兔骨髓基质干细胞骨向诱导实验研究

目的:研究兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)的体外培养以及骨向诱导分化情况,进一步探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:无菌条件下抽取兔的股骨骨髓,然后进行骨髓基质干细胞的分离和体外培养,并向成骨细胞定向诱导分化。结果:体外分离的骨髓基质细胞呈贴壁生长,改良MTT法测定显示骨髓基质细胞于第7.8天左右可达到增殖高峰;诱导后BMSC可向成骨细胞分化,细胞呈成骨细胞形态为梭形和多角形并可形成钙化结节。改良钙钴染色法检测诱导细胞碱性磷酸活性呈强阳性。扫描电镜观察细胞呈较典型的成骨细胞状态,并可见钙盐沉积。结论:骨髓基质细胞具有来源充足,取材方便,创伤小无明显并发症。骨髓基质干细胞分化增殖能力较强,成骨能力确定。所以采用骨髓基质细胞作为种子细胞构建组织工程骨有比较可靠的依据。     

前牙垫在颞颌关节紊乱症治疗中的体会

颞下颌关节紊乱是一种常见病 ,它是继龋病 ,牙周病和错牙合畸形之后发病率最高的口颌系统疾病 ,多见于青壮年。主要临床表现是关节疼痛、弹响和下颌运动障碍等症状 ,其病因复杂 ,但公认与精神、牙合、肌肉等多种因素有关 ,其中牙合因素是重要因素。以往曾采用各种理疗 ,关节腔内注射胆固醇 ,手术等方法治疗 ,但这些方法相对复杂 ,创伤性大 ,不利于广泛开展。作者在临床中应用前牙牙合垫对此类患者进行治疗 ,收到了较好的临床疗效。临床资料1 临床病例　男性 14例 ,女性 36例 ,年龄最小 2 1岁 ,最大 4 5岁 ,2 1～ 30岁 16例 ,30～ 4 5岁 34例…     

RGD多肽仿生修饰微种植体支抗骨界面结合强度的实验研究

目的:探讨即刻负载条件下,RGD多肽涂层对微型支抗种植体-骨界面结合强度的影响。方法:选择28只新西兰大白兔,左侧胫骨平行植入2枚附着RGD多肽涂层微支抗种植体,右侧为2枚未经RGD多肽涂层附着处理的对照组。根据种植体即刻负载力值的不同,分为200 g、400 g。种植后1周、2周、4周、8周分别处死两组实验对象,通过推出实验测试种植体与骨界面的结合强度。结果:在200 g、400 g力加载中RGD多肽仿生修饰组与对照组进行比较,术后第4、8周时,RGD多肽仿生修饰组骨的力学结合强度高于对照组的结合强度,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RGD多肽仿生修饰微支抗种植体能够加强微种植体与骨组织的结合强度。     

活化Notch1信号促进骨肉瘤细胞体外侵袭作用及机制

目的:初步探讨活化Notch1信号影响骨肉瘤细胞侵袭行为的分子机制。分析Notch1信号活化后,RANKL-OPG-RANK信号轴的变化情况。方法:体外培养骨肉瘤细胞系Saos-2,转染Notch1信号的胞内段ICN1后,检测骨肉瘤细胞的侵袭能力,利用实时定量PCR检测RANKL、RANK和OPG的mRNA表达水平。结果:实验组(Saos-2-ICN)ICN1的蛋白表达水平高于对照组(Saos-2-G418)。Saos-2-G418侵袭细胞数为(41.4±6.4)个,Saos-2-ICN侵袭细胞数为(93.7±12.8)个。Saos-2-G418组RANKL、OPG和RANK分子mRNA相对表达水平分别为(0.6±0.07),(1.2±0.14)和(0.3±0.04);Saos-2-ICN组RANKL、OPG和RANK分子mRNA相对表达水平分别为(1.8±0.3),(0.58±0.09)和(2.0±0.4),两者间具有统计学差异(P<0.05)。结论:活化Notch1信号,提高细胞侵袭力,升高RANKL和RANK基因mRNA表达水平,降低OPG基因mRNA表达水平。本实验结果提示RANKL-OPG-RANK信号轴可能参与Notch1信号调控骨肉瘤细胞的侵袭和转移。     

miR-197在人口腔鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖的作用机制★

目的 探讨miR-197在人口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及对细胞增殖的作用机制。方法 选取2015年3月—2019年3月在海南医学院第一附属医院选择手术切除病灶的100例OSCC患者的肿瘤组织及癌旁组织（距离病灶边缘超过2.5 cm），qRT-PCR检测miR-197在OSCC组织及细胞系CAL27中的表达，Western blotting检测JAK2在OSCC组织及细胞系中的表达。构建沉默miR-197表达的病毒载体（miR-197-siRNA）及miR-197-siRNA阴性对照（miR-197-siRNA-NC），转染CAL27细胞，以未处理的CAL27细胞作为空白对照；倒置显微镜观察转染miRNA-197后的细胞形态；流式细胞术、EdU标记实验、Transwell小室实验分别检测miR-197对CAL27细胞凋亡率、DNA合成能力、侵袭能力的影响；荧光素酶实验基因报告分析miR-197与JAK2的作用关系，Western blotting检测各组细胞中JAK2的表达。结果 qRT-PCR结果显示，与癌旁组织相比，miR-197在OSCC组织中的表达明显升高，JAK2在OSCC组织中的表达明显降低（P<0.05）。与人正常口腔黏膜角化细胞株HOKs相比，miR-197在人OSCC细胞株CAL27中的表达明显上升，JAK2在CAL27中的表达明显下降（P<0.05）；与miR-197-siRNA-NC组相比，miR-197-siRNA组贴壁细胞数量明显减少，胞质空泡样，细胞堆积明显增多，染色质固缩，核膜破损严重，线粒体空泡。流式细胞术、EdU标记实验、平板集落克隆实验、软琼脂集落形成实验结果表明，与miR-197-siRNA-NC组相比，miR-197-siRNA组细胞凋亡率明显增加，细胞内DNA合成明显受阻，细胞增殖和侵袭明显受到抑制，差异均具有统计学意义（P<0.05）；荧光素酶实验基因报告分析结果证明，miR-197与JAK2具有靶向调控关系；Western blotting结果表明，与miR-197-siRNA-NC组相比，miR-197-siRNA组细胞中JAK2的表达明显升高（P<0.05）。结论 miR-197在OSCC中呈高表达，下调miR-197可抑制OSCC细胞增殖，这可能与JAK信号通路有关。     

