使用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统检测肺癌的临床意义

目的 研究多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统用于肺癌的临床诊断价值。方法 用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统测定分析131例肺癌患者，20例肺良性疾病患者和177例正常对照人群血清的12种常见的肿瘤标志物：CA19-9、NSE、CEA、CA242、Fe、Beta-HCG、AFP、f-PSA、PSA、CA125、HGH、CA153。结果 131例肺癌患者有93例血清肿瘤标志物为阳性，阳性率为71．0％；20例肺良性疾病患者有2例血清肿瘤标志物阳性，阳性率为10．0％；177例正常对照血清中没发现阳性。结论 多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统的应用对肺癌诊断有较高的临床参考价值。     

冠心病患者血清同型半胱氨酸水平与冠脉病变程度的相关性

目的:探讨冠心病患者血清同型半胱氨酸水平与冠脉病变程度的相关性。方法:选择冠心病患者71例为研究对象,其中急性冠脉综合征47例,稳定型心绞痛24例。分析冠心病患者血清同型半胱氨酸水平与冠脉病变程度的相关性。结果:轻度狭窄血清同型半胱氨酸水平为(15.2±3.1)μmol/L,中度狭窄为(18.9±5.3)μmol/L,重度狭窄患为(21.7±5.1)μmol/L,不同狭窄程度患者血清同型半胱氨酸水平存在显著差异(P<0.01)。狭窄程度与血清同型半胱氨酸水平呈显著正相关的关系(r=0.596,P<0.01)。1支病变患者血清同型半胱氨酸水平为(16.0±3.8)μmol/L,2支病变患者为(19.4±4.5)μmol/L,3支病变患者为(21.1±4.7)μmol/L,不同冠脉病变支数患者血清同型半胱氨酸水平存在显著差异(P<0.05);冠脉病变支数与血清同型半胱氨酸水平呈显著正相关(r=0.582,P<0.01)。结论:血清中同型半胱氨酸水平与冠脉病变的程度具有显著正相关的关系。     

湖南中部地区高血压人群CYP2D6和β1肾上腺素能受体基因多态性调查

【目的】探讨湖南中部娄底和湘潭地区高血压人群CYP2D6和β1肾上腺素能受体（β1-AR）基因多态性分布。【方法】湖南中部地区高血压患者403名,采用聚合酶链反应（PCR）和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性方法（PCR-RFLP）进行CYP2D6和β1-AR基因分型。【结果】403例高血压患者中CYP2D6检测出CYP2D6的＊1、＊2、＊5、＊10四种等位基因,频率由高到低依次为＊10（67.5%）、＊1（17.5%）、＊2（9.2%）、＊5（5.8%）,突变基因型频率最高为CYP2D6＊10＊10（47.4%）。β1-AR 49位Ser和Gly等位基因频率分别为83.9%和16.1%;Ser/Ser、Ser/Gly和Gly/Gly基因型分布频率分别为68.7%、30.3%和1.0%。β1-AR 389位Arg和Gly等位基因频率分别为76.1%和23.9%,Arg/Arg、Gly/Arg和Gly/Gly基因型分布频率为55.3%、41.4%和3.2%。各基因型及等位基因频率在不同性别中分布无差异（均P〉0.05）。【结论】湖南中部地区高血压人群CYP2D6和β1-AR基因多态性分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡,其中CYP2D6＊10和β1-AR 389位基因突变率最高,可能成为影响β受体阻滞剂降压疗效的显著因素之一。     

CVB3对不同营养状态的HeLa细胞mTOR信号通路调控的影响

目的:探讨不同营养状况对柯萨奇病毒B3 (CVB3) 感染HeLa 细胞后mTOR 信号通路调控的影响。方法:HeLa 细胞的培养方法:非饥饿法用常规含10% 胎牛血清细胞培养液换液培养24 h 后次日再用CVB3 干预; 饥饿法用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h 后次日再干预。将HeLa 细胞分为非饥饿法病毒组与对照组、饥饿法病毒组与对照组4 组, 采用RT-PCR 检测不同时间点HeLa 细胞CVB3 外壳蛋白、mTOR 和p70S6K mRNA 表达。结果:非饥饿法:病毒组mTOR, p70S6K mRNA 表达与对照组比较仅在12, 24 h, 差异有统计学意义(P<0.05), 而饥饿法病毒组各时间点均低于对照组( 均P<0.05);饥饿法病毒组和对照组HeLa 细胞mTOR 表达均高于非饥饿法( 均P<0.05), 而p70S6K mRNA 差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:CVB3 使HeLa 细胞mTOR-p70S6K 信号通路表达下调, 饥饿法mTOR 表达高于非饥饿法。     

不同营养状态下柯萨奇病毒B3感染HeLa细胞后对mTOR及p70S6K mRNA的影响

目的 探讨不同营养状况下柯萨奇病毒B3(CVB3)感染HeLa细胞对mTOR信号通路的影响.方法 采用非饥饿法和饥饿法2种方法培养HeLa细胞.(1)非饥饿法:HeLa细胞融合成40％ ～ 50％的单层细胞时,用含10 g/L胎牛血清的细胞培养液换液培养24 h后,病毒组用100倍半数感染量(100 TCID50)的病毒干预,而对照组用病毒维持液(含胎牛血清2 g/L细胞培养液)培养;(2)“饥饿法”:待HeLa细胞融合成40％ ～ 50％的单层细胞时,用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h后,病毒组用100 TCID50的病毒干预,而对照组用病毒维持液(含胎牛血清2 g/L的细胞培养液)培养.采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,用实时荧光定量PCR检测3、6、9、12、24 h不同时间点饥饿法及非饥饿法不同营养状态下HeLa细胞mTOR、p70S6KmRNA表达.结果 非饥饿法:病毒组仅在12 h及24 h mTOR、p70S6K mRNA表达显著低于对照组(P均＜0.05);饥饿法:病毒组各时间点均显著低于对照组(P均＜0.05);饥饿法病毒组和对照组Hela细胞mTOR、p70S6K mRNA表达均高于非饥饿法,mTOR mRNA差异均有统计学意义(P均＜0.05),而p70S6K mRNA差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 CVB3使HeLa细胞mTOR-P70S6K信号通路表达下调.     

