌为主,产酶率较高,对嗜血杆菌引起的呼吸道感染可选用头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、利福平等药物进行治疗. 相似文献
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目的 建立实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测AMACR mRNA的方法学并检测其在前列腺癌(PCa)组织中的表达.方法 在AMACR基因的2、3外显子之间设计一对引物及MGB探针,将PCR扩增产物与pMD18-T载体连接,构建重组质粒作为定量检测的标准品,建立实时荧光定量RT-PCR方法,然后对32例PCa、60例良性前列腺增生(BPH)及34例其它肿瘤组织进行AMACR mRNA的定量检测.结果 重组质粒经PCR扩增及序列测定,表明克隆成功,该方法灵敏度高,线性范围为5~5×108copies/reaction.AMACR mRNA在PCa组织中表达量显著高于BPH组织(P<0.01)及其他类型肿瘤组(P<0.01).ROC曲线分析结果显示,曲线下面积(AUC-ROC)为0.890,AMACR mRNA诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为81.3%和86.7%.PCa组织中AMACR mRNA表达量及检测阳性率与不同临床分期和病理分级之间的差异尚不具有统计学意义(P值均>0.05).结论 实时荧光定量RT-PCR检测AMACR mRNA的方法具有敏感、特异、准确、重复性好等特点.AMACR mRNA在前列腺组织中的表达对PCa的诊断具有一定的临床应用价值. 相似文献
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目的探讨TaqMan MGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的可靠性。方法采用荧光定量PCR法检测HBV DNA含量,TaqMan MGB双探针方法和测序方法检测其YMDD变异,以测序方法为参考方法,评价TaqMan MGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的可靠性。结果246例HBV DNA阳性患者血清标本中,TaqMan MGB双探针方法阳性检出率为100%,100例正常对照全部为阴性;YMDD无突变106例,YMDD有突变(YIDD变异 YVDD变异)140例,与核酸测序方法比较,符合率为100%;该方法经过敏感度实验,最低检出下限为1×103拷贝/ml。结论TaqMan MGB双探针方法能便捷、灵敏、特异地检测YMDD基序变异情况,适用于临床检测慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗的YMDD基序变异。 相似文献
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不同HPV亚型的多重感染和年龄因素与宫颈病变的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨不同亚型人乳头状瘤病毒(human papillomavious,HPV)多重感染及年龄等因素与宫颈不同程度病变的关系。方法:采用核酸分子快速导流杂交基因微阵列分型检测技术对418例女性HPV感染者进行HPV分型检测,同时检测宫颈病变程度。结果:仅感染高危型HPV病毒(包括混合感染多种高危HPV病毒)的女性患者其宫颈癌、尖锐湿疣构成比与仅感染低危型HPV病毒(包括混合感染多种低危HPV病毒)组的相应构成比存在较大差异(χ2=41.81,P<0.001);感染多种高危(低危)HPV与感染单一高危(低危)HPV相比,不同宫颈疾病的构成比并无差别;在不同的年龄段,高危型、低危型以及高低危HPV混合感染类型的构成比有显著性差异(χ2=17.25,P<0.05)。多元logitic回归分析年龄因素及不同类型高危型HPV感染与宫颈癌的关系显示年龄超过40岁(OR=1.63,P<0.05),16型HPV感染(OR=2.78,P<0.01),58型HPV感染(OR=1.69,P<0.05)宫颈癌患病风险大大增加。结论:感染高危型HPV引起宫颈癌的患病风险增加,而低危型HPV则更易引起尖锐湿疣的发生;多重感染并不会促进宫颈疾病的进展;年龄、16型和58型HPV的感染是影响宫颈癌发生的重要因素。 相似文献