NKT细胞与移植物抗宿主病

NKT细胞（自然杀伤T细胞）是一种免疫T细胞,同时表达传统T细胞和自然杀伤细胞的表面标志,经特异抗原刺激后能够分泌大量细胞因子,调节Th1/Th2平衡,在预防和治疗移植物抗宿主病方面发挥重要作用.与此同时,NKT细胞能够发挥抗肿瘤和抗感染效应,进而加大了NKT细胞在异基因造血干细胞移植方面的应用,帮助患者重建移植后免疫.因此,进一步了解NKT细胞生物学和免疫学特征及其具体免疫调节机制,对运用NKT细胞防治移植中出现移植物抗宿主病有重要的指导意义.本文就NKT细胞的生物学特征、分类、分化发育,免疫活化及NKT细胞与GVHD（包括机制）、NKT细胞与肿瘤、NKT细胞与感染和NKT细胞与临床GVHD研究进行综述.     

Cyr61对外周血NK细胞的增殖和活性调节

目的:体外实验探讨Cyr61对外周血NK(pNK)细胞的增殖和活性的影响。方法:磁珠分选得到纯化的pNK细胞;流式细胞术检测pNK细胞的抑制性和活化性受体、细胞因子IFN-γ的生成和细胞毒性。结果:Cyr61促进外周血淋巴细胞中pNK细胞的增殖,降低CD16的表达;降低淋巴细胞中pNK细胞的活化性受体NKG2D、NKp30和CD244的表达,提高抑制性受体KIR3DL1的表达;能够促进纯化pNK细胞的KIR2DL1表达,降低纯化pNK细胞的胞内IFN-γ生成和细胞毒性。结论:Cyr61对pNK细胞活化的抑制作用,支持了其他学者关于Cyr61在正常妊娠和子痫前期的发病方面可能发挥重要作用的研究结果。     

17β-雌二醇对小鼠淋巴结、脾脏和胸腺调节性T细胞及其Foxp3表达的影响

目的：研究小鼠去卵巢及体内注射17β-雌二醇（E2）后，淋巴结、脾脏和胸腺CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcell，Treg细胞）及相关调节性因子Foxp3表达的变化与E2的相关性。方法：采用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞功能相关因子Foxp3的表达，CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^＋high T细胞数量的变化。结果：E2抑制淋巴结中Treg细胞Foxp3的表达．上调其在脾脏和胸腺中的表达；E2下调淋巴结中CD4^＋CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋high T细胞的比例，上调它们在脾脏尤其是胸腺中的比例。结论：E2对淋巴结、脾脏和胸腺3种免疫器官中的Treg细胞有不同的调节作用。     

子痫前期小鼠动物模型的NK细胞和细胞因子的变化

目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导的先兆子痫模型小鼠中自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量及其表面受体的变化,同时了解外周血中的细胞因子(TGF-β、TNF-α和IFN-γ)的水平.方法:用磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导小鼠出现先兆子痫(PE)样症状,流式细胞仪检测自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量和表面受体,酶联免疫法检测外周血中TGF-β、TNF-α和IFN-γ.结果:我们建立的PE样小鼠模型是成功的;与对照组相比,gd17.5时PS/PC组外周血和脾脏中NK细胞数目增加.gd11.5时子宫中NK细胞数目突然增加,随后逐渐降低,且在gd14.5和gd17.5时PS/PC组比对照组NK细胞数目明显减少.PS/PC组脾脏中表面受体CD122表达显著降低,而CD244、CD94及NKG2D均显著增加;子宫中所有表面受体显著降低.在gd11.5、gd14.5及gd17.5时,与对照组相比,PS/PC组外周血中TGF-β的表达水平显著增加;而TNF-α和IFN-γ表达的水平大多不发生明显变化.结论:PE可能与母胎界面处NK细胞的数量及表面受体改变有关.外周血中TGF-β的增加可能抑制子宫处NKG2D等NK细胞表面受体的表达.关于TNF-α和IFN-γ在PE样小鼠模型中的作用还需进一步研究.     

17β-雌二醇和富含半胱氨酸蛋白61对JEG 3细胞增殖作用的机制研究

目的 探讨17β-雌二醇(E2)和富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）影响人绒毛膜癌细胞系JEG3细胞增殖的机制。 方法 定量PCR检测Cyr61和microRNA 195(miR-195)的表达,羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色法检测细胞增殖。 结果 E2能够提高Cyr61 mRNA的表达;Cyr61能够降低miR195的表达和促进JEG-3的细胞增殖。 结论 E2通过增强Cyr61和降低miR-195的表达影响JEG-3细胞的增殖,可能为探讨子痫前期的发病机制提供线索。     

脱氢表雄酮诱导CD4+T细胞系Jurkat细胞凋亡的初步探索

为研究脱氢表雄酮(DHEA)对Jurkat细胞增殖活性和凋亡的影响,用不同浓度的DHEA处理Jurkat细胞12 h、24 h后,用MTT法测定细胞活性;Hoechst染色观测细胞形态的改变;碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡;Annexin V/PI双染法检测细胞膜变化;DNA阶梯状电泳分析细胞DNA断裂;荧光显微镜分析细胞线粒体膜电位变化;并用RT-PCR和流式检测凋亡时细胞中Fas和FasL的mRNA和蛋白表达的情况。结果显示,DHEA在10~(-7)mol/L时对Jurkat细胞有显著的增殖抑制作用(P<0.05)和诱导凋亡效果,细胞凋亡率比对照组分别升高2.48%和2.52%;Annexin V/PI双染法检测,处理组凋亡细胞比率比对照组也明显增加;且随着DHEA剂量的增加细胞线粒体膜电位倒塌明显增强,Fas和FasL的mRNA和蛋白水平也随之增加。以上结果表明,DHEA在高浓度时对Jurkat细胞有一定的抑制增殖并诱导其凋亡的作用,Fas/FasL通路和膜电位的改变在此机制中发挥了相应的作用。     

