反义RNA对地中海贫血红系细胞β-珠蛋白mRNA异常剪接的纠正作用

目的 研究反义ＲＮＡ对β－地中海贫血红系细胞ＩＶＳ２－６５４Ｃ→Ｔ（β＾６５４）突变ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用。方法 构建特异性针对β＾６５４ｍＲＮＡ 前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体,和不针对上述位点的反义对照载体,转染培养的β＾６５４红系细胞后,抽提总ＲＮＡ;以ＲＴ－ＰＣＲ法作ｍＲＮＡ定量,检测正常和异常剪接的β－珠蛋白ｍＲＮＡ产物的比例［β／（β＋β＾＊）］;以珠蛋白肽链体外生物合成分析     

临床基因检测报告规范与基因检测行业共识探讨CSCD

二代测序技术（next generation sequencing,NGS）在临床的应用为广泛开展遗传病的基因检测、病因诊断、治疗及预防奠定了基础,但同时也伴随着一系列的问题,其中很重要的一个环节就是基因检测报告缺乏统一或基本的标准。首届“临床基因检测标准与规范专题研讨会”于2017年10月28日在深圳召开,来自全国138家机构的250多位遗传学专家、临床专家及第三方检测机构的代表共同探讨了遗传病基因检测报告的标准和规范问题。本文根据此次研讨会专家的意见和建议,就遗传病基因检测报告的原则、规范以及基因检测行业的发展进行了讨论,并发布了临床基因检测报告规范共识,以促进检测报告的规范化和标准化,推进我国基因检测行业的健康有序地发展。     

10例血友病A患者的FⅧ因子基因内含子22倒位分析

１０例血友病Ａ患者的ＦⅧ因子基因内含子２２倒位分析吴竞生，陈云弟，王寅文，陈美珏，王祖贻，潘理明，汪健，丁浩血友病Ａ（ＨＡ）是凝血因于Ⅷ（ＦⅧ）基因缺陷所致的Ｘ－连锁隐性出血性遗传病。ＦⅧ因子基因突变类型众多，１９９３年发现约一半重型ＨＡ是由ＦⅧ基因...     

α-地中海贫血和β-地中海贫血基因突变异尾双链荧光探针杂交法的建立及应用评价

目的 建立可同时检测3种α-地中海贫血（简称地贫）非缺失突变（αWS、αQS、αCS）和8种β-地贫基因点突变[CD26(G>A)、CD41/42(-TCTT)、nt29(A>G)、IVS-Ⅱ-654(C>T)、nt28(A>G)、CD71/72(+A)、CD17(A>T)、CD27/28(+C)]的异尾双链荧光探针杂交法,并评价其临床应用价值。方法设计目标区域的聚合酶链反应（PCR）引物和异尾双链荧光探针,对PCR反应体系和反应条件进行优化。采用地贫核酸检测国家参考品评估异尾双链荧光探针杂交法的检测性能（准确性、特异性、灵敏度）。采用异尾双链荧光探针杂交法和PCR-反向点杂交法同时检测200份已知地贫基因型的临床样本,评估2种方法检测结果的符合率。结果 对于检测范围内的11种点突变样本,异尾双链荧光探针杂交法检测结果与国家参考品说明书标示的突变类型的符合率为100%;检测范围外的其他点突变或缺失突变类型均未检出。采用异尾双链荧光探针杂交法检测1.0、2.5、5.0、10.0 ng/μL的α-地贫Hb CS点突变参考品和β-地贫CD41/42、IVS-Ⅱ-...     

构建反义RNA表达载体对β-地中海贫血进行基因治疗研究

β地中海贫血(简称β地贫)是常见的、严重危害人民身体健康的遗传性血液病,在我国南方(两广地区)的发病率约为1％。该病目前尚无有效的根治方法,患者只有依赖定期输血才能维持其生命,但输血过度将引起铁质大量沉积,最终导致心力衰竭而过早地夭亡。因此,探索β地贫治疗途径是疾病防治工作的一项重要任务。     

因子VIII基因倒位的检测与血友病甲的分子诊断

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，分析了３６个无亲缘关系的血友病甲家系共９８名成员的凝血因子ＶＩＩＩ基因倒位。１２个（３３．３％）家系显示内含子２２倒位，其中１０个为远端倒位，２个为近端倒位。此１２例皆为重型患，占全部２３例重型患的５２．２％，证实ＦＶＩＩＩ基因基因倒位是中国人重型血友病甲的重要的分子缺陷。ＦＶＩＩＩ基因倒位分析既可以揭示血友病甲患的分子缺陷，又可以直接用于血友病甲的分子诊断     

遗传学

遗传学曾溢滔陈云弟作者单位：２０００４０上海市儿童医院上海医学遗传研究所随着对单基因遗传病研究手段的逐步完善和分子机制研究的深入，多基因遗传病已经越来越引起我国遗传学界的注意，这是近来医学遗传学研究的一个显著特点。一、单基因遗传病本年度的单基因遗传病...     

FⅧ基因倒位与血友病甲

最近发现F Ⅷ基因的内含子22倒位是约半数重型血友病甲(HA)患者的共同分子缺陷。由F Ⅷ基因内含子22内的F ⅧA基因拷贝与F Ⅷ基因上游约500kb处的两个FⅧA基因拷贝之一发生同源重组在Xq28所引入的大片段。DNA倒位把F Ⅷ基因分成两半,从而导致重型HA。倒位可以通过Southern印迹杂交技术检测。这一发现明确了一类HA的分子机制,并且为这类HA的携带者检测和产前诊断提供了一个直接方法,具有重要的应用价值。     

Reversal of aberrant splicing of β-thalassemia allele by antisense RNA in vitro and in vivo

ＴｈｅＣ→ＴｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｔｔｈｅｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆＩＶＳ２ｎｔ．６５４（ＩＶＳ２６５４Ｃ→Ｔ,β６５４）,ａｍｕｔａｔｉｏｎｃａｕｓｉｎｇｄｅｆｅｃｔｉｎＲＮＡｓｐｌｉｃｉｎｇ,ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎβｔｈａ...