黄嘌呤氧化酶比色法测定血清无机磷

目的 建立一种酶学分析法以测定血清无机磷的含量。方法 血清无机磷与次黄嘌呤核苷在嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）的催化下，生成次黄嘌呤和核糖－１－磷酸，黄嘌呤氧化酶氧化次黄嘌呤生成尿酸和过氧化氢，过氧化氢与４－氨基安替比林和２，４，６－三溴－３－羟基苯甲酸在过氧化物酶的作用下，生成红色产物，在５０５ｎｍ有最大吸收。结果 线性范围为０．２５￣５．０ｍｍｏｌ／Ｌ，批内和批间平均变异分别为１．１７％和２．７９     

用API 50CH系统鉴定9株产高光学纯度D-乳酸野生菌株

目的：对从某发酵食品中分离纯化出的9株产高光学纯度D-乳酸的野生菌株（SZD菌株）进行鉴定。方法用API 50CH碳水化合物鉴定试剂条对9株SZD菌株进行碳水化合物发酵试验,根据碳水化合物发酵试验结果对其进行鉴定。结果利用API 50CH系统将9株SZD菌株鉴定为棒状乳杆菌。结论 API 50CH系统简单快捷,可将乳酸杆菌鉴定至种的水平。     

应用16SrRNA基因序列分析快速鉴定临床标本中的革兰氏阳性杆菌

目的探索一种快速鉴定临床标本中革兰氏阳性杆菌的方法。方法利用PCR技术扩增待检菌株的16SrRNA基因序列,通过分析待检菌株的16SrRNA基因序列对其进行鉴定。结果5株待检菌株的16SrRNA基因序列均成功扩增,其中4株的16SrRNA基因序列与基因库中已注册的核酸序列相似率达99．9％以上,将其鉴定到种的水平,1株的16SrRNA基因序列与基因库中雷弗森菌属的核酸序列相似率为97．09％,将其鉴定为雷弗森菌属。结论应用16SrRNA基因序列分析可快速、准确地鉴定临床标本中的革兰氏阳性杆菌。     

产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌感染的临床和微生物学特点

目的 研究分析产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌感染的临床和微生物学特点.方法 收集2011年1-12月武警总医院18株产KPC酶的肠杆菌科细菌,使用PCR和测序的方法对菌株进行鉴定,用微量肉汤稀释法检测其对常用抗菌药物的耐药性,并对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌感染的病例临床资料进行调查分析.结果 2011年从临床送检的标本中,通过表型鉴定和PCR检测,共分离出产KPC型碳青霉烯酶细菌18株,其中肺炎克雷伯菌13株,大肠埃希菌4株,产气肠杆菌1株.90％患者在产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌分离之前,使用过头孢菌素类(包括第二、三、四代头孢菌素)、头霉素、氨曲南和β内酰胺酶抑制剂复方制剂,70％患者使用过碳青霉烯类抗生素.所有菌株对头孢菌素类和碳青霉烯类抗生素耐药,对阿米卡星的敏感率为60.0％,对替加环素的敏感率为100％.经过治疗后,7例患者死亡,病死率43.8％.结论 产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的出现,提示临床上应严格控制抗生素的使用,加强医院感染控制措施,防止和减少此类耐药菌在医院内的传播.     

实时荧光PCR法检测DPYD*9等位基因的单核苷酸突变

目的:建立一种简便、特异的对二氢嘧啶脱氢酶基因DPYD*9进行等位基因分型的方法。方法:以DPYD基因为靶合成含突变位点的野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R,用DNA荧光嵌入染料SYBRG reenⅠ进行荧光PCR扩增,对产物进行溶解曲线分析以确定基因型;同时优化了引物浓度,分析其灵敏度并与普通PCR进行了比较,对20份PCR产物进行了验证。结果与结论:以野生型基因组为模板时,WF和R组合有荧光响应,而TF和R组合无荧光响应;当以突变型基因组为模板时,TF和R组合有荧光响应,而WF和R组合无荧光响应。两者Ct值均为24,Tm值均为83oC。优化引物浓度为0.25μmol/L,荧光PCR可分出10个模板拷贝数的基因型,而普通PCR只能区分模板为8.0×102拷贝数的基因型。PCR产物测序证实荧光PCR法与直接测序结果一致。该方法能准确快速地区分DPYD*9的基因型,敏感性和特异性强。     

