再次肝移植8例临床分析

目的总结再次肝移植的临床经验。方法2002年6月~2005年12月,共施行185例肝移植,其中再次肝移植8例,回顾性分析该8例患者的临床资料。结果本组再移植率4.32%。首次肝移植和再次肝移植前病人终末期肝病模型(MELD)评分平均为15.6分和23.9分;再次肝移植距首次肝移植的时间间隔平均为316 d(78~725 d);再次肝移植原因中胆道并发症3例,慢性排异2例,肝动脉栓塞、急性排异、乙型肝炎复发各1例。8例患者均平稳渡过手术期,前3例病人分别于术后第101、16和28天因严重感染合并多脏器功能衰竭而死亡,后5例病人均康复出院,存活至今达27、12、8、4和3个月。结论再次肝移植是挽救移植肝失功的有效手段。正确掌握手术指征,合理选择手术时机,以及手术技巧的不断完善和围手术期的精心处置,是提高再次肝移植成功的关键。     

再次肝移植8例临床分析

目的总结再次肝移植的临床经验.方法 2002年6月～ 2005年12月,共施行185例肝移植,其中再次肝移植8例,回顾性分析该8例患者的临床资料.结果本组再移植率4.32%.首次肝移植和再次肝移植前病人终末期肝病模型(MELD)评分平均为15.6分和23.9分;再次肝移植距首次肝移植的时间间隔平均为316 d(78 ～ 725 d);再次肝移植原因中胆道并发症3例,慢性排异2例,肝动脉栓塞、急性排异、乙型肝炎复发各1例.8例患者均平稳渡过手术期,前3例病人分别于术后第101、16和28天因严重感染合并多脏器功能衰竭而死亡,后5例病人均康复出院,存活至今达27、12、8、4和3个月.结论再次肝移植是挽救移植肝失功的有效手段.正确掌握手术指征,合理选择手术时机,以及手术技巧的不断完善和围手术期的精心处置,是提高再次肝移植成功的关键.     

S腺苷甲硫氨酸对肝癌细胞急性缺血/缺氧过程中的生物学作用

目的：研究S腺苷甲硫氨酸（SAMe）在急性缺血/缺氧过程中对肝癌细胞HepG2的生物学作用,并通过检测自噬的变化探讨其可能机制。方法：real time-PCR检测自噬特异性基因（Beclin 1）表达的变化;吖啶橙染色后,采用荧光显微镜定性观察自噬;CCK-8法检测HepG2细胞的成活率;用AnnexinⅤ/PI流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果：SAMe可诱导HepG2细胞的自噬,在单纯缺血和缺血/缺氧处理因素下,HepG2自噬在荧光强度和Beclin 1基因水平分别比空白对照组增强约3.2倍和3.5倍。细胞成活率分别比空白对照组增加了约20%和30%。SAMe对HepG2细胞具有显著的抑制作用,这种抑制作用在缺血/缺氧环境中更加明显,SAMe单独处理组和SAMe预处理结合缺血/缺氧组,其细胞成活率与空白对照组相比分别下降了约30%和70%。随着细胞成活率下降,细胞凋亡比例相应增加,与空白对照组相比,细胞经SAMe处理后凋亡比例增加约18%;细胞经SAMe预处理后再予以缺血/缺氧,凋亡比例增加约30%。结论：在SAMe抑制HepG2细胞生长过程中,自噬起着重要作用。     

高细胞亚型甲状腺乳头状癌的侵袭性组织病理学特征研究

目的：探索研究高细胞亚型(tall cell variant, TCV)甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)的侵袭性组织病理学特征。方法：回顾性分析2018年1月至2023年5月上海交通大学医学院附属瑞金医院19 170例PTC病例,分析比较TCV-PTC组和经典型PTC(classic PTC, cPTC)组的临床病理学特征。结果：病理结果显示TCVPTC组1 380例,cPTC组15 578例。TCV-PTC在病人年龄以及肿瘤腺外侵犯、神经侵犯、脉管侵犯、癌灶最大径、多灶癌、中央区和颈侧区淋巴结转移和BRAF基因突变比例和（或）均值均较高,但合并桥本甲状腺炎的比例少于cPTC,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：TCV-PTC与cPTC相比,局部侵袭性特征较强和淋巴结转移率较高,该病理类型的判定为后续更积极的临床治疗选择提供依据。     

let-7a调控自噬对缺氧状态下原发性肝癌HCCLM3细胞增殖的影响*

目的 探讨let-7a调控自噬对缺氧状态下原发性肝癌HCCLM3细胞增殖的影响。方法 将HCCLM3细胞分为常氧组、缺氧组和缺氧let-7a组,分别给予不同的处理。各组设6个平行孔,培养72 h。采用吖啶橙染液法测定HCCLM3细胞自噬率,采用MTT法检测HCCLM3细胞活力,使用流式细胞仪分析HCCLM3细胞周期G1,采用酶联免疫吸附法测定培养上清let-7a、细胞周期D1蛋白（cyc D1）和血管内皮生长因子（VEGF）水平。结果 缺氧let-7a组细胞存活率为（49.7±9.5）%,显著低于常氧组或缺氧组的（100.0±0.0）%或（119.1±13.1）%（P<0.05）,缺氧组细胞存活率显著高于常氧组（P<0.05）;缺氧let-7a组细胞周期G1期和细胞自噬率分别为（89.6±16.1）%和（49.3±7.4）%,显著高于常氧组或缺氧组的（56.3±11.0）%和（13.2±8.1）%或（69.7±14.1）%和（23.5±5.5）%（P<0.05）,缺氧组细胞周期G1期和自噬率显著高于常氧组（P<0.05）;缺氧let-7a组细胞let-7a蛋白水平为（96.1±9.3） μmol/L,显著高于常氧组或缺氧组的（33.4±7.1）μmol/L或（65.3±5.2）μmol/L（P<0.05）,cyc D1和VEGF水平分别为（72.3±8.8）μmol/L和（56.3±6.3）μmol/L,显著低于常氧组或缺氧组的（124.1±7.2）μmol/L和（114.1±5.2） μmol/L或（98.2±6.7） μmol/L和（85.2±8.1）μmol/L（P<0.05）,缺氧组let-7a蛋白显著低于常氧组（P<0.05）,cyc D1和VEGF显著高于常氧组（P<0.05）。结论 上调let-7a在肝癌HCCLM3细胞的表达能诱发细胞自噬,使得细胞在G1期往S期的分化过程发生障碍,抑制细胞在缺氧环境中的增殖,其机制可能与细胞CYC D1和VEGF表达下调有关。     

