眼外伤致前房内睫毛长期滞留二例

例1,男,l7岁.因左眼爆炸伤后渐进性视力下降8年,于2000年7月24日收入院.8年前,患者被鞭炮炸伤左眼,伤后眼红、痛、视物不清,曾在当地医院治疗,病情稳定.     

鼻咽癌患者EBV LMP1基因C端区的缺失突变及序列分析

目的：研究LMP1基因C端区缺失突变在我国南方广东、广西鼻咽癌高发区的存在状况和探讨其在鼻咽癌中所起的作用。方法：采用聚合酶链反应技术（PCR）扩增鼻咽癌患者鼻咽组织中LMP1基因的C末端，并对其进行了克隆和序列分析。结果：20份鼻咽癌组织标本中，有17份扩增出特异性条带，阳性率为85％，阳性个体中只有1份未发生缺失。我们选择其中的4份样品进行了克隆和序列分析，结果显示，4份样品均存在30个碱基的缺失和某些位点的单点突变。结论：广东、广西鼻咽癌高发区鼻咽癌组织中LMP1基因C端区存在较高比例的碱基缺失和点突变。     

T细胞淋巴瘤中爱泼斯坦-巴尔病毒感染情况的研究

目的　通过检测不同类型T细胞淋巴瘤中爱泼斯坦 巴尔病毒 (EBV)基因编码产物EBERs的表达 ,探讨EBV与T细胞淋巴瘤的关系。方法　应用原位杂交的方法 ,对 6 0例经组织学和免疫组织化学确定的T细胞淋巴瘤中EBV编码的小RNAEBERs进行检测 ,并采用 1994年淋巴瘤REAL分类方案对 6 0例T细胞淋巴瘤进行分类 ,以进一步分析与EBV相关的T细胞淋巴瘤的临床病理特征。结果　发现 6 0例T细胞淋巴瘤中EBERs的检出率为 6 1.7% ,外周T细胞淋巴瘤的检出率为6 9 8%。结外淋巴瘤的检出率高于结内淋巴瘤 (P <0 .0 1)。EBERs在T细胞淋巴瘤中的血管中心性T细胞淋巴瘤、血管免疫母T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤中的检出率分别为 17 18,2 2和 4 6 ,与外周T细胞淋巴瘤非特异型 (5 1.9% ,14 2 7)相比 ,差异有非常显著意义 (P <0 .0 1)。EBERs与T细胞淋巴瘤患者的性别、年龄和临床分期无关 (P <0 .0 5 )。结论　外周T细胞淋巴瘤与EBV感染有关 ,尤其是外周T细胞淋巴瘤中的血管中心性T细胞淋巴瘤、血管免疫母T细胞淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤。     

逆转录病毒载体介导HPV16 E6E7基因转化人胚食管纤维细胞的研究

目的 研究HPV16型病毒感染与食管癌发生的关系。方法 包装含有HPVl6E6E7基因重组逆转录病毒，以重组病毒感染人胚食管纤维细胞，在TPA协同下诱导SCID小鼠成瘤。结果 重组病毒感染人胚食管纤维细胞可以诱导SCID小鼠形成肉瘤，可以检测到E6E7基因的存在及表达，流式细胞仪检测从瘤组织培养出来的纤维细胞，确定为异倍体；但未能诱导人胚食管组织成瘤。结论 建立的重组逆转录病毒系统可以成功介导HPV16E6E7基因的转移，可以应用于HPV致瘤性研究。     

Malignant Transformation of Human Embryonic Liver Cells Induced by Hepatitis B Virus and Aflatoxin B_1

Hepatocellular carcinoma (HCC) is a worldwide distribut ed disease accounting for 473 000 newly developed cases ofHCC annually in the world and 235 000 cases in China[1]. Epidemiological and laboratory investigations havedemonstrated that hepatitis…     

单疱病毒性角膜炎并发真菌感染

单疱病毒性角膜炎并发真菌感染潍坊医学院附属医院眼科张少斌，张杰，李贵仁，郭秀婵，张瑞勤由于临床上滥用抗生素及皮质类固醇，诱发ＨＳＫ或角膜真菌病者较多，但ＨＳＫ合并真菌感染病例报告少见［１］。现将我们自１９８８．１０－１９９３．１０所收集到的１８例ＨＳ...     