肥胖、糖脂代谢障碍对美托洛尔降压疗效的影响

目的 探讨肥胖、糖脂代谢障碍对选择性β1肾上腺素能受体阻滞剂美托洛尔降压疗效的影响. 方法筛选血压分级为1级或2级的原发性高血压患者300例,给予美托洛尔治疗8周,根据血压的降低判断其疗效,并分析肥胖或中心性肥胖、糖尿病和高脂血症对美托洛尔疗效的影响.结果 肥胖或中心性肥胖、糖脂代谢障碍可显著影响美托洛尔的降压疗效,正常体质指数组的降压有效率(68.4%)均高于超重组(47.4%)和肥胖组(39.4%),非中心性肥胖组的有效率(62.8%)也高于中心性肥胖组(46.6%),高脂血症和糖尿病对疗效的影响有性别差异.Logsitic 回归分析发现,体质指数是对美托洛尔疗效影响最大的因素. 结论肥胖、糖脂代谢障碍可影响美托洛尔的降压疗效,后者对男性影响更大.     

重组腺相关病毒载体介导成纤维细胞生长因子2基因诱导缺血心肌血管新生

探讨重组 2型腺相关病毒载体介导 2型成纤维细胞生长因子基因诱导家兔缺血心肌血管生成的作用。实验对象为 2 0只新西兰兔 ,手术建立心肌缺血模型后随机分为成纤维细胞生长因子基因治疗组和对照组 ,分别向缺血区域心肌注射成纤维细胞生长因子腺相关病毒或磷酸盐缓冲液。 4周后取心肌及肝、肾等器官组织标本 ,采用逆转录聚合酶链反应检测目的基因mRNA的表达 ;制作组织学切片以观察组织病理改变 ,于高倍镜下计数缺血区域微血管数目。结果发现转染的 2型成纤维细胞生长因子基因在缺血心肌中有表达 ,成纤维细胞生长因子基因治疗组缺血区域单个高倍视野内的微血管数为 12 .0± 1.4条 ,对照组为 4 .5± 1.5条 ,二者差异具有显著性 (P <0 .0 1)。 2型成纤维细胞生长因子基因治疗组的肝脏、肾脏、脾脏、角膜和睾丸标本中均未发现 2型成纤维细胞生长因子基因的表达 ,病理检查也未发现组织结构异常。说明腺相关病毒载体介导的 2型成纤维细胞生长因子基因可以有效地转染入家兔缺血心肌 ,并具有明显的诱导缺血心肌血管生成的作用 ,且基因表达仅限于心肌。     

外源性Rb基因对U937细胞泡沫化过程中CD36表达的影响

为研究抑癌基因Rb基因在U937细胞泡沫化过程中的表达，应用重组腺病毒载体导入外源性Rb基因。采用逆转录聚合酶链反应和流式细胞术检测氧化型低密度脂蛋白致U937细胞泡沫化过程中清道夫受体CD36和Rb基因的表达和外源性Rb基因导入U937细胞后CD36和Rb基因的表达。结果发现，氧化型低密度脂蛋白致U937细胞泡沫化过程中，Rb mRNA和蛋白的表达随作用时间延长呈下调趋势，CD36 mRNA和蛋白的表达则呈上调趋势；随着外源性Rb导入U937细胞并表达，CD36表达呈下调趋势。结果提示，外源性Rb基因的导入可以下调清道夫受体CD36的表达。     

高敏C反应蛋白和脂蛋白(a)联合检测在冠心病诊断中的应用

目的 探讨高敏C反应蛋白（hs-CRP）和脂蛋白（a）联合检测对冠心病的诊断价值。方法 对166例疑诊冠心病的患者进行冠状动脉造影检查，根据造影结果分为冠心病组（CHD组）和非冠心病组（非CHD组），并分别进行hs-CRP和Lp（a）的测定、分析。结果 CHD组患者血浆hs-CRP和Lp（a）浓度均高于非CHD组（P〈0．01）。两项指标联合检测对CHD患者诊断的特异度（89．2％）高于分别应用hs-CRP（86．5％）或Lp（a）（70.3％）单一指标。结论 hs-CRP和Lp（a）两项指标联合检测更有助于冠心病的预测和论断．     

cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端延伸快速分离全长cDNA序列

建立一种cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端快速扩增分离人类新基因全长cDNA序列的新技术。以文库载体序列与待扩增目的基因片段为模板各设计引物进行热启动聚合酶链反应扩增，从人胎肝cDNA文库中获得氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞泡沫化过程中差异表达序列标签片段（FRG4）的全长cDNA序列，聚合酶链反应产物克隆到pGEM-T载体中，并测序鉴定，从而成功获得FRG4的全长cDNA序列，该技术是一种快速有效的分离人类新基因全长cDNA序列的方法。