去细胞带瓣牛颈静脉管道支架的制备及形态结构观察

目的研究去细胞带瓣牛颈静脉组织工程支架的制备,并观察其形态结构。方法取新鲜牛颈静脉48条,随机分为对照组、实验组,每组24条。对照组为新鲜牛颈静脉;实验组为去细胞牛颈静脉,用40 g/L脱氧胆酸钠+50 m l/L Triton-X-100为主要成分的试剂进行处理,去除内皮细胞及成纤维细胞。HE染色、苦味酸-天狼猩红染色、弹力纤维染色、电子扫描显微镜检查、基因组DNA检测,观察其形态结构,评价去细胞效果。结果实验组瓣膜及血管壁中内皮细胞、成纤维细胞去除完全,无细胞核碎片;瓣膜及血管壁胶原纤维和弹力纤维呈波浪状排列、整齐,结构完整;瓣膜、血管壁基因组DNA含量,分别较对照组下降97.58%、97.25%。结论脱氧胆酸钠+Triton-X-100是一种有效的去除牛颈静脉细胞,制备组织工程带瓣管道支架的方法。     

小型猪体外循环动物模型建立及麻醉管理

目的:探讨小型猪体外循环(CPB)实验模型的建立和麻醉管理。方法: 小型猪12头,全麻诱导插管后,应用全血冷灌方法建立中低温阻闭升主动脉的体外循环模型,并于围CPB期进行动、静脉血氧饱和度(SaO2、SvO2)、血细胞比容(Hct)及乳酸水平(Lac)测定,同时监测围CPB期血流动力学变化。结果: 转流过程中SaO2、SvO2均在正常范围,Lac水平随CPB时间延长,显著升高,Hct在CPB后呈中度稀释,平均血压在CPB后自主循环恢复后经过较短时间恢复到正常范围内。结论: 全血冷灌法建立的小型猪CPB模型,可做为CPB条件下开展研究的动物模型。     

学生标准化病人在胸心外科临床教学中的应用

针对传统临床实践教学中存在的典型教学病例少、床边教学病人不配合、教学实践性差等问题,在胸心外科临床教学中,试行了学生标准化病人教学模式。将我院2012级临床医学专业五年制本科见习医学员分为实验组和对照组,采用成绩考核和学生及标准化病人调查问卷的形式对教学效果进行评价。结果显示,实验组学员临床知识掌握程度,临床思维能力训练方面明显优于对照组;同时也提高了学生标准化病人的学习热情临床知识技能掌握程度。因此,学生标准化病人教学模式是一项非常有潜力的临床实践教学方法,值得进一步完善和推广。     

犬温血持续灌注不停跳供心长时间保存效果观察

目的：观察犬温血持续灌注不停跳供心长时间保存的效果。方法成年犬7只,其中5只作为实验犬（供心1～5）,2只作为对照犬（供心6、7）。供心1～5采用温血持续灌注不停跳保存,供心6、7采用冷停跳灌注保存;计算供心保护6 h时的质量增长率,化学发光法检测供心血肌钙蛋白I（TnI）,检查供心左心室收缩舒张功能。结果供心1跳动2h后出现室颤终止实验,供心2～5跳动直至8h至实验结束。保护6h时,供心2～7质量增长率分别为10．00％、17．59％、7．94％、14．08％、22．00％、21．10％;供心6、7血TnI自2 h后较供心2～5显著升高（P均＜0．05）,供心2～5之间比较,差异没有统计学意义（P均＞0．05）;供心2～5左心室收缩及舒张功能随时间延长而下降,供心间比较,差异没有统计学意义（P均＞0．05）。结论犬温血持续灌注不停跳供心可较长时间保存。     

褪黑素通过减轻内质网应激抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制

目的 研究褪黑素（melatonin,Mel）对大鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤的预防作用与心肌内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ER stress）水平变化情况。方法 90只体质量180~220 g雄性SD大鼠,随机分为3个组:假手术（Sham）组、溶剂对照（MI/R+V）组、Mel预防（MI/R+Mel）组。结扎大鼠左冠状动脉前降支30min后松开结扎线恢复血流灌注,建立MI/R损伤模型,再灌注4 h后Western blot法检测ER stress水平标志分子葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein78,GRP78）及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP）和凋亡相关蛋白表达情况;再灌6 h后ELISA法检测血清酶学指标,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Evans blue-TTC双染法测定梗死面积;再灌注24 h后检测各大鼠超声心动图。结果 Mel预防性治疗4周可提高左室射血分数（LVEF）及左室短轴缩短率（LVFS）,降低血清乳酸脱氢酶（LDH）及血清肌酸激酶（CK）水平,下调心肌细胞凋亡率及梗死面积,降低ER stress标志蛋白GGRP78及CHOP,降低凋亡通路蛋白（均P<0.01）。结论 Mel预防性治疗显著减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制ER stress相关。     

