型特异性、构象依赖性HPV16 L1单克隆抗体的制备与鉴定

目的:研制具有型特异性和构象依赖性的人乳头瘤病毒16主衣壳L1蛋白(HPV16 L1)单克隆抗体(mAb).方法:利用昆虫-杆状病毒系统表达有生物活性的HPV16 L1蛋白.非变性条件下纯化HPV16 L1蛋白,免疫6周龄雌性BALB/c小鼠.末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆.非变性Western blot鉴定mAb的型特异性和构象依赖性,细胞免疫组化确定抗体的型特异性.间接ELISA法测定杂交瘤分泌上清及腹水中抗体效价.mAb亚类试剂盒鉴定mAb亚类.结果:获得1株稳定分泌具有型特异性和构象依赖性的HPV16 L1抗体的杂交瘤细胞株,命名为2E3.2E3杂交瘤细胞株细胞培养上清中抗体效价为1:800;小鼠腹水中抗体效价为1:12 800.亚类鉴定结果为IgG1κ.Western blot及细胞免疫组化分析结果显示,2E3 mAb具有型特异性和构象依赖性,只与非变性的HPV16 L1蛋白发生反应,不与HPV18L1、HPV58L1、HPV11L1产生交叉反应.结论:成功制备了型特异性HPV16 L1 mAb,为进一步研究HPV16 L1的抗原表位奠定了基础.     

医生工作压力源、应对方式与焦虑的关系--对西安三家医院调查研究

目的：本研研究探讨临床医生工作压力、积极应对方式和焦虑的关系,探讨管理对策,为促进医务人员身心健康制定相应防治对策,提供依据。方法：采用随机抽样的方法抽取临床医生352名,运用工作压力源表、积极应对方式量表以及焦虑量表对临床医生进行调查,使用SPSS统计软件对调查研究结果进行归纳,统计分析。结果：临床医生工作压力、积极应对方式以及焦虑存在着密切的关系,回归分析表明积极应对方式在临床医生工作压力和焦虑的关系中存在着完全中介作用。结论：临床医生的工作压力对焦虑的影响完全是通过积极应对方式对其焦虑产生间接作用,强调了积极应对方式在减少医生焦虑的重要性。     

GST-HPV18 E7融合蛋白纯化及相互作用蛋白的检测

目的筛选人类乳头瘤病毒(HPV)18E7相互作用蛋白质,为进一步研究HPV18E7的功能及致癌机理提供线索。方法通过基因工程技术体外构建表达载体,诱导可溶性GST-HPV18E7融合蛋白的高效表达,glutathione Sepharose4B亲和层析纯化,利用GST-pulldown方法初步筛选与HPV18E7结合的蛋白质,并经双向电泳分离,质谱分析,用Mascot软件在蛋白质数据库中进行检索并鉴定。结果纯化的GST-HPV18E7融合蛋白与CHO细胞相互作用后,捕获到与HPV18E7作用的蛋白质,经双向电泳分离得到分辨率较好的图谱,并对其中的26个蛋白质点进行分析,初步鉴定出19个涉及参与细胞的增殖、分化、细胞周期调控、免疫调节及物质代谢等方面的蛋白质。结论所鉴定出的与HPV18E7相互作用的蛋白质,有望成为今后研究HPV致癌机理及抗病毒治疗的候选靶蛋白。     

首发抑郁症患者自我旋转任务下诱发电位P500研究

目的 探讨抑郁症的自我旋转能力及其脑电生理机制,进一步了解抑郁症空间认知能力的损害.方法 对23例首发抑郁症患者和22名健康对照者进行自我旋转任务下的事件相关电位测定,检测被试者的神经心理学表现和P500的潜伏期、波幅.结果 与对照组相比,患者组左手和右手的错误率均升高[(28±5)％vs.(24±4)％,P＜ 0.05; (26±4％) vs.(24±3％),P＜0.05],而且左手和右手的反应时也均较对照组延长[(1193.79±53.32)ms vs.(742.62±15.21)ms,P＜ 0.05;(1105.57±51.61)ms vs.(732.10±16.53)ms,P＜ 0.05];患者组左手错误率升高值、反应时延长值均大于右手(P＜0.05).患者组左手、右手的P500波幅均降低[(5.22±2.41)μV vs.(8.28±3.11)μV,P＜0.05; (6.79±3.24)μV vs.(8.29±3.41)μV,P＜ 0.05],左右手潜伏期均较对照组延迟[(551.37±45.27)ms vs.(508.22±28.22)ms,P＜0.05; (542.74±46.73) ms vs.(507.52±31.48)ms,P＜0.05];患者组的左手波幅降低值、潜伏期延迟值均大于右手(P＜0.05).结论 首发抑郁症患者自我旋转能力受损提示其信息加工的速度与深度均受损,左手受损程度大于右手,提示左右手加工的生物学机制可能不同.     

腹腔镜中转开腹胆囊切除术后手术部位感染风险预测模型构建及评价

目的 构建腹腔镜中转开腹胆囊切除术后手术部位感染风险预测模型,为筛选手术部位感染高危人群提供技术支持。方法 选取2015年1月-2021年8月南阳市第二人民医院微创外科收治的腹腔镜中转开腹胆囊切除术患者216例,根据是否发生手术部位感染(SSI)分为SSI组54例和非SSI组162例。收集患者临床资料,筛选出SSI的危险因素并构建SSI早期风险预测模型。绘制风险预测模型的受试者工作曲线(ROC),计算ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度,并通过临床病例验证,评价风险预测模型的预测效果。结果 SSI组和非SSI组患者在C-反应蛋白(CRP)、术前行经内镜逆行性胰胆管造影术(ERCP)或经皮经肝胆管引流术(PTBD)方面差异具有统计学意义(P<0.05)。术前行ERCP、术前行PTBD是腹腔镜中转开腹胆囊切除术后患者发生SSI的影响因素(P<0.05)。本研究基于多因素Logistic回归模型进行联合预测,发现CRP、术前行ERCP、术前行PTBD联合可提高早期预测SSI准确性(AUC=0.812)(P<0.05)。30例患者初步验证结果显示该风险预测模型灵敏度74...     