肝移植后胆道铸型综合征病人中HLA抗体检测的临床意义

目的 研究肝移植受者体内的HLA致敏状态与胆道铸型综合征的关系以及HLA抗体在预测免疫因素引起胆道铸型综合征中的作用.方法 收集52例肝移植病人术前术后8个时间点系列血清共416份,用ELISA法检测受者血清中HLA抗体,将52例病人分为两组,20例无胆道铸型综合征者为对照组,32例发生胆道铸型综合征者设为实验组,分析两组间HLA抗体水平有无显著性差异,及与主要生化指标变化的关系.结果 胆道铸型综合征组术后HLA抗体阳性率显著高于对照组(P<0.05),胆道铸型综合征临床症状恢复时间与HLA-Ⅱ类抗体的出现时间呈负相关性.结论 HLA-Ⅱ类抗体的动态监测可作为胆道铸型综合征发生的预警信号.     

临床化学质量控制方法的选择和设计

使用设计的质量控制选择格子来帮助临床化学实验室的检验人员选择和设计质量控制方法。格子是一个3×3分级表，其确定了与具有不同过程能力和测定过程稳定性相应的控制测定值个数和控制规则。在过程的能力基础上选择格子的行，在过程稳定性基础上选择格子列。格子相交的小方块即是具有之当误差检出和假失控概率的控制方法。为了提供过程能力的定量指数，可计算医学上重要系统误差的大小；以及从经验或从质控记录中定量地估计医学上重要误差的发生率（f）。建立了单规则固定限方法，其能在Levey－Jennings控制图上执行；以及在Westgard多规则控制方法上改编多规则控制方法。     

Chelex-100法快速提取革兰氏阳性杆菌基因组DNA

目的探索一种快速、高效提取革兰氏阳性杆菌基因组DNA的方法。方法采用Chelex-100法提取14株革兰氏阳性杆菌的基因组DNA,利用PCR技术扩增16SrRNA基因及4个单拷贝管家基因以评价提取核酸的质量。结果 Chelex-100法能够在20min内从革兰氏阳性杆菌中提取出基因组DNA,所提取的DNA可直接用于PCR扩增。所有菌株的16SrRNA基因及棒状乳杆菌的4个单拷贝管家基因均扩增成功,PCR产物经电泳检测目的条带清晰特异,与预期目的片段长度相符。结论 Chelex-100法具有快速、高效、安全、经济的特点,采用这种方法提取的革兰氏阳性杆菌的基因组DNA可直接作为PCR扩增的模板。     

结肠癌三维适形放射治疗和常规放射治疗的临床疗效观察

目的探讨术前三维适形放射辅助治疗(3DCRT)结肠癌和常规放射辅助治疗结肠癌的临床疗效及放射治疗反应。方法采用3DCRT方法辅助治疗结肠癌117例(3DCRT组,5～6Gy/次,隔日照射1次,共7～8次,总剂量40～42Gy,13～15天),与同期常规放射辅助治疗(CF组,2.0 Gy/次,5次/周,64～68Gy,44～48天)的102例结肠癌进行比较。结果 3DCRT组和CF组的1、2、3、4年局部控制率分别为75.3%、66.5%、52.7%、46.1%和55.3%、47.2%、36.5%、27.8%,差异有显著性(P=0.016)。3DCRT组和CF组的1、2、3、4年生存率分别为65.2%、55.1%、45.7%、40.5%和51.2%、42.5%、31.0%、24.6%,差异有显著性(P=0.026)。血液系统及全身反应3DCRT组较CF组比较,差异有显著性(P=0.009,0.023)。结论 3DCRT能明显改善结肠癌的局部控制率和生存率,近期放射反应及远期放射损伤均可耐受。     

抗酒石酸酸性磷酸酶的测定方法及其临床意义

近年来,骨质疏松症已成为一个日益严重的公共卫生问题,随着人们老龄化的加剧,此问题将会更加突出。骨质疏松是一种全身性骨量及骨组织结构改变,伴有骨脆性增加及易骨折等症状的骨科疾病。多见的是原发性,包括绝经后妇女的骨质疏松及老年进行性骨质疏松。其特点是骨代谢过程中骨吸收和骨形成之间的相对平衡遭到破坏,出现骨量减少与骨组织结构改变。成骨细胞和破骨细胞是骨代谢过程的细胞基础,其中破骨细胞主要参与骨吸收,因此检测破骨细胞的活性就成为实验室中研究骨质疏松症的一个重要课题。最近的研究表明,血清抗酒石酸酸性磷酸酶…