PKC对雷帕霉素抑制内皮生长晕细胞作用的影响及机制

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在雷帕霉素干预内皮生长晕细胞(EOCs)后所引起的EOCs功能抑制中的作用.方法 采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,培养并扩增EOCs,采用免疫细胞法、荧光染色法鉴定EOCs特性.将培养的EOCs分别给予10 μmol/L的雷帕霉素(雷帕霉素组)、1μmol/L的PKC抑制剂Go6976预处理30 rmin后再加10 μmoL/L的雷帕霉素(Go6976+雷帕霉素组)、1μmoL/L的Go6976(Go6976组)组及配制雷帕霉素的溶剂(对照组),作用24 h后CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,倒置显微镜下检测细胞的黏附能力.结果 雷帕霉素组EOCs的增殖、迁移、黏附能力均低于对照组(P均＜0.01).Go6976+雷帕霉素组EOCs的增殖、迁移、黏附能力均高于雷帕霉素组(P均＜0.01).结论 雷帕霉素能够抑制EOCs的增殖、迁移、黏附能力.Go6976可以改善雷帕霉素对EOCs增殖、迁移、黏附的抑制作用.PKC可能参与了雷帕霉素对EOCs功能的抑制作用.     

理阿诺碱对雷帕霉素诱导的内皮生长晕细胞功能抑制的保护作用

目的 探讨理阿诺碱对雷帕霉素诱导的内皮生长晕细胞（EOCs）功能抑制的影响.方法 密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,培养并扩增EOCs,免疫组化法、荧光染色法鉴定其内皮细胞特性.分别加雷帕霉素、理阿诺碱、理阿诺碱预处理1h再加雷帕霉素,与EOCs作用24h,CCK8检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,并在倒置显微镜下检测细胞的黏附能力.结果 雷帕霉素抑制EOCs的增殖、迁移、黏附能力（P＜0.05）.理阿诺碱预处理1h能改善雷帕霉素对EOCs的增殖、迁移、黏附的抑制作用（P＜0.05）,理阿诺碱单独作用对EOCs的增殖、迁移、黏附无影响（P ＞0.05）.结论 雷帕霉素抑制EOCs的增殖、迁移、黏附能力 理阿诺碱可以改善雷帕霉素诱导的对体外培养的EOCs增殖、迁移、黏附的抑制作用.     

PKC同工酶及其对NO产量的影响

蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一类Ca2+、磷脂依赖性的蛋白激酶,在跨膜信号传递过程中起着重要作用.PKC通过催化多种蛋白质上Ser/Thr磷酸化,调节多种细胞的代谢、生长、增殖和分化.日本学者Nishizuka于1977年最先报道了依赖Ca2/磷脂(PL)的蛋白激酶(简称PKC)[1],PKC是由一系列丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶组成的家族,目前至少发现了有12个同工酶.各种同工酶在结构、生化特性、组织分布、亚细胞定位和底物特异性上存在差异.其活性改变影响着NO产生.     

一体化护理对慢阻肺病人应用无创通气治疗效果研究

目的:通过对慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭患者实施无创机械通气效果与护理方法的相关性研究,探讨有效的护理模式。方法:对30例慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭的住院患者,应用无创呼吸机(BIPAP)辅助通气,通过组建管理小组,制定无创机械通气操作流程、护理质量标准、健康教育规范和流程,并对护士进行专业知识培训等,对患者在戴机前、戴机时进行认知、情志、行为干预及管理小组对护理质量进行全程控制的一体化护理措施,并进行治疗前后临床指标比较。结果:戴机成功与一体化护理措施有统计学意义。结论:在无创机械通气中,恰当的护理模式对治疗效果有非常重要的意义。建立具有中医特色和优势的一体化护理模式是提高患者无创通气的依从性及戴机成功的重要因素。     

ADMA对内皮生长晕细胞凋亡及其相关p38丝裂素活化蛋白激酶表达的影响

目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOCs)凋亡和黏附能力的影响以及凋亡相关p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的变化。方法:分离脐血中单个核细胞并原代培养扩增内皮生长晕细胞,免疫细胞化学染色和荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。将浓度为0、1、5、10、30μmol/L ADMA与内皮生长晕细胞作用48 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率,DAPI染色及AnnexinV/PI双染观察凋亡细胞核形态变化。在倒置显微镜下观察计数重黏附细胞数来测定细胞黏附能力。用特异性的phospho-p38MAPK抗体的W esternb lotting检测p38MAPK的活性。结果:采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性。ADMA(1-30μmol/L)诱导内皮生长晕细胞的凋亡(P0.01),同时ADMA(5-30μmol/L)使phospho-p38MAPK蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性。ADMA作用组和对照组相比,激光共聚焦显微镜下可见更显著的细胞凋亡形态学改变。除1μmol/L ADMA外,5、10、30μmol/L ADMA均可抑制内皮生长晕细胞的黏附能力。结论:ADMA能诱导内皮生长晕细胞发生凋亡并抑制其黏附能力,ADMA诱导内皮生长晕细胞发生凋亡可能与p38 MAPK磷酸化水平上升有关。     

