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1.
2.
3.
艾滋病的致病因子为人免疫缺陷病毒。该病毒的蛋白酶在病毒复制和成熟中具有决定性的意义。由于目前国内外尚未获得艾滋病病毒蛋白酶高效表达的重组子及简便的活性检测系统,限制了它的研究与应用。本文将用PCR技术修饰的HIVPr基因克隆入原核高效表达载体pTTQ18的EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点之间,并用豆芽核酸酶将EcoRⅠ的粘端削平,构建了读框正确的表达载体,IPTG诱导表明,该重组子在大肠杆菌中获得了高表达,激光扫描结果表明:重组的HIVPr占细菌总蛋白8.9%以上。 相似文献
4.
目的 探讨如何以人类α型叶酸受体(FOLR-1)基因为基础构建核酸疫苗。方法 应用RT-PCR技术,从人类卵巢癌细胞系-SKOV3细胞中扩增FOLR-1基因,插入克隆载体pGEM-T Easy,经DNA自动测序仪测序证实后,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1( ),并使用限制性内切酶酶切鉴定。结果 从卵巢癌细胞系SKOV3中成功扩增出FOLR-1基因,并克隆人pcDNA3.1( )载体。结论 成功构建FOLR-1的重组克隆及真核表达载体,为今后利用FOLR-1进行卵巢上皮性肿瘤的免疫及导向治疗研究打下了基础。 相似文献
5.
目的检测慢性胃炎儿童胃液中幽门螺杆菌DNA,探讨其在临床诊断中的实用价值。方法应用PCR检测胃液中幽门螺旋菌DNA,应用Warthin-Starry银染色检测胃粘膜组织中的幽门螺旋菌。结果胃炎组与非胃炎组比较,敏感性为75.0%,特异性为96.2%,两组有显著性差异(P<0.01)。PCR与Warthin-Starry银染色比较,PCR优于Warthin—Starry银染色法。结论PCR检测患儿胃液中的幽门螺旋菌DNA,具有敏感、快速、特异、高效等优点,是基因水平上检测幽门螺旋菌一项新技术,用于慢性胃炎的早期诊断,具有较好的实用价值,值得推广应用。 相似文献
6.
新型TaqMan-MGB探针法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨新型MGB探针在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速检测中的临床应用价值。方法以TaqMan-MGB探针技术为基础,用已克隆的mecA基因作参比品,实时检测临床标本和阴性参考品。结果所建立方法的最低检测限度为1个基因拷贝/反应,在100~109范围内,CT值(C代表Cycle,T代表阈值)同DNA量的对数呈线性关系;用该方法检测20例MRSA培养阳性的临床标本,结果均为阳性;用该方法检测20个非MRSA细菌株,结果均为阴性。结论所建立的方法适用于临床MRSA快速诊断。 相似文献
7.
幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与胃癌关系的病例对照研究 总被引:4,自引:3,他引:4
8.
胃粘膜组织中Hp的感染与癌基因ras及抑癌基因p53、p16的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
胃粘膜组织中Hp的感染与癌基因ras及抑癌基因p53、p16的关系张沥1阎小君2白西平1韩锋产2张玲霞1苏成芝2Subjectheadingsgastricmucosa/microbiology;helicobacterinfections/ed... 相似文献
9.
作者采用分子分杂交技术分析了18例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因mdm2、cmyc和抗癌基因p53的变化,使用PCR-SSCP技术分析了p53基因第7外显子点突变,结果显示,骨组织恶性肿瘤中mdm2、cmyc癌基因有扩增与过表达,抗癌基因p53有突变、重排、缺失。在10例骨肉瘤标本中发现mdm2扩增仅存在于转移的病例中。这些结果表明:癌基因mdm2、cmyc与抗癌基因p53参与骨组织恶性肿瘤的发生和发展,其中mdm2扩增与骨肉瘤转移密切相关。 相似文献
10.
斑点金免疫渗滤试验快速检测抗Hp细胞毒素相关蛋白A抗体 总被引:7,自引:0,他引:7
目的建立快速检测抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA).方法将CagA抗原点于硝酸纤维素膜上,然后依次加入患者血清及用抗人IgG抗体标记的胶体金颗粒,如血清中存在抗CagA的IgG,在膜上便出现一个红色斑点.结果DIGFA仅需几分种便可完成.当用DIGFA及EIA对108份血清进行检测时,两种方法之特异性及敏感性相当.当以聚合酶链反应(PCR)检测胃粘膜组织中HpCagA的结果作为参照时,DIGFA的特异性及敏感性分别为98%(57/58)和94%(45/48).结论DIGFA特异性强,敏感度高,操作快速且简便,在CagA阳性Hp感染的检测方面有广泛应用前景 相似文献