荧光标记大鼠全角膜新生血管和淋巴管的方法研究

目的探讨标记大鼠全角膜新生血管和淋巴管的方法。方法应用心脏灌注荧光联合全角膜免疫荧光法．共焦显微镜下区分并标记全角膜的新生血管和淋巴管。结果适度的抗体浓度和灌注时间下可标记出全角膜新生血管和淋巴管。血管呈黄绿色，淋巴管呈红色。结论心脏灌注荧光联合全角膜免疫荧光法可用于标记大鼠全角膜新生血管和淋巴管。     

角膜移植后角膜新生淋巴管与新生血管间的关联

目的:研究角膜移植后角膜新生淋巴管与新生血管间关联。方法:人角膜取自行二次角膜移植的19名患者。5核苷酸酶-碱性磷酸酶(5-nase-Alkaline phosphatase,5-NA-ALP)双重酶组织化学染色及淋巴内皮细胞受体(lymphatic vessel endothelial receptor,LYVE-1)、内皮细胞黏附因子-1(platelet endothelial cell adhesion modecule-1,PECAM-1)双重免疫组化法标记角膜中的新生血管和淋巴管,并进行淋巴管计数(lymphatic vessels counting,LVC)和血管计数(blood vessels counting,BVC),比较BVC与LVC之间的关联。结果:角膜中存在角膜新生血管12例(63%),存在角膜新生淋巴管5例(26%)。角膜新生淋巴管仅出现在血管化角膜中。角膜移植后BVC与LVC间呈显著性正相关(r=0.725;P<0.01)。结论:人角膜移植后角膜新生淋巴管与新生血管之间存在密切关联。     

高危角膜移植后免疫排斥反应与颈淋巴结切除****☆

背景：颈淋巴结是角膜的引流区淋巴结。角膜移植后，抗原提呈细胞随着房水经由脉络膜巩膜外途径引流至颈淋巴结而诱发角膜免疫排斥反应。 目的:观察在碱烧伤的角膜植床上行角膜移植后的免疫排斥反应现象，认识颈淋巴结切除抑制角膜移植后免疫排斥的效应。 设计：随机对照动物实验。 单位：中山大学中山眼科中心。 材料：实验于2005-05/2007-02在中山大学中山眼科中心完成（眼科学国家重点试验室。实验室编号2006DA105054）。选用SD大鼠104只, Wistar大鼠40只,均为雄性，鼠龄1~2个月，均由中山大学实验动物中心提供。实验所用的白细胞介素2 和干扰素γ ELISA试剂盒由美国Biource International公司提供。实验过程对动物的处置符合在眼科研究使用动物的ARVO声明。 方法:以SD鼠为受体，Wistar鼠为供体，所有受体大鼠均行同种异体角膜移植。受体鼠被随机分为4组：正常对照组:行正常角膜移植；B组为颈淋巴结切除组：正常大鼠切除双侧颈淋巴结；碱烧伤后角膜移植组：角膜碱烧伤后21 d时行角膜移植；碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组：角膜碱烧伤后立即行双侧颈淋巴结切除，21 d后再行角膜移植；每组20只。应用ELISA法检测角膜移植后各组植片中干扰素γ、白细胞介素-2蛋白的表达，记录角膜排斥反应发生的时间并比较各组植片平均存活时间。其余24只受体鼠用于在裂隙灯下及组织切片后显微镜下观察碱烧伤后角膜炎症及新生血管的动态变化。 结果: ①病理组织学：正常角膜无炎症及新生血管。碱烧伤后3天时，角膜基质中存在着大量的炎症细胞浸润。3周末时无明显的炎症征象，但角膜新生血管达到高峰。碱烧伤后8周时，角膜新生血管已完全消退。②植片平均存活时间: 正常对照组、颈淋巴结切除组、碱烧伤后角膜移植组、碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组分别为（10.40±1.14），（46.30±9.46），（7.00±1.58）和（15.00±3.39）d；颈淋巴结切除组较正常对照组明显延长(P < 0.05)，而碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组较碱烧伤后角膜移植组明显延长,差异具有显著性意义 (P < 0.05)。③移植后角膜中干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达：角膜移植后颈淋巴结切除组植片中无干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达。在角膜移植后3，7，10，14 d，碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组干扰素γ和白细胞介素-2的表达均明显下降，与碱烧伤后角膜移植组比较，差异有显著性意义（P < 0.05）。 结论:颈淋巴结切除能有效抑制正常及碱烧伤后角膜移植术后的免疫排斥反应。     