叉头转录因子1/3在肝纤维化中的作用

肝纤维化是指各种致病因子所致肝内结缔组织异常增生的病理过程。肝纤维化伴随于肝损伤修复愈合的全过程,慢性长期的损伤因素会诱导纤维化进展成肝硬化。流行病学数据显示,2017年我国共报告乙型肝炎新发病例118. 05万、丙型肝炎24. 3万。慢性病毒性肝炎带来了沉重的社会经济负担。叉头转录因子(FOXO)从属于叉头状家族,在细胞的各项生命活动中发挥着重要作用。研究发现,FOXO1/3可通过TGFβ通路调节肝星状细胞活力,在肝纤维化病变中扮演着重要角色。综述了肝纤维化病变机制、FOXO1/3对肝纤维化的调控机制,以及FOXO1/3(肝纤维化病变位点之一)的靶向治疗研究进展。     

室旁核输注褪黑素通过改善氧化应激对抗心肌缺血/再灌注损伤

目的探讨室旁核输注褪黑素通过改善氧化应激对抗心肌缺血/再灌注损伤的机制。方法在下丘脑室旁核中植入微型渗透泵并输注褪黑素或人工脑脊液(vehicle,V),1周后建立大鼠缺血/再灌注模型。测量心肌梗死面积及心脏超声指标。免疫组化和Western Blot用于测定室旁核细胞的NAD(P)H亚单位NOX2的活性以及Cu/Zn-SOD和去甲肾上腺素(NE)水平。结果室旁核输注褪黑素显著减小了心肌梗死面积,降低了NE和NOX2的活性,并提高了Cu/Zn-SOD的表达水平,改善了大鼠的心脏功能。结论室旁核输注褪黑素减弱心肌缺血/再灌注损伤的效应是通过改善氧化应激并进一步降低交感神经活动来实现的。     

氯通道阻滞剂对大鼠心肌缺血再灌注损伤致心肌细胞凋亡的作用

目的本研究应用大鼠在体心肌缺血再灌注损伤（I/RI）动物模型,观察氯通道阻滞剂DIDS（4,4＇-disothiocya-nostibibene-2,2＇-disulfonic acid）对心肌细胞凋亡的作用以及与磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B（PI3K-Akt）信号通路可能存在的相互作用,明确DIDS心肌保护作用的可能机制。方法 75只大鼠随机分成5组：假手术组,I/RI组,I/RI＋DIDS（14 mg/kg）,I/RI＋LY294002（PI3K-Akt特异性阻断剂）,I/R＋DIDS＋LY294002组。TTC染色检测心肌梗死范围;TUNEL法测定细胞凋亡;Caspase-3试剂盒检测caspase-3活性;免疫印迹法检测p-Akt水平。结果与I/R组比较DIDS可以减少心肌梗死范围（各组n=4,P〈0.01）,可以明显抑制心肌细胞凋亡（各组n=5,P〈0.01）,降低凋亡效应子caspase-3活性（各组n=5,P〈0.01）,提高I/RI心肌的p-Akt水平（各组n=5,P〈0.01）,LY294002可以部分阻断这些作用,LY294002自身并无减少心肌梗死范围的作用。结论氯离子通道阻滞剂DIDS对缺血再灌注损伤的心肌具有保护作用,其作用部分是通过PI3K/Akt信号通路来实现的。     

γ-分泌酶抑制剂对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用

目的γ-分泌酶抑制剂(DAPT)是Notch信号通路特异性阻断剂,本实验将研究DAPT对SD大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/RI)的影响,为探明Notch信号通路在心肌I/RI中的作用提供理论依据。方法采用离体大鼠心脏Langendorff逆行灌注模型,缺血50 min,再灌注60 min。实验分为4组,分别为正常对照组(Control)、I/RI组、DAPT(1μM)+I/RI组,DAPT(1μM)组。监测缺血前后血流动力学各项指标,包括:心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF)、计算出心率压力指数(DP,LVDP×HR/1000);氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死(MI)的面积;专用试剂盒测定冠脉流出液(CF)中乳酸脱氢酶含量(LDH)。结果与Control组比较,I/R组缺血后各时间点的收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),冠脉流出液中LDH含量显著升高(P<0.01);与I/RI组比较,DAPT+I/RI组可以加重上述指标进一步恶化(P<0.01);与Control组比较,DAPT各项指标无统计学差异(P>0.05)。结论DAPT有加重心肌缺血再灌注损伤的作用,Notch信号通路可能在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要的调控作用。