维持治疗联合扶正消瘤汤治疗乳腺癌的效果评价及对血清ki67、乳酸脱氢酶水平的影响

目的:评价维持治疗联合自拟扶正消瘤汤对乳腺癌的治疗效果及对血清ki67、乳酸脱氢酶水平的影响.方法:选择符合纳入标准的75例乳腺癌患者,回顾性分析其临床病例资料,将其分为对照组(36例)与观察组(39例).其中对照组患者接受常规维持治疗,观察组患者在维持治疗的同时口服自拟扶正消瘤汤.分析并比较两组患者的治疗效果、治疗前...     

腹腔镜灌洗引流术治疗早期重型胰腺炎的效果观察

探讨腹腔镜灌洗引流术治疗早期重症急性胰腺炎(SAP)的效果。选取我院2014年1月—2018年4月收治的106例早期SAP患者为研究对象,所选病例APACHEⅡ评分≥8分。行腹腔镜灌洗引流53例(观察组)、综合保守治疗53例(对照组)。比较两组器官恢复时间、并发症发生率、死亡率。观察组较对照组器官恢复时间、并发症发生率和病死率明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。对早期SAP患者行腹腔灌洗引流术,操作技术相对简单,创伤小,能有效降低死亡率、并发症发生率,缩短住院时间。     

医生工作压力源、应对方式与焦虑的关系——对西安三家医院调查研究

目的:本研研究探讨临床医生工作压力、积极应对方式和焦虑的关系,探讨管理对策,为促进医务人员身心健康制定相应防治对策,提供依据。方法:采用随机抽样的方法抽取临床医生352名,运用工作压力源表、积极应对方式量表以及焦虑量表对临床医生进行调查,使用SPSS统计软件对调查研究结果进行归纳,统计分析。结果:临床医生工作压力、积极应对方式以及焦虑存在着密切的关系,回归分析表明积极应对方式在临床医生工作压力和焦虑的关系中存在着完全中介作用。结论:临床医生的工作压力对焦虑的影响完全是通过积极应对方式对其焦虑产生间接作用,强调了积极应对方式在减少医生焦虑的重要性。     

肾移植术后非HLA抗体特征与移植肾病理状态的相关性分析

目的探讨肾移植术后受者非人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)抗体特征及其与移植肾病理状态的关系。方法回顾性分析2016—2022年444例肾脏移植术后受者非HLA抗体检测资料,根据移植肾病理诊断结果分为排斥反应组(47例)、非排斥反应组(61例)、肾功能稳定组(336例)。应用Graph Pad Prism 9.0统计软件,分析肾脏移植术后非HLA抗体的特征,非HLA抗体与HLA抗体的相关性,非HLA抗体与移植肾病理状态的关系。结果444例受者中,非HLA抗体阳性为69.8%(310例),与HLA抗体呈正相关关系(r=0.606,P<0.001),术后HLA抗体阳性受者非HLA抗体中位MFI值及和阈值的中位倍数高于HLA抗体阴性患者。排斥反应组,非排斥反应组及肾功能稳定组之间常见非HLA抗体存在差异。非HLA抗体与慢性肾小球病变(r=0.186,P=0.033),间质纤维化(r=0.265,P=0.002)呈正相关关系。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析发现,非HLA抗体预测移植肾动脉炎(AUC=0.771)和慢性肾小球病变(AUC=0.741)诊断价值较高,但是预测排斥反应的能力不强(AUC=0.605)。结论肾移植术后非HLA抗体阳性率较高。排斥反应、非排斥反应及移植肾功能稳定受者常见非HLA抗体不同。非HLA抗体与移植肾慢性病变关系密切,并且对移植肾动脉炎和移植肾慢性病变的预测价值高于对排斥反应的预测价值。     

转录因子STAT1两个亚型STAT1α和STAT1β高表达载体的构建及鉴定

目的：利用高表达载体pLJM1‐EGFP构建并鉴定转录因子STAT1基因的2个亚型STAT1α和STAT1β的过表达重组质粒（简称为pLJM1‐STAT1α和pLJM1‐STAT1β）。方法以大鼠肝脏cDNA 为模板,PCR获取目的片段（即STAT1α和STAT1β）;用AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切pLJM1‐EGFP表达载体和PCR扩增的STAT1α和STAT1β基因片段后,用T4 DNA连接酶连接酶切纯化后的载体及目的基因片段;将连接产物转化DH5α大肠杆菌感受态细胞、挑选阳性克隆,并通过PCR、双酶切和DNA测序鉴定构建的重组质粒。结果 PCR和双酶切证实pLJM1‐STAT1α和pLJM1‐STAT1β重组载体中分别成功插入了STAT1α和STAT1β基因片段。DNA测序结果表明插入的STAT1α和STAT1β基因片段的序列完全正确。结论成功构建了pLJM1‐STAT1α和pLJM1‐STAT1β高表达重组载体。