FGFR3在大鼠肝硬化模型中的动态表达研究

目的：观察大鼠肝硬化形成过程中成纤维细胞生长因子受体3（Fibroblast growth factor receptor3,FGFR3）的表达变化。方法：70只雄性SD大鼠,随机取10只作为对照组,其余60只作为肝硬化组。采用剂量频次渐变式四氯化碳（CCL）腹腔内注射建立肝硬化大鼠模型。检测2组大鼠的血清ALT、体重、肝体比,病理组织行包括HE和嗜银染色．并采用荧光定量聚合酶链反应（real—timePCR）和蛋白质印迹（Western blot）检测FGFR3基因和相应蛋白在肝硬化形成过程中的表达变化。结果：肝硬化组大鼠的血清ALT、肝体比和死亡率均显著高于对照组（P均〈0．01）;而体重则显著低于对照组（P〈0．01）;肝硬化组大鼠肝组织大体观察、HE染色及嗜银染色均呈明显肝硬化表现,而对照组则无该表现：real-timePCR及Western-blot结果显示,FGFR3在肝硬化形成过程中总体表达逐渐增强。结论：剂量频次渐变式GEl4腹腔内注射法是一种高效、低成本的大鼠肝硬化建模方法。而肝组织FGFR3在肝硬化发生、发展过程中的动态表达在一定程度上反映了肝纤维化及肝硬化程度。     

急性缺血缺氧诱导肝癌细胞自噬及其相关机制

目的:研究急性缺血/缺氧时肝癌细胞HepG2增殖率及自噬的变化,探讨自噬的作用及机制。方法 :以Western印迹法检测缺氧诱导因子-1(hypoxia induced factor-1,HIF-1)表达并确定体外模拟模型的可靠性;吖啶橙染色后采用荧光显微镜定性观察自噬;以自噬特异性蛋白LC3及P62(P62/SQSTM1)信号蛋白的变化表明自噬的诱导和可能的调控机制;以CCK8检测3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬前后急性缺血/缺氧下HepG2细胞的增殖率变化。结果:急性缺血/缺氧2 h后,HepG2细胞显著表达HIF-1α蛋白,表明体外急性缺血/缺氧模型的可靠性。急性缺血/缺氧可快速诱导肝癌细胞HepG2产生自噬,继而出现HepG2细胞显著增殖活跃;3-MA抑制自噬后,可特异性抑制急性缺血/缺氧所诱导的HepG2细胞增殖;急性缺血/缺氧条件下HepG2细胞P62信号蛋白表达显著下调,自噬抑制后逐渐恢复正常表达水平。结论:自噬在肝癌体外急性缺血/缺氧过程中对肿瘤起到保护作用,其机制可能与P62蛋白的清除有关;抑制自噬可显著降低肝癌细胞增殖率。自噬可能成为肝癌治疗的新靶点。     

GADD45β基因表达诱导对不同p53状态的肝癌细胞作用

目的：体外合成GADD45β基因全序列表达质粒后，研究GADD45β基因表达诱导对呈不同p53状态的肝癌细胞的作用及可能机制。方法：采用RT-PCR法获得GADD45β基因全序列，插入pDrive穿梭克隆载体和pIRES2-EGFP荧光表达载体后大量扩增获得DNA，结合p53全基因表达质粒pp53-EGFP转染HepG2、Hep3B细胞后，以[^3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(^3H—Tdr)和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力；以双抗体夹心ELISA法测定TGF-β1表达变化。结果：成功合成GADD45β基因全序列和表达质粒，通过流式细胞仪收集转染阳性的荧光表达细胞能显著提高转染效率；转染GADD45β后．具有野生型p53基因的HepG2细胞的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制，细胞凋亡明显增加，TGF-β1的表达亦明显受抑。与之相反，缺失p53基因的Hep3B需要同时共转染p53基因后，方出现抑制效应。结论：GADD45β基因能够有效抑制肝癌细胞的生长．其功能需要完整p53基因的辅助和(或)调控。GADD45表达和（或)功能异常，导致p53介导的DNA损伤修复途径异常或阻断，是肝脏细胞恶性转化及形成肿瘤的可能机制。     

糖尿病伴高血压咋选降压药

我国糖尿病人群中高血压的患病率大约为40％～55％,糖尿病伴高血压患者被无形之中置于双倍危险的境地——糖尿病伴高血压患者发生视网膜病变、脑血管病变、冠心病、心功能不全和肾动脉硬化的比例明显提高,心血管事件的危险性甚至增加了4倍。因此糖尿病患者控制血压显得尤为重要。