槐耳颗粒联合DC-CIK细胞对乳腺癌MDA-MB-231干细胞体内外杀伤作用研究

目的 探究白屈菜红碱（CHE）对腺样囊性癌细胞（ACC2）生长的抑制作用及机制。方法 利用CCK8法、EdU法、Hoechst33342/PI双染色法、试剂盒法检测CHE对ACC2细胞活力、细胞增殖、细胞凋亡和活性氧（ROS）水平的影响;通过Western blotting技术检测CHE对Cleaved-Caspase 3、PARP、NF-κB、p-JNK、p-p38蛋白表达的影响;利用斑马鱼移植瘤模型检测CHE对斑马鱼体内ACC2细胞生长的抑制作用。结果 CCK-8结果显示：与对照组比较,2、3、4、5、6、7、8、9、10 μmol/L的CHE显著降低ACC2细胞的存活率（P<0.05、0.01）,且呈浓度相关性; ROS检测结果显示：与对照组比较,5、8 μmol/L的CHE导致ACC2细胞内的ROS水平显著上升（P<0.05、0.01）; EdU增殖检测结果表明：与对照组比较,5、8 μmol/L的CHE致使ACC2细胞的增殖能力显著下降（P<0.01）;Hoechst/PI染色结果显示：与对照组比较,CHE 5、8 μmol/L组ACC2细胞凋亡率显著上升（P<0.01）。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）显著抑制CHE诱导的ROS水平升高、细胞凋亡增加（P<0.01）;Western blotting结果显示：2、5、8 μmol/L的CHE能够显著上调Cleaved-Caspase 3、PARP、NF-κB蛋白的表达（P<0.01）,且呈现浓度相关性,5、8 μmol/L的CHE能够显著上调p-JNK的蛋白表达（P<0.01）,8 μmol/L的CHE能够显著上调p-p38的蛋白表达（P<0.01）;NAC显著降低由CHE导致的Cleaved-Caspase 3、PARP、NF-κB、p-JNK、p-p38蛋白表达增加（P<0.01）,5、8 μmol/L CHE能够有效抑制斑马鱼体内肿瘤的生长（P<0.01）。结论 体外及斑马鱼移植瘤模型证明,CHE可以有效抑制ACC2细胞生长,其机制与提高细胞ROS水平,上调NF-κB、p-JNK、p-p38表达,从而抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡相关。     

HIV-1儿童感染者CD3^dimCD56^＋细胞数量及其受体变化的研究

目的:研究人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)儿童感染者体内CD3dimCD56+细胞数量及部分细胞受体的变化.方法:采集11例经确认的HIV-1儿童感染者和10例HIV-1抗体阴性的健康儿童抗凝全血,应用流式细胞术对CD3dimCD56+细胞的数量和细胞上部分受体的表达进行测定.结果:HIV-1儿童感染者CD3dimCD56+细胞的数量显著多于健康儿童(P＜0.01);HIV-1儿童感染者与健康儿童比较,CD16无变化(P＞0.05),NKp30、NKG2D、KIR2DL1和CD244的表达极显著升高(P＜0.01),NKp44、NKp46、KIR3DL1和NTB-A的表达显著升高(P＜0.05),NKp80的表达极显著降低(P＜0.01).结论:HIV-1儿童感染者CD3dimCD56+细胞的数量显著多于健康儿童,并且细胞上受体的表达发生剧烈变化.     

造血干细胞体外扩增及应用研究进展

造血干细胞（hematopoietic stem cell, HSC）是一类成体组织干细胞,通过定向分化产生淋系和髓系等造血祖细胞,进而大量增殖分化成各类成熟的功能性血细胞以维持整个机体的造血稳态。HSC具有自我更新、多系分化、凋亡、运动迁徙和保持静息等生物学特性。正是由于HSC独特的生物学特性,其被用于治疗多种疾病,...     

舒肝颗粒治疗痤疮炎性红斑的疗效观察

目的 观察舒肝颗粒联合光子嫩肤治疗痤疮炎性红斑的临床疗效。方法 收集2019年10月—2020年10月天津市中医药研究院附属医院皮肤科门诊收治的90例痤疮炎性红斑患者,随机分为舒肝颗粒组、光子嫩肤组和联合治疗组,每组各30例。舒肝颗粒组患者口服舒肝颗粒,3 g/次,2次/d。光子嫩肤组患者采用光子治疗仪进行治疗。联合治疗组口服舒肝颗粒,同时接受光子嫩肤治疗。治疗12周。观察3组的临床疗效,比较3组红斑绝对分值的变化。结果 治疗后,舒肝颗粒组总有效率是90.0%,光子嫩肤组总有效率是93.3%,联合治疗组总有效率是100.0%,舒肝颗粒组、光子嫩肤组的总有效率均低于联合治疗组（P<0.05）。治疗后,3组红斑绝对分值均较治疗前显著升高（P<0.05）;治疗后,联合治疗组红斑绝对分值高于同期舒肝颗粒组、光子嫩肤组（P<0.05）。结论 舒肝颗粒联合光子嫩肤治疗痤疮后红斑具有较好的临床疗效,具有一定的推广应用价值。