金黄地鼠舌癌微血管构筑的实验研究

目的：动态研究金黄地鼠舌癌微血管的空间构筑特点。方法：采用树脂血管腐蚀铸形扫描电镜观察的方法。结果：舌癌血管生成始于上皮单纯增生期。早期增生上皮的血供存在两种形式,原有组织微血管扩张、增粗,以及新血管形成。随着肿瘤细胞增殖、浸润,血管增生加剧,原有组织内毛细血管网、微动静脉及小动静脉发生变化与改建,失去原有组织内的微血管构筑特征,形成肿瘤独特的微血管系统。血管畸形明显,出现多数无功能血管,空间构筑混乱。结论：舌癌微血管构筑和正常组织相比有本质差异。     

人舌癌顺铂-白蛋白微球栓塞性化疗后增殖细胞核抗原及血管改变的免疫组织化学研究

本实验通过定量免疫组化方法 ,研究了舌癌顺铂白蛋白微球栓塞治疗前后肿瘤中血管和增殖细胞的改变及其相互关系 ,发现两者在栓塞后随着时间的推移均逐渐减少 ,前者至灌注后四周时已接近正常舌粘膜水平 ,灌注后五周与正常舌膜无显著差异 ,在粘膜下组织中已无法发现 PCNA染色阳性的肿瘤细胞 ,后者至第四周时已接正常舌粘膜水平。两者间变化呈指数曲线正相关关系 ,从而为基于阻断肿瘤血供及药物缓慢持续作用的舌癌含药微球栓塞性化疗提供了实验研究的依据 ,说明将增殖细胞阳性比例作为治疗效果的监测指标是切实可行的。     

平阳霉素白蛋白微球对血管内皮细胞形态的影响

目的:研究平阳霉素白蛋白微球(PYMAMS)对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)和兔耳中央动脉的血管内皮细胞形态的影响。方法:体外细胞实验中,通过倒置相差显微镜和电镜观察PYMAMS、PYM和AMS作用24、48、72、96h后的血管内皮细胞形态。动物实验采用区组随机法,于每只兔的双耳分别注射PYM水剂、PYM油剂、PYMAMS油剂。注射后2、7、14、21d,通过光镜和透射电镜观察兔耳中央动脉的组织学变化。结果:体外实验中,PYMAMS和PYM注射剂引起血管内皮细胞内出现空泡,细胞肿胀、变形、坏死。但AMS对血管内皮细胞没有损害。而动物实验中,PYM水剂组血管壁和血管内皮细胞无明显改变;PYM油剂注入后2、7d,血管内皮细胞肿胀,细胞内空泡,细胞脱落后有微血栓附着。21d有血管内膜及血管内皮细胞增生;PYMAMS组,注射后2、7d,血管内皮细胞出现肿胀、脱落,小血管远心端可见微球栓塞。注射后14d,血管内皮细胞增生,血管壁增厚,管腔缩小;微球有吸收改变。注射后21d,动脉管壁增生明显,个别细胞核呈分裂像,血管腔出现闭锁,小静脉内膜增生。结论:PYMAMS对血管内皮细胞造成的损伤较单一PYM明显。     

涎腺恶性肿瘤患者生存率相关因素分析

涎腺恶性肿瘤是口腔颌面部较常见的恶性肿瘤 ,其组织学类型繁多 ,诊断和治疗方法均有其特点 ,许多资料从不同侧面进行了探讨[1 ,2 ] 。本文对涎腺恶性肿瘤 718病例作一回顾性临床分析 ,对影响其生存率的因素 (病理、部位、包膜受累情况 )进行了讨论。临床资料195 3～ 1993年在华西口腔医学院颌面外科治疗并有完整资料的三大涎腺恶性肿瘤患者 718例 ,均经病理证实。其中 6 88例经 3年以上随访 ,随访率为 95 .82 %。 30例失访 ,按死亡计算。男性 4 2 0例 ,占 5 8.5 % ;女性 2 98例 ,占 4 1.5 %。年龄最小 2 .5岁 ,最大年龄 79岁 ,平均年龄为 4…     

平阳霉素磁控缓释微球的制备

利用明胶的溶解性及经甲醛处理可使其固化的特性，采用改良的冷冻凝聚法，制备了包裹超微Ｆｅ３Ｏ４和平阳霉素的磁控缓释微球，避免了抗肿瘤药物在加热固化时引起的变性及降低其抗肿瘤活性，制成的微球为褐色粉末，易于保存，磁球基本为圆球形，粒径为０．７１～７．１４μｍ粒径小，总表面积小，有助于药物释放，分散性好，可用含０．５％ｔｗｉｎ－８０的生理盐水分散，流动性好，不凝聚成堆，明胶易得，价格便宜，制作工艺简便，