盐酸二甲双胍肠溶胶囊人体药动学及生物等效性

采用双周期随机交叉给药法，比较T20名健康男性志愿者单剂量口服盐酸二甲双胍肠溶胶囊500mg后的药物动力学，并与参比制剂进行生物等效性评价。采用LC—MS／MS法测定血浆药物浓度，结果表明，受试制剂和参比制剂的主要药物动力学参数为：Cmax为（533．0±203．2）和（549．5±210．6）ng／ml，tmax为（3．6±1．5）h和（3．5±1．7）h，AUC0→24h为（3330．5±1027．3）和（3468．4±1139．1）h·ng·ml^-1，AUC0→∞（3405．7±1046．7）和（3553．2±1155．7）h·ng·ml^-1。受试制剂的相对生物利用度为（97．8±12．2）％，表明两种制剂生物等效。     

用pProEXHT载体进行人FLT3配体基因的表达与产物的亲和层析纯化

目的 :探讨寡聚组氨酸多肽与目标蛋白融合基因的表达及其产物的金属离子螯合亲和层析纯化方法。方法 :将人FLT3配体 (FL)胞外段cDNA连入 pProEXHT载体 ,转入大肠杆菌实现表达。分离包涵体并进行复性处理后 ,通过Ni2 离子螯合亲和层析纯化融合蛋白表达产物。结果和结论 :6×组氨酸 FL融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的 15% ,用Ni2 离子螯合亲和层析纯化表达产物 ,一次过柱的纯度可达 90 %以上 ,操作程序简便省时 ,是日后FL基因工程产品大规模制备的可行途径     

大规模牛血红蛋白提取方法的研究

建立了适合中国国情的大规模牛血红蛋白（Hb)的提取和纯化方法,为血液替代品的研究和生产提供原料保障。通过建立水性两相系统提取法、乙酸锌沉淀提取法、CO饱和提取法和板框过滤结合脱氧加热提取法,比较了用不同方法提取的牛Hb的纯度和牛Hb中所含的ertHb、HbCO和HbO2的含量。板框过滤结合脱氧加热提取法对器材要求不高,便于产业化,适合于为血液替代品的研究和生产提供合格的原料。     

人造血液基质聚合牛血红蛋白的抗原性研究

目的 通过动物实验,推导人造血液基质聚合牛血红蛋白（poly-BHb)输入人体后可能引起的免疫反应。方法 制备兔抗人Hb、兔Hb和poly-BHb的抗体,研究对兔而言这3种Hb的抗原性的强弱和它们之间抗原性的交叉程度。将大量poly-BHb溶液输入家兔体内,观察家兔的免疫反应。通过计算机模拟,比较天然人、兔、牛Hb之间氨基酸序列、空间结构和抗原位点的差异。结果 天然牛Hb与人Hb分子的构象几乎一致,poly-BHb与人Hb有高度相似的抗原性。poly-HBb反复大量输入家兔休丙未能测出抗体。结论 从结果初步推论,poly-BHb溶液有限次数输入人体,引起免疫反应的可能性较小,但尚需要更多的试验及人体安全性试验加以证实。     

用HPLC—MS／MS法测定人血浆中的二甲双胍浓度

目的：建立高效液相色谱-质谱／质谱（HPLCMS／MS）联用法测定人血浆中二甲双胍浓度的方法。方法：血浆样品经乙腈沉淀蛋白质后，用HPLC—MS／MS法测定二甲双胍浓度。甲醇-乙腈10mmol／L乙酸铵溶液（20：20：60）为流动相，流速为0．2mL／min；采用大气压化学电离源，以多离子反应监测（MRM）方式进行正离子检测，二甲双胍和内标苯乙双胍的定量分析离子对分别为m／z 130．2→71．0和m／z 206．1→59．9。结果：血浆样品中二甲双胍线性范围为2．0～2000μg／L（n=7，r=0．9996），最低定量限为2．0μg／L。低、中、高（10、500、1500 μg／L）3种浓度的日内RSD分别为4．65％、2．84％和3．41％（n=5）；日间RSD分别为7．96％、3．98％和4．77%（n=5）；准确度为95．9％、97．4％和89．90%（n=5）。结论：本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确，可用于人血浆中二甲双胍的含量测定。     

医疗语义众包标注平台设计和应用研究

详细阐述医疗语义众包标注平台的标注流程与方法,包括平台角色分配、任务动态分配、用户能力评估、质量控制与检查等方面,介绍平台技术架构、结构与功能,通过实验对比传统人工标注与众包标注平台的应用效果,结果证明后者在标注速度、耗时、正确率上均优于前者。     

人血浆中尼莫地平的LC-MS/MS法测定及其药物动力学

建立了LC—MS／MS法测定人血浆中尼莫地平的浓度，并研究了20名健康受试者自身对照双周期交叉口服60mg尼莫地平受试制剂和参比制剂后的药物动力学。采用C18柱，流动相为甲醇，尼群地平为内标。以选择性离子反应检测（MRM）扫描方式进行检测，监测离子质荷比（聊止）为419.3→343．1（尼莫地平）和361．0→329．0（尼群地平）。血浆样品经NaH2PO4缓冲溶液（pH12）碱化，以正己烷-二氯甲烷-异丙醇混合液萃取。血浆中尼莫地平的提取回收率为62．5％～69．9％，线性范围为0．25～100ng／ml，定量限为0．25ng/ml。     

早期造血生长因子FLT3配体研究进展

ＦＬＴ３配体是新近发现的一种早期造血生长因子，主要调节最的造血干／祖细胞的增殖和分化，对定向的，成熟的造血细胞没有作用。ＦＬ是协同造血因子的一员，其受体ＦＬＴ３属于酪氨酸激酶受体第三家族。本文就ＦＬ的结构和功能研究做一综述。     

血液替代品基质聚合牛血红蛋白制备方法的研究

 目的建立合适的以聚合的牛血红蛋白（Hb）为基质的血液替代品的制备方法。方法用乙醇醛聚合牛Hb,用电泳和HPLC检测聚合程度、超滤去除大于相对分子质量(Mr)1000000的大分子和小于100000的小分子,用生理溶液平衡后,检测其生物学活性和流体力学特性。结果牛Hb被有效聚合、超滤后,Mr超过500000的组分还占4.6%,32000的占7.3%,64000～500000的组分占88%;牛Hb在聚合后氧亲和力、血氧饱和度和溶液的溶氧量基本保持不变,其溶液黏度低,近似牛顿液体。结论牛Hb经乙醇醛聚合后,Mr分布、生物学活性和流体力学特性理想,有可能成为新的血液替代品。     

人血浆中维生素E烟酸酯的LC—MS／MS法测定及其药动学

目的：建立LC—MS／MS法测定人血浆中维生素E烟酸酯浓度的方法。方法：研究22例健康受试者自身对照、双周期交叉口服0．2g维生素E烟酸酯受试制剂和参比制剂后的药代动力学。采用C18柱,流动相为甲醇（含0．05％甲酸）,内标为盐酸氨溴索,以选择性离子反应检测（MRM）扫描方式进行检测,检测离子质荷比（m／z）为536．5→165．1（维生素E烟酸酯）和378．9→263．9（盐酸氨溴索）。血浆样品用NaOH碱化、沉淀蛋白,石油醚提取浓缩。结果：血浆中维生素E烟酸酯线形范围为1．44～1666．7ng／mL,维生素E烟酸酯最低定量浓度为1．44ng／mL。结论：本方法检测速度快、灵敏度高、专属性强,可用于维生素E烟酸酯口服制剂的人体药动学研究。