临床化学检验结果自动审核系统的建立与评价

目的 随着医学科学技术的发展,实验室检测结果对大部分临床决策的影响越来越显著。因此,在保证检验结果准确性、可靠性的前提下,缩短周转时间(TAT)是当前临床实验室的工作重点之一。本研究的目的是建立一套适合本实验室的临床化学检验结果自动审核系统并进行应用效果评价。 方法 研究以雅培C16000生化分析仪以及中间体软件IM、实验室信息系统(LIS)为基础,参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)AUTO-10A文件、美国病理学会(CAP)清单和ISO15189文件,从自动审核范围确认规则、危急值审核规则、历史比对值审核规则、逻辑条件审核规则和质量控制审核规则五个层面建立相应的自动审核规则,构建自动审核流程图,并比较了采用自动审核系统前后样本周转时间(TAT)的变化情况,分析报警状况分布以及人工审核与自动审核的一致性。 结果 共产生了435条自动审核条目,并根据这些审核条目构建了自动审核流程图。采用自动审核系统后,325 000例样本的通过率为52.3%,门诊和住院标本的TAT在自动审核前后的差异具有统计学意义(均P<0.05),门诊和住院标本的平均TAT分别缩短了43 min和60 min、自动审核和人工审核的符合率为99.98%。 结论 本研究建立了符合本实验室的临床化学检验结果自动审核系统,该系统可以显著缩短TAT,具有很高的安全性,值得在实验室推广和应用。      

绝经后2型糖尿病患者骨质疏松与血微量元素的关系研究

目的：探讨绝经后2型糖尿病患者骨质疏松与血微量元素间的关系.方法：纳入绝经后女性168例,年龄48～82岁,中位数63.5岁;其中2型糖尿病患者122例,健康女性46例.所有受检者均测定血清钙、镁、锌、铜、铁含量和糖化血红蛋白含量,并测定身高和体质量.绝经后2型糖尿病患者同时测定腰椎和左侧股骨骨密度.将绝经后2型糖尿病患者纳入Ⅰ组,绝经后健康女性纳入Ⅱ组,比较2组受检者微量元素的血清含量.根据骨密度检测结果,将122例绝经后2型糖尿病患者中骨密度正常者纳入A组、骨量减少者纳入B组、骨质疏松者纳入C组,比较3组患者微量元素的血清含量;然后根据是否骨质疏松将122例绝经后2型糖尿病患者分为2组,采用Logistic回归分析法分析绝经后2型糖尿病患者骨质疏松与血微量元素的关系.结果：①绝经后2型糖尿病与血微量元素的关系.Ⅰ组受检者血液中锌、镁含量低于Ⅱ组[（91.42±10.88）μmol·L-1,（98.47±11.06）μmol·L-1,t=15.890,P=0.000;（1.46±0.14）mmol·L-1,（1.69±0.14）mmol·L-1,t=88.490,P=0.000];铜、钙、铁含量与Ⅱ组比较,差异无统计学意义[（12.95±2.43）μmol·L-1,（12.54±2.11）μmol·L-1,t=1.053,P=0.306;（1.52±0.13）mmol·L-1,（1.54±0.15）mmol·L-1,t=0.890,P=0.347;（8.07±1.16）mmol·L-1,（8.17±1.40）mmol·L-1,t=0.968,P=0.323].②绝经后2型糖尿病患者骨质疏松与血微量元素的关系.A组42例,B组40例,C组40例.3组绝经后2型糖尿病患者血液中钙、镁、铁含量比较,组间差异无统计学意义[（1.53±0.10）mmol·L-1,（1.51±0.17）mmol·L-1,（1.50±0.12）mmol·L-1,F=0.362,P=0.697;（1.47±0.13）mmol·L-1,（1.45±0.15）mmol·L-1,（1.44±0.14）mmol·L-1,F=0.325,P=0.723;（8.39±1.11）mmol·L-1,（7.94±1.28）mmol·L-1,（7.90±1.04）mmol·L-1,F=2.324,P=0.102].铜、锌含量比较,组间差异有统计学意义[（13.99±2.33）μmol·L-1,（12.83±1.89）μmol·L-1,（12.09±2.64）μmol·L-1,F=7.027,P=0.001;（96.80±11.09）μmol·L-1,（91.51±9.64）μmol·L-1,（86.21±9.39）μmol·L-1,F=11.388,P=0.000].A组患者血液中铜含量高于B组和C组（P=0.027,P=0.000）,B、C组比较,差异无统计学意义（P=0.149）;A组患者血液中锌含量高于B组和C组（P=0.020,P=0.000）,B组高于C组（P=0.018）.对血液中锌、铜、钙、镁、铁含量行二元Logistic回归分析显示,血液中铜、锌含量为绝经后2型糖尿病患者骨质疏松的保护因素（OR=0.731,P=0.006;OR=0.843,P=0.046）.结论：绝经后2型糖尿病患者骨质疏松与血液中锌、铜缺乏有关.     

