低频超声联合盐酸氨溴索对表皮葡萄球菌生物被膜的影响

目的 研究低频超声联合盐酸氨溴索对表皮葡萄球菌(Sepidermidis)RP62A生物被膜(biofilm,BF)结构的影响.方法 建立成熟RP62A BF模型.分组处理,XTT法测BF细菌活性变化;激光共聚焦显微镜结合ISA软件定量分析BF;扫描电镜观察BF结构改变.结果 单独低频超声作用BF无效果,1.875 mg/mL浓度氨溴索能有效清除BF,较空白对照组区域孔率增大,平均扩散距离和结构熵减小,P＜0.05;氨溴索联合低频超声(1、0.5h)组效果更加显著,与单独氨溴索组相比,P＜0.05;扫描电镜显示低频超声能明显促进氨溴索对BF的作用,使BF变薄,结构趋于单一疏松.结论 低频超声能显著促进氨溴索对表皮葡萄球菌BF的清除作用.     

低频超声联合环丙沙星对铜绿假单胞菌生物被膜的杀菌作用及其结构的影响

目的 研究低频超声联合环丙沙星对铜绿假单胞菌PAO1菌株生物被膜(biofilm,BF)的杀菌作用及其结构的影响.方法 建立PAO1菌株BF模型,设空白对照组,低频超声组,环丙沙星组,环丙沙星+低频超声组(超声辐射前给药),低频超声+环丙沙星组(超声辐射后给药),XTT比色法测定BF细菌活力的变化;激光共聚焦显微镜观察并结合图像结构分析软件对BF结构进行定量分析;扫描电镜观察BF结构的改变.结果 环丙沙星+低频超声组和低频超声+环丙沙星组BF细菌活力明显降低,BF厚度变薄,区域孔径增大,平均扩散距离与结构熵减小,与空白对照组、低频超声组、环丙沙星组比有显著性差异(P＜0.05);扫描电镜显示,低频超声联合环丙沙星对BF清除明显.结论 低频超声联合环丙沙星对PAO1菌株BF有很好的杀菌作用,且能破坏其结构.     

纳米银离子对表皮葡萄球菌生物膜结构的影响

目的 探讨纳米银离子对表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)生物膜(biofilm)结构的影响.方法 采用摇床法,以纳米银离子含量不同的乙烯-醋酸乙烯酯(ethylene-vinyl acetate,EVA)塑料为细菌粘附载体,建立体外生物膜模型;将培养2d的标本分别放在扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)和荧光显微镜下观察空白组与纳米银离子干预组生物膜的形成情况;荧光探针SYT09/PI标记生物膜内细菌、激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)结合生物膜图形结构分析软件(image structure analyze,ISA)分析纳米银离子作用后1d、2d组生物膜的结构变化.结果 2d组生物膜经SEM和荧光显微镜检测,纳米银离子干预组相比空白对照组,细菌变得稀疏,结构明显受到破坏,多糖产量减少.CLSM下观察可见经纳米银离子干预后生物膜菌落变稀疏,孔道变多:ISA软件分析结果显示,2d时空白对照组与0.1%纳米银离子干预组生物膜厚度、平均扩散距离(average diffusion distance,ADD)和结构熵(textual entropy,TE),分别为17.55±2.08和10.80±1.68:3.56±0.54和1.85±0.06;5.29±0.57和2.72±0.39(P<0.05):区域孔率(areal porosity AP)为0.90±0.02和0.98±0.01(P<0.05).0.05%纳米银离子组其作用效应没有0.1%纳米银离子组明显.1d组生物膜也有相同的趋势.结论 纳米银离子可破坏表皮葡萄球菌生物膜的结构,高浓度组较低浓度组效果明显.     

氨溴索对成熟表皮葡萄球菌生物被膜结构的破坏作用和膜内菌的杀灭作用

目的 建立表皮葡萄球菌(S.epidermidis)生物被膜(biofilm,BF)体外模型,探讨氨溴索对表皮葡萄球菌成熟BF结构的破坏作用和对膜内菌的杀火作用.方法 落平板法培养表皮葡萄球菌RP62A 24h,得到成熟BF,不同浓度氨溴索作用24h后,用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察BF的形态结构;激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)结合BF图像结构分析软件(image structure analyer,ISA)对BF结构参数进行分析,利用四唑盐(XTT)减低法检测氨溴索对BF内细菌的杀火作用.结果 氨溴索处理以后,电镜观察可见1.875mg/mL氨溴索处理组BF结构被破坏,仅见少量散在细菌.ISA软件定量分析显示:1.875mg/mL氨溴索处理组和对照组的BF厚度分别为(27.95±5.93)μm和(9.76±1.29)μm,t=7.955,P<0.05;平均扩散距离(average diffusion distance,ADD)分别为2.173±0.219和1.625±0.092,t=5.640,P<0.05;结构熵(textual entropy,TE)分别为7.706±0.610和5.488±0.747,t=5.633,P<0.05;区域孔率(areal porosity,AP)分别为0.772±0.036和0.889±0.063,t=4.322,P<0.05.XTT减低法显示氨溴索的浓度为1.875、3.7和7.5mg/mL时,A<,450>的值分别为1.288±0.251、0.548±0.170和0.156±0.05,与对照组相比P<0.05,均有统计学意义.结论 氨溴索可破坏表皮葡萄球菌BF的形态结构,随着氨溴索浓度的增加,杀灭BF内细菌的能力增加.