雷帕霉素对血管内皮细胞凋亡及增殖、迁移、成血管能力的影响

目的:探讨雷帕霉素(rapamicin)对内皮细胞凋亡及增殖、迁移、成血管能力的影响.方法:培养脐静脉内皮细胞并分组,将浓度为0、1、10、100 ng/mL的rapamycin与内皮细胞作用24 h,DAPI染色观察凋亡细胞核形态变化.CCK8法检测内皮细胞的增殖能力,transwell小室检测迁移能力,并在倒置显微镜下检测细胞的成血管能力.结果:10、100 ng/mL rapamycin能明显抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01).同时rapamycin (1 ～100 ng/mL)能抑制内皮细胞的迁移能力(P<0.01).rapamycin处理组和对照组相比,DAPI染色可见更显著的细胞凋亡形态学改变.100 ng/mL rapamycin作用组与对照组相比,能明显降低细胞成血管能力(P<0.01).结论:rapamycin可以诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖、迁移和成血管能力.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体参与雷帕霉素诱导血管内皮细胞功能损伤的体外研究

目的: 探讨雷帕霉素对内皮细胞凋亡和增殖、迁移能力的影响,以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的变化。方法: 用浓度为0、1、10、100 μg/L 的雷帕霉素孵育内皮细胞24 h,应用CCK8法检测血管内皮细胞的增殖能力,Transwell小室和划痕试验检测细胞迁移能力,DAPI染色观察凋亡细胞核形态改变,Western blotting法检测caspase-3活性以显示血管内皮细胞的凋亡,并用 Western blotting检测TRAIL在凋亡的内皮细胞中的表达。结果: 雷帕霉素(1-100 μg/L)能诱导血管内皮细胞凋亡并抑制其迁移能力(P<0.01)。除雷帕霉素1 μg/L外, 10 μg/L和100 μg/L雷帕霉素均能抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01),同时雷帕霉素(10-100 μg/L)使TRAIL蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性(P<0.01)。结论: 雷帕霉素能诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖和迁移能力。TRAIL表达上调与雷帕霉素诱导血管内皮细胞损伤有一定的相关性。     

一体化护理对慢阻肺病人应用无创通气治疗效果研究

摘要目的：通过对慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭患者实施无创机械通气效果与护理方法的相关性研究,探讨有效的护理模式。方法：对30例慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭的住院患者,应用无创呼吸机（BIPAP）辅助通气,通过组建管理小组。制定无创机械通气操作流程、护理质量标准、健康教育规范和流程,并对护士进行专业知识培训等,对患者在戴机前、戴机时进行认知、情志、行为干预及管理小组对护理质量进行全程控制的一体化护理措施,并进行治疗前后临床指标比较。结果：戴机成功与一体化护理措施有统计学意义。结论：在无创机械通气中,恰当的护理模式对治疗效果有非常重要的意义。建立具有中医特色和优势的一体化护理模式是提高患者无创通气的依从性及戴机成功的重要因素。     

基于自绘图解法的实训教学对12导联心电图判读的应用效果

目的　探讨基于自绘图解法的实训教学对12导联心电图（electrocardiogram,ECG）判读的教学效果。方法　选择山东医学高等专科学校2018级临床医学专业10个教学班489名学生作为研究对象,分为对照组与实验组。对照组采用理论讲授+传统实训教学,实验组采用理论讲授+自绘图解法实训教学。比较两组学生ECG专项测试成绩、考核优秀人数及期末考试ECG部分成绩。发放调查问卷,评估不同教学方式对学生的影响。采用SPSS 25.0统计软件进行t检验和卡方检验。结果　与实验组比较,对照组的ECG专项测试成绩、优秀人数及期末考试ECG部分成绩均降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。调查问卷结果显示实验组在对ECG异常图形掌握程度、学习主动性及自信心方面均较高,对ECG整体教学的满意度也较好（P＜0.01）。结论　基于自绘图解法的实训教学能够提高ECG的判读技能,使学生的学习主动性及自信心得到提高,获得了较好的教学效果。