Epstein-Barr病毒BARF1基因协同TPA诱发猴肾上皮细胞恶性转化的研究

目的 探讨Epstein-Barr病毒（EBV）BARF1基因单独或协同佛波醇乙酯（TPA）诱导猴肾上皮细胞恶性转化的作用。方法 用猴肾永生化上皮细胞PT1和PT7单独或进一步加促癌物TPA注射裸鼠或Scid小鼠背部皮下,观察成瘤情况。结果 EB病毒BARF1永生化细胞PT1客PT7在裸鼠不能形成肿瘤,但在免疫力严重缺陷的Scid小鼠能形成肿瘤,成瘤率为66．7％－100％,成瘤时间较长为45－60d。加TPA后裸鼠及Scid小鼠均能形成肿瘤,裸鼠的成瘤时间为20－22d,Scid小鼠的成瘤时间为5－7d。用聚合酶链反应（PCR）可从肿瘤组织中扩增出BARF1基因。结论 EB病毒BARF1基因是致癌基因,甚至无需促癌物等辅助条件,也能诱发猴肾上皮细胞恶性转化。     

喉良性及恶性病变的Ag－NORs定量研究

对５５例喉良性及恶性病变组织进行了Ａｇ－ＮＯＲｓ染色。结果表明喉癌组癌细胞内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒形态、大小不等，散布于细胞核内，均值为３．２９±０．６３；非典型增生组上皮细胞内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒大小不同，部分散在于核内，均值为２．１１±０．３４；　喉乳头状瘤细胞Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒大小均匀，多数位于核仁内，均值为１．７２±０．１７。经统计学处理，３组间均有显著差异（均Ｐ＜０．０１），提示Ａｇ－ＮＯＲｓ计数对喉良、恶性肿瘤的鉴别，检测癌前病变及观察肿瘤生物学行为均有意义。     

修饰后中国山东地方株HPV16 E6E7基因的转化活性检测及免疫原性研究

目的 利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6E7基因，研制HPV16 DNA疫苗。方法 定点突变E6的终止密码，并保证E7读码框架不定；定点突变E7蛋白的Rb结合区中对其转化活性维持起关键作用的第24位氨基酸。突变修饰后的基因命名为fmE6E7。PCR扩增fmE6E7，重组人pLNCX载体，脂质体法转染3T3细胞，免疫荧光组织化学及Western blot检测转染细胞蛋白的表达。经软琼脂集落培养法和BALB／c裸鼠皮下接种法检测fmE6E7的转化活性。然后PCR扩增fmE6E7，构建pVR1012-fmE6E7真核表达质粒，于C57BL／6小鼠肌肉内直接进行裸DNA免疫，^51Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性，间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。结果 测序证实获得了预期的突变结果。pLNCX-fmE6E7转染细胞体外软琼脂培养3周未见集落形成；裸鼠皮下接种2月后未见移植瘤形成（0／3）。免疫鼠获得了较好的E7特异性的抗体E和抗原特异性的CTL。结论 修饰后E6E7基因可融合表达，转化活性消除的同时还可诱发特异的细胞免疫和体液免疫，表明中国山东地方株的E6E7基因可作为HPV16治疗性DNA疫苗的靶基因。     

HIV-1型整合酶蛋白的表达、纯化及复性研究

目的对HIV-1整合酶蛋白进行原核表达、纯化以及复性研究。方法从HIV-1HXB2中PCR扩增出全长的整合酶基因，连入原核表达载体pET-30a中，得到pET-30a整合酶表达质粒。再将质粒转入大肠杆菌BL21中诱导表达，经镍柱纯化后得到整合酶蛋白。纯化后蛋白在FoldIt复性液中进行稀释复性确定最佳复性液，然后蛋白在此条件下复性并用反相柱回收，最后通过对复性蛋白抽干及再溶分析复性蛋白的物理稳定性。结果HIV-1整合酶蛋白主要以包涵体形式表达，表达量占菌体总量的10％。经镍柱纯化后蛋白的总浓度为0．9mg／ml。蛋白的最佳复性液是：Tris—Cl55mrnol／L，NaCl264mmol／L，KCl11mmol／L，Gu—HCl550mmol／L，EDTA1．1mmol／L，以及附加成分中的GSH、GSSG。复性后蛋白抽干后再溶，溶液清亮透明，SDS-PAGE可见有寡聚体状态的蛋白。结论成功构建了pET-30a整合酶表达质粒。纯化后蛋白的浓度较高。确定了最佳的蛋白复性液。并且初步检测了复性蛋白的物理稳定性。这为蛋白体外活性研究和AIDS药物研究打下了基础。