高危角膜移植后免疫排斥反应与颈淋巴结切除

背景:颈淋巴结是角膜的引流区淋巴结.角膜移植后,抗原提呈细胞随着房水经由脉络膜巩膜外途径引流至颈淋巴结而诱发角膜免疫排斥反应.目的:观察在碱烧伤的角膜植床上行角膜移植后的免疫排斥反应现象,认识颈淋巴结切除抑制角膜移植后免疫排斥的效应.设计:随机对照动物实验.单位:中山大学中山眼科中心.材料:实验于2005-05/2007-02在中山大学中山眼科中心完成(眼科学国家重点试验室.实验室编号2006DA105054).选用SD大鼠104只, Wistar大鼠40只,均为雄性,鼠龄1～2个月,均由中山大学实验动物中心提供.实验所用的白细胞介素2 和干扰素γ ELISA试剂盒由美国Biource International公司提供.实验过程对动物的处置符合在眼科研究使用动物的ARVO声明.方法:以SD鼠为受体,Wistar鼠为供体,所有受体大鼠均行同种异体角膜移植.受体鼠被随机分为4组:正常对照组:行正常角膜移植;B组为颈淋巴结切除组:正常大鼠切除双侧颈淋巴结;碱烧伤后角膜移植组:角膜碱烧伤后21 d时行角膜移植;碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组:角膜碱烧伤后立即行双侧颈淋巴结切除,21 d后再行角膜移植;每组20只.应用ELISA法检测角膜移植后各组植片中干扰素γ、白细胞介素-2蛋白的表达,记录角膜排斥反应发生的时间并比较各组植片平均存活时间.其余24只受体鼠用于在裂隙灯下及组织切片后显微镜下观察碱烧伤后角膜炎症及新生血管的动态变化.结果: ①病理组织学:正常角膜无炎症及新生血管.碱烧伤后3天时,角膜基质中存在着大量的炎症细胞浸润.3周末时无明显的炎症征象,但角膜新生血管达到高峰.碱烧伤后8周时,角膜新生血管已完全消退.②植片平均存活时间: 正常对照组、颈淋巴结切除组、碱烧伤后角膜移植组、碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组分别为(10.40±1.14),(46.30±9.46),(7.00±1.58)和(15.00±3.39)d;颈淋巴结切除组较正常对照组明显延长(P < 0.05),而碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组较碱烧伤后角膜移植组明显延长,差异具有显著性意义 (P < 0.05).③移植后角膜中干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达:角膜移植后颈淋巴结切除组植片中无干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达.在角膜移植后3,7,10,14 d,碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组干扰素γ和白细胞介素-2的表达均明显下降,与碱烧伤后角膜移植组比较,差异有显著性意义(P < 0.05).结论:颈淋巴结切除能有效抑制正常及碱烧伤后角膜移植术后的免疫排斥反应.     

髂腰肌拉伸疗法对腰椎间盘突出症患者腰椎曲度改变的研究

目的 研究髂腰肌拉伸疗法对腰椎间盘突出症患者腰椎曲度改变的影响。方法 选取我院2015年2月—2018年4月收治的腰椎间盘突出患者210例开展研究,随机分为研究组和对照组各105例,对照组患者接受低周波治疗,研究组患者接受低周波治疗+髂腰肌拉伸疗法,对比2组治疗效果。结果 研究组治疗后3个月的腰椎曲度改善程度优于对照组,差异显著（P<0.05）;研究组的治疗总有效率高于对照组,差异显著（P<0.05）;研究组复发率明显低于对照组,差异显著（P<0.05）;研究组的JOA评分、VAS评分均优于对照组,差异显著（P<0.05）。结论 对腰椎间盘突出症患者实施髂腰肌拉伸疗法,能显著改善腰椎曲度,缓解疼痛,降低复发率,值得推广。     

建立可定量的视网膜新生血管小鼠模型的探索

目的:建立可对视网膜新生血管进行定量研究的动物模型,为研究视网膜新生血管发生机制及治疗提供实验基础。方法:将32只7d龄C57BL/6J幼新生鼠在浓度为(75±2)%的高氧状态下生活5d,然后回到正常氧环境下,作为氧诱导模型组;另32只同日龄新生鼠置于正常空气环境中生活,作为正常对照组。采用荧光素血管灌注法视网膜铺片及作视网膜冰冻切片GSA(griffoniasimplicifolialectinB4)染色,了解视网膜血管的改变,定量计算新生鼠视网膜新生血管面积。结果:实验组新生鼠的视网膜血管在高氧中生长5d后,视网膜血管收缩、闭塞,出现大片无灌注区;回到正常空气环境下2d后,开始出现新生血管;回到空气中5d后,新生血管达到高峰。结论:该动物模型可重复性高,并可进行定量研究,是进行视网膜新生血管发生机制和药物治疗的合适模型。