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目的 研究利用环介导等温扩增(loop–mediated isothermal amplification,LAMP)结合核酸试纸条技术建立艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)的快速检测方法,为艰难梭菌检测提供一种快速检测的方法。方法 收集2016年1月至2017年12月杭州市临安区第一人民医院临床感染性腹泻患者的粪便标本201份。根据艰难梭菌毒素A基因特异序列设计引物,选择6条最佳引物,用LAMP环介导等温扩增曲线、钙黄绿素目视法和核酸试纸条测试实验结果,再优选反应体系,最后检测粪便中的艰难梭菌。结果 LAMP法能在60℃条件下扩增1h检出艰难梭菌,对1株艰难梭菌和7株非艰难梭菌检测,只有艰难梭菌能检出阳性扩增,设计的引物具有良好的特异性。脱氧核糖核酸(deoxyribo nucleic acid,DNA)检出限为0.8pg/μl。结论 LAMP结合核酸试纸条技术快速检测粪便艰难梭菌具有敏感度高、操作简便、特异性强、可视化、方便快捷的特点,适用于艰难梭菌的快速检测。 相似文献
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目的了解临安地区市售水产品中副溶血性弧菌污染情况,并对毒力基因和药敏进行检测,为防治因副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供依据。方法随机采集市售水产品205份,采用PCR方法对分离的副溶血性弧菌进行tdh、trh基因扩增,并进行血清分型和药敏实验。结果 205份水产品中有19份样品分离出副溶血性弧菌,总检出率为9.3%,其中虾类检出率最高为15.4%;19株菌检出4株tdh阳性,1株trh阳性;19株水产品中分离出的副溶血性弧菌对氨苄西林耐药率达到100.0%,有2株耐菌株耐2种以上抗生素,对环丙沙星、头孢噻肟、诺氟沙星、复方新诺明4种抗生素完全敏感。结论临安市售水产品副溶血性弧菌污染已达一定程度,同时存在耐药情况,水产品污染状况应该引起有关部门的重视。 相似文献
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