瑞安地区多重耐药结核分枝杆菌IS6110指纹图谱研究

目的了解温州瑞安市多重耐药结核分枝杆菌耐药IS6110指纹图谱特征。方法收集2013年1月-2017年3月本院结核患者的痰标本,进行结核培养,菌株鉴定,药物敏感实验,对利福平和异烟肼同时耐药的菌株进行RFLP分析。结果 516份培养阳性标本中468株(468/516,90.7%)为结核分枝杆菌,48株(48/516,9.3%)为非结核分枝杆菌。468株结核分枝杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇的耐药率分别为12.8%、8.3%、7.7%、3.2%。根据耐药谱分析393株(393/468,84.0%)结核分枝杆菌对4种药物全部敏感,对利福平和异烟肼同时耐药的菌株有36株(36/468,7.7%)。36株多重耐药菌株RFLP分析主要分为2组。结论瑞安地区多重耐药结核分枝杆菌为散发存在,外来民工为高危人群,需要更好地对外来民工进行管理。     

不同储存时间及减白方式对机采血小板中生物效应元件的影响

目的:观察不同储存时间及减白方式对机采血小板中生物效应元件的影响。方法:收集20例储存1 d、3 d、5 d后去白机采血小板去白前后血浆及去白后储存1 d、3 d、5 d的血小板血浆,采用ELISA法检测其中生物效应元件(BRM)浓度。结果:随储存时间的增加,机采血小板中的BRM分子浓度均有不同程度增加;采用储存后减白,血小板中各BRM浓度均随时间延长而增加,滤器可滤除部分IL-8、RANTES、sCD40L,而对IL-6、TGF-β1的滤除效果不明显;采用储存前减白,IL-6浓度未发生明显变化,IL-8、TGF-β1、RANTES、sCD40L浓度随着储存时间的延长而增加。结论:不同储存时间及减白方式对机采血小板中生物效应元件浓度有着明显影响。     

抗sHLA-Ⅰ免疫磁珠的制备与鉴定

目的制备抗sHLA—Ⅰ免疫磁珠去除红细胞悬液和机采血小板中的sHLA—Ⅰ分子。方法将单克隆抗体W6／32以共价偶联的方式包被制备免疫磁珠,以FITC标记的羊抗鼠二抗标记磁珠,用流式细胞仪鉴定包被效果。取10例红细胞悬液和机采血小板上清和制备好的免疫磁珠孵育后移去磁珠,用ELISA检测吸附前后sHLA—Ⅰ浓度变化评价吸附效果。结果制备的抗sHLA—Ⅰ免疫磁珠包被效率约为75％。对红细胞悬液和机采血小板中sHLA—Ⅰ的吸附效果可达到84％和83％。结论采用单克隆抗体W6／32制备的免疫磁珠能有效去除红细胞悬液和机采血小板中的sHLA—Ⅰ分子,在改善临床输血安全方面有广阔的应用前景。     

急性脑梗死血小板相关参数的改变

目的 研究急性脑梗死患者治疗前后血小板相关参数的变化.方法 以本院住院的67例急性脑梗死患者为研究对象,利用流式细胞仪、Coulter STKS血球仪同时进行血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板膜糖蛋白(CD62P、CD63)、血小板比容(PCT)检测,观察治疗前后血小板相关参数的变化.结果 脑梗死患者治疗前的PLT、MPV、PDW、CD62P、CD63、PCT分别是(155.73±54.73)× 109/L,(9.56±0.27)fl,(16.24±0.35)%,(6.24±3.79)%,(6.23±3.54)%,(0.15±0.07)%;治疗后分别是(175.45±62.49)×109/L,(9.16±0.64)fl,(17.03±0.67)%,(0.98±0.57)%,(2.25±1.50)%,(0.16±0.02)%.MPV、PDW、CD62P、C1363、PCT治疗前后差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血小板相关参数的检测结果治疗前后差异有统计学意义,提示与脑梗死的发病具有一定的相关性.     

免疫磁珠吸附红细胞悬液中sHLA-Ⅰ和sFasL分子后对其他成份的影响

同种异体输血造成受血者免疫功能抑制,大量研究表明,可溶性HLA-1(sHLA-Ⅰ)类分子和可溶性Fas配体(sFasL)分子是引起输血后免疫抑制的主要原因之一.本文拟通过制备免疫磁珠吸附去除血液中的sHLA-Ⅰ和sFasL分子以减轻输血后免疫抑制的发生,同时监测红细胞悬液中其它成分的变化.     

四种方法检测婴幼儿腹泻A组轮状病毒的评价

目的:对A组轮状病毒(RV)所致婴幼儿腹泻的四种不同的检测方法进行评价。方法:同时采用胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)、逆转录PCR(RT-PCR)对200份腹泻患儿的标本进行RV检测并进行比较。结果:四种方法的阳性检出率分别为:49%,50%,37%和42.5%。以PAGE为检测的最终标准,RT-PCR的敏感性为100%,特异性和准确性均在90%以上;胶体金和ELISA法的敏感性、准确性分别在95%和85%以上,特异性均为78.57%。结论:胶体金和ELISA法检测RV能够满足临床上对RV快速筛检的要求;RT-PCR法的敏感性和特异性均最高,在无菌体液和环境样本的检测上具有不可比拟的优势;PAGE法特异性高但操作繁琐,较适合RV的流行病学分析。     

小鼠PMX-IRES-Wnt5a逆转录病毒载体的构建及在3T3细胞中的表达

目的构建小鼠Wnt-5a逆转录病毒载体,观察Wnt-5a在3T3细胞的表达情况。方法采用同源重组技术将小鼠Wnt-5a插入逆转录病毒载体PMX-IRES-GFP,构建PMX-IRES-Wnt5a重组质粒,利用脂质体转染3T3细胞,RT-PCR检测Wnt-5a mRNA表达情况,Western-Bloting检测Wnt-5a蛋白表达情况。结果经限制性内切酶证实成功构建了携带Wnt-5a基因的逆转录病毒载体PMX-IRES-Wnt5a,RT-PCR检测结果显示Wnt-5a在转染的3T3细胞的表达明显增高。结论成功构建Wnt-5a逆转录病毒载体,并能在3T3细胞成功表达Wnt-5a。