脑钠肽重组蛋白的表达及生物学活性的研究

目的 比较脑钠肽(BNP)连接在不同载体中表达的BNP成熟肽蛋白和BNP前体蛋白的生物学活性差别.方法 采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-BNP32,PGEX-20T-BNP108,B11-BNP32和B11-BNP108,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含四种重组质粒的工程菌,转化至大肠埃希菌BL21菌中表达BNP成熟肽蛋白和BNP前体蛋白,并用ELISA法检测4种蛋白的生物学活性作用.结果 在大肠埃希菌中表达的成熟肽蛋白BNP32和前体蛋白BNP108经过纯化、复性后具有生物学活性.结论 PGEX-20T-BNP32表达的成熟肽蛋白BNP32的生物学活性最强,为下一步单抗制备的优势蛋白.     

乙肝抗体阳性大学生118例戊型肝炎检出情况

戊型肝炎以肠道传播,目前被认为可能是一种人兽共患病[1]。戊型肝炎病毒(HEV)是引起人类戊型肝炎的一种重要病原体。HEV感染后,症状可表现为临床型与亚临床型,成人多见临床型;少数病人可表现为重症肝炎,甚至导致死亡。笔者通过血清流行病学调查,了解大学生乙肝抗体阳性者戊型肝炎感染情况,以便为这一群体戊型肝炎防制对策的制定提供科学依据。1对象与方法1.1对象从集美大学2006年即将毕业的学生中随机抽取乙肝抗体阳性者118名进行调查。其中男生占41.53%,女生占58.47%;年龄为20~23岁,平均(21.00±0.80)岁,其中男、女生分别为(21.98±0.93…     

水源因素与戊型肝炎病毒感染的关联性

目的通过检测浙江省德清县水系上下游地区农村人群血清戊型肝炎病毒抗体水平,以评价非爆发状态下水源因素与戊型肝炎病毒感染的关联性。方法通过统一的调查表收集1720人的一般资料及可能危险因素,并采用间接酶联免疫吸附法检测血清抗HEV-IgG抗体。结果总标化抗体阳性率为48．79％。其中,上游地区人群标化抗体阳性率为43．52％,下游标化阳性率为51．26％。将两地人群不同的构成特征调整后,下游抗体阳性率仍显著高于上游。同时发现,男性抗体阳性率高于女性;各年龄组阳性率随年龄升高而增加;家庭养猪、喜食猪肝、主要饲养动物和饮酒皆与戊肝感染有统计学关联。结论浙江农村地区戊型肝炎病毒感染情况与当地水源因素有较为显著的关联;猪可能是戊型肝炎病毒的自然宿主之一。     

献血者中戊型肝炎病毒血症研究

目的　了解湖州地区献血者戊型肝炎病毒感染情况。方法　采用ELISA法检测 30 4 7名无偿献血者血清抗 HEVIgM和IgG抗体 ,巢式RT PCR检测抗 HEVIgM阳性血清中HEVRNA。 结果　 30 4 7名无偿献血者中抗 HEVIgG的检出率为 4 1.7% ,抗 HEVIgM检出率为 1.5 %。 4 6份抗 HEVIgM阳性中发现 6份HEVRNA阳性。献血者中病毒血症阳性率为 0 .2 %。 6名HEV病毒血症者中 4名为HEV基因Ⅰ型 ,另 2例为HEV基因Ⅳ型。结论　在献血者中HEV病毒血症并不罕见 ,有必要对输血后戊肝的潜在危险进行评估。     

4型戊型肝炎病毒重组衣壳研究及感染模型初探

目的 表达4型戊型肝炎病毒(HEV)开放式阅读框ORF2重组衣壳蛋白并初步建立用于4型HEV早期感染过程研究的细胞模型.方法 从猪胆汁中调取4型HEV ORF2的肽段(aa368-606)基因,并且利用大肠杆菌系统得到重组D66蛋白.结果 重组D66蛋白在水相中以二聚体为基本单位自组装成分子半径约为13 nm的颗粒.该颗粒与HEV感染的急性期、恢复期患者的血清均有较强的反应性.将D66颗粒与细胞共孵育,发现该颗粒可以与肝实质细胞系HepG2的细胞结合并进入细胞内,这种结合可被恢复期及急性期HEV患者血清所阻断.结论 这些结果表明重组D66蛋白颗粒,可以一定程度上模拟4型HEV的表面位点,并且可以特异性吸附并进入细胞,为进一步研究4型HEV感染的分子机制提供基础和平台.