不同地区A组乙型溶血性链球菌T分型与耐药关系

目的　探讨我国 4个省市自然人群中学龄儿童A组乙型溶血性链球菌 (groupAofStreptococcus,GAS)T分型与耐药关系。方法　T凝集法将GAS进行T分型 ,再用Vitek微生物鉴定系统进行药敏试验。测试江陵 5 7株、丰满 95株、重庆 71株、广州 397株GAS。结果　不同T型的GAS对红霉素、氯林可霉素、四环素的耐药性有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,对红霉素耐药率高的菌型依序为T4、T1、T11、T6、T12 ;对氯林可霉素耐药率高的菌型为T1、T12、T6 ;对四环素耐药率高的菌型为T11、T3/B、T12、T4、T1。除广州农村外 ,各地的优势菌型为T1型 ,但不同地区T1型GAS的耐药率有差异 (P <0 .0 1)。结论　 4个省市自然人群儿童中携带的GAS对红霉素、氯林可霉素、四环素耐药率与T型有关 ,不同T型的GAS耐药率不同 ;同一T型GAS的耐药性有地区差异     

利用SELDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱技术建立肺腺癌诊断模型

目的:寻找肺腺癌患者血浆(清)蛋白特异性生物标志物,用最佳的标志蛋白组合建立肺腺癌诊断模型,并探讨其用于肺腺癌筛查的可行性.方法:应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及CM10芯片,检测45例肺腺癌患者和40例正常人血清蛋白质指纹图谱,用Biomark Wizrd和Biomark Patterns Software软件对结果进行分析,建立肺腺癌诊断模型:双盲法分析另外19例肺腺癌和20例正常人血清的SELDI质谱数据,验证该模型诊断肺腺癌的准确度.结果:肺腺癌患者和正常人血清蛋白质指纹图谱间有31个差异蛋白(P<0.05),其中以分子量为11.66 kD的蛋白在两组血清中的差异最为显著(P<10-7),该蛋白对诊断肺腺癌有很强的敏感性和特异性;软件自动筛选出分子量为11.66 kD的标志蛋白为主根结点,联合3882.9、4673.2、3158.2和2047.2等4个标志蛋白建立了最佳的肺腺癌诊断模型,对肺腺癌诊断(盲法)的敏感性为84.2%(16/19),特异性为90.0%(18/20).结论:SELDI-TOF-MS技术建立的肺腺癌血清检测法,快速、简单、特异和敏感,为肺腺癌诊断和筛查提供了一个可行的途径和方法.     

A组链球菌M蛋白二价DNA疫苗表达载体的构建与鉴定

目的构建含A组链球菌M蛋白基因(emm基因)1型和3型特异性抗原决定簇基因的重组质粒。方法用PCR技术从40381137(T1)型和31281187(T3)型A组链球菌中分别扩增emm基因,插入T 载体后测序、blast后分别确定为emm1和emm3基因型,再从emm1和emm3基因分别扩增105 bp目的基因,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术将两目的片段连接起来。插入真核表达载体 pSecTaqB中,阳性质粒克隆经酶切和测序鉴定。结果从40381137(T1)和31281187(T3)A组链球菌株的基因组成功克隆emm基因,经测序及blast后分别确认为emm1型和emm3型;用pst I和BamH I酶切重组质粒pSemml-3、测序均显示插入正确。结论成功构建A组莲球菌的emm1型和emm3型二价真核表达载体,为下一步研究表达功能及表达蛋白的生物活性打下基础。     

宫颈鳞癌患者手术前后的血清蛋白质指纹图谱差异研究

目的 研究宫颈鳞癌患者手术前后的三个不同时期以及与健康对照组之间的血清差异蛋白质。方法 采用SELDI-TOF-MS技术结合弱阳离子结合芯片（CM10）,对宫颈鳞癌术前（A1组）、术后7～10 d(A2组)、术后30～40 d(A3组)及对照组的血清蛋白质指纹图谱进行动态分析,比较不同时期蛋白质图谱变化,筛选出有差异的血清蛋白质。结果 共得出两组血清差异蛋白质,第一组为宫颈鳞癌与对照组比较后的差异蛋白质,共16个,其中的12个差异蛋白质在A1组与A2组比较中差异有统计学意义;这16个差异蛋白质在术后7～10 d其含量均呈上升趋势,大部分在术后30～40 d恢复至对照组水平。第二组为12个差异蛋白质,它们在A1组与A3组比较中有显著差异,而且在A1、A2及A3组中含量不断上升,在术后30～40 d时恢复至对照组水平。结论 第一组差异蛋白质在宫颈鳞癌和对照组之间差异有统计学意义,可作为区分宫颈鳞癌与正常人生物学指标,同时两组差异蛋白质技术在宫颈鳞癌患者手术前后三个不同时期均有明显差异,预测它们能作为宫颈鳞癌手术疗效评价和术后病情监测的指标。     

抗DNA酶B在风湿热流行病学研究中的应用

目的 探索预测某一地区风湿热（ＲＦ）流行状况简便的方法。方法 对广东２１６名在乡学龄儿童血清抗ＤＮＡ酶Ｂ和抗链球菌深血素“Ｏ”（ＡＳＯ）水平进行为期１周的动态观察；另外在５个不同地区中，各抽取１００名学龄儿童在同一季节进行抗ＤＮＡ酶Ｂ水平横贯面的调查，结果与同期风湿热／风湿性心脏病（ＲＦ／ＲＨＤ）发患病率对照研究。结果 抗ＤＮＡ酶Ｂ水平呈秋、冬、春季高，夏季低的季节性变化，与ＲＦ发病率的季节性分布规律一致（ｒ＝０．９１３，Ｐ〈０．０５）。抗ＤＮＡ酶Ｂ水平高的地区，其ＲＦ／ＲＨＤ发患病率高，反之则低（ｒ＝０．９５２，Ｐ〈０．０５）。结论 测定某一地区学龄儿童血清抗ＤＮＡ酶Ｂ水平，可作为该地区ＲＦ／ＲＨＤ流行水平的初步估测和进一步研究的参考。     

非小细胞肺癌化疗疗效相关血清小分子蛋白的初步研究△

目的:寻找非小细胞肺癌化疗耐药与敏感患者血清中的差异小分子蛋白,通过分离纯化进行质谱鉴定。方法:用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,分别检测14例化疗敏感和26例化疗耐药的非小细胞肺癌血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质谱。Clinprot磁珠分离纯化后,进行基质辅助激光吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)鉴定。结果:SELDI-TOF-MS检测到100个有效蛋白峰,其中P<0.05的差异蛋白峰23个,联合质荷比(m/z)为3193.14Da和3263.61Da的差异蛋白建立预测非小细胞肺癌化疗耐药模型,敏感性90.23%,特异性98.56%。进行MALDI-TOF/TOF-MS鉴定,质荷比(m/z)为3263.61Da的蛋白为DNA结合相关蛋白。结论:SELDI-TOF-MS技术可以筛选非小细胞肺癌化疗疗效相关蛋白。     

随机扩增DNA多态性技术在A组链球菌分型上的应用

目的 了解A组乙型溶血性链球菌的基因分型状况。方法 采用随机扩增多态性DNA技术(Random amplified polymorphic DNA，RAPD)，对1988～1994年度．从广东城市和农村，1993～1994年度，从湖北、吉林9～11岁学龄儿童分离的179株GAS进行RAPD分析。结果 ①同一T型的菌株有特征性条带，但有些亚型带型间差异较大：②不同T型间可有相同的带型；③分型率比T分型高，达到96．6％；④有主导RAPD型菌株流行的情况存在。结论 RAPD方法对GAS分型及流行病学中有一定的应用价值，可以区别同一血清型不同地区来源的GAS。     

不同临床期别宫颈鳞癌患者血清差异蛋白质的表达

目的寻找不同临床期别宫颈鳞癌患者之间的血清差异蛋白质。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪（SELDI-TOF-MS）和弱阳离子结合芯片（CM10）,检测宫颈鳞癌患者可手术治疗组（Ⅰa期、Ⅰb期、Ⅱa期）与不能手术治疗组（Ⅱb期、Ⅲa期、Ⅲb期、Ⅳ期）的血清蛋白质、以及血清鳞状细胞癌抗原（SCCA）≥4.5ng/ml组与SCCA〈1.5ng/ml组之间有分类意义的差异蛋白质。结果相对分子质量在1002～18369范围内,共有43种蛋白质质谱峰值有显著性差异（P〈0.05）,其中质荷比（M/Z）为11523.83、11679.13、5841.076、7971.04、16109.71、15932.17的蛋白质,在宫颈癌可手术治疗组的含量显著低于不能手术治疗组（P〈0.01）。SCCA≥4.5ng/ml组与SCCA〈1.5ng/ml组之间获得相同的差异蛋白质。以单个差异蛋白质11679.13（M/Z）作为分类变量建立宫颈癌手术组与不能手术组的诊断树模型,分类正确率为93.18%（41/44）。结论宫颈癌早中期可手术治疗组与中晚期不能手术治疗组血清中存在差异蛋白质,SCCA组≥4.5ng/ml与SCCA〈1.5ng/ml组之间存在相同的差异蛋白质;以单个差异蛋白质作为分类变量建立的诊断树模型,给临床分期提供重要的参考。     

一种基于完整结肠壁和纹理特征的小/平坦型息肉检测方法

目的 :提出一种新的基于虚拟结肠镜的计算机辅助检测(computer-aided detection,CAD)方法,以提高对小/平坦型息肉的检测能力。方法:选择25例患者共89个息肉的CT数据作为训练集,6例患者共17个息肉的CT数据作为测试集。首先通过分割提取完整的结肠内、外壁;然后用直径9个体素的球体滑动窗在结肠内壁上逐点选取感兴趣体积(volume of interest,VOI)并计算267个纹理特征,用AdaBoost分类器进行分类预测得到初始疑似息肉(initial polyp candidates,IPCs);最后利用基于随机森林的特征选择策略进行特征寻优,并对疑似区域的每个体素进行分类得到最终的疑似息肉。结果:该方法对测试集检测敏感度为100%,假阳性率为38个/数据集。结论:该方法能够有效地检测小/平坦型息肉,提高传统CAD的性能。     

前列腺肥大的非药物自疗法——谨以此文献给全国老年前列腺肥大患者

我今年六十九岁,年届古稀。曾被前列腺肥大症(又名前列腺增生)困扰十余年,当时真怕活人被尿憋死。近二年,我采用按摩和体疗,竟把这颇为难治的病治好了。欣喜之余,特写此文,献给全国老年前列腺肥大患者。据专家介绍,我国前列腺肥大发病率,50岁以上男性达50％,80岁高达90％,这是一组很大的人群。 约在五十七、八岁时,我就有前列腺肥大的症状。表现在尿流减细,射程缩短,尿线开岔。到了九二年(六十四岁),病情开始严重,进而排尿,十分困难,站着等待尿出来要几分钟(俗称待尿),临到尿出来时,足一滴一滴地,一小段一