雌激素和来曲唑对鸡胚额骨成骨细胞影响的差异比较

背景：雌激素对哺乳动物成骨细胞影响研究较多,但其对禽类成骨细胞的影响还未见报道;来曲唑对骨代谢的不良反应报道较多,但其对成骨细胞的影响还未见报道。 目的：实验创新性为通过观察雌激素、来曲唑对体外培养鸡胚成骨细胞增殖、周期及雌激素受体mRNA 表达和碱性磷酸酶活性的影响,以阐明蛋鸡髓质骨的代谢机制。 方法：取15日龄SPF鸡胚,酶消化法获取鸡胚额骨成骨细胞,分别采用不同质量浓度雌激素(0,5,10,20,100,200,400,800,2 000,20 000 ng/L)和来曲唑(0,5,10,25,50,100,250,500,1 000,5 000 μg /L)处理。以四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖率,以pNPP法测定碱性磷酸酶活性,以流式细胞术测定细胞周期情况,以用实时荧光定量PCR法测定雌激素受体mRNA的表达。 结果与结论：雌激素可促进鸡胚成骨细胞增殖,且具有浓度和时间依赖性,雌激素能诱导成骨细胞雌激素受体mRNA表达,推动细胞周期进程,提高鸡胚成骨细胞碱性磷酸酶活性。来曲唑可促进成骨细胞增殖,推动细胞周期进程,抑制成骨细胞雌激素受体mRNA表达,但来曲唑对碱性磷酸酶的合成与分泌没有明显影响。     

破骨样细胞的诱导培养及其机制

目的:破骨样细胞是指体外诱导培养的破骨细胞,具有破骨细胞的特征,产生的数量较大,基本能够代替原始破骨细胞应用于研究。主要介绍了破骨细胞分化因子、巨噬细胞集落刺激因子、1,25-羟胆钙化醇、白细胞介素6等诱导培养破骨样细胞和其诱导机制的研究进展。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1990-01/2005-12有关破骨样细胞诱导培养及机制等相关文章,检索词“osteoclasts,ODF,M-CSF,1,25-DihydroxyvitaminD3,IL-6”,限定文章语言种类为English;同时计算机检索中国期刊全文数据库1994-01/2005-04期间的相关文章,检索词“破骨样细胞,破骨细胞”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审。纳入标准:①有关破骨样细胞培养方法的研究。②有关破骨样细胞诱导机制的研究。排除标准:重复研究。资料提炼:共收集到119篇文章,排除重复或类似研究,26篇符合要求被选为参考文献。资料综合:①破骨样细胞的诱导培养:破骨样细胞的细胞来源广泛,诱导剂也不同。②破骨样细胞的诱导机制:破骨细胞分化因子,巨噬细胞集落刺激因子,1,25-羟胆钙化醇,白细胞介素6等各种细胞因子具有其各自的诱导机制,但相互联系,形成复杂的网络结构,最终通过OPG/RANKL/RANK系统发挥作用。结论:破骨样细胞的诱导培养已逐渐成熟,其具体机制得到初步揭示。破骨细胞分化因子、巨噬细胞集落刺激因子、1,25-羟胆钙化醇、白细胞介素6等各种细胞因子虽然最终通过OPG/RANKL/RANK系统来促进破骨细胞的分化,但各因子间复杂的网络作用仍然需要进一步研究。     

雌激素和来曲唑对鸡胚额骨成骨细胞影响的差异比较

背景:雌激素对哺乳动物成骨细胞影响研究较多,但其对禽类成骨细胞的影响还未见报道;来曲唑对骨代谢的不良反应报道较多,但其对成骨细胞的影响还未见报道.目的:实验创新性为通过观察雌激素、来曲唑对体外培养鸡胚成骨细胞增殖、周期及雌激素受体mRNA表达和碱性磷酸酶活性的影响,以阐明蛋鸡髓质骨的代谢机制.方法:取15日龄SPF鸡胚,酶消化法获取鸡胚额骨成骨细胞,分别采用不同质量浓度雌激素(0,5,10,20,100,200,400,800,2 000,20 000 ng/L)和来曲唑(0,5,10,25,50,100,250,500,1 000,5 000 μg/L)处理.以四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖率,以pNPP法测定碱性磷酸酶活性,以流式细胞术测定细胞周期情况,以用实时荧光定量PCR法测定雌激素受体mRNA的表达.结果与结论:雌激素可促进鸡胚成骨细胞增殖,且具有浓度和时间依赖性,雌激素能诱导成骨细胞雌激素受体mRNA表达,推动细胞周期进程,提高鸡胚成骨细胞碱性磷酸酶活性.来曲唑可促进成骨细胞增殖,推动细胞周期进程,抑制成骨细胞雌激素受体mRNA表达,但来曲唑对碱性磷酸酶的合成与分泌没有明显影响.     

破骨样细胞的诱导培养及其机制

目的：破骨样细胞是指体外诱导培养的破骨细胞，具有破骨细胞的特征，产生的数量较大，基本能够代替原始破骨细胞应用于研究。主要介绍了破骨细胞分化因子、巨噬细胞集落刺激因子、1，25-羟胆钙化醇、白细胞介素6等诱导培养破骨样细胞和其诱导机制的研究进展。资料来源：应用计算机检索Pubmed数据库1990-01／2005-12有关破骨样细胞诱导培养及机制等相关文章，检索词“osteoclasts，ODF，M-CSF，1，25-DihydroxyvitaminD3，IL-6”，限定文章语言种类为English；同时计算机检索中国期刊全文数据库1994-01／2005—04期间的相关文章，检索词“破骨样细胞，破骨细胞”，限定文章语言种类为中文。资料选择：对资料进行初审。纳入标准：①有关破骨样细胞培养方法的研究。②有关破骨样细胞诱导机制的研究。排除标准：重复研究。资料提炼：共收集到119篇文章，排除重复或类似研究，26篇符合要求被选为参考文献。资料综合：①破骨样细胞的诱导培养：破骨样细胞的细胞来源广泛，诱导剂也不同。（砻破骨样细胞的诱导机制：破骨细胞分化因子，巨噬细胞集落刺激因子，1，25-羟胆钙化醇，白细胞介素6等各种细胞因子具有其各自的诱导机制，但相互联系，形成复杂的网络结构，最终通过OPG／RANKL／RANK系统发挥作用。结论：破骨样细胞的诱导培养已逐渐成熟，其具体机制得到初步揭示。破骨细胞分化因子、巨噬细胞集落刺激因子、1，25-羟胆钙化醇、白细胞介素6等各种细胞因子虽然最终通过OPG／RANKL／RANK系统来促进破骨细胞的分化，但各因子间复杂的网络作用仍然需要进一步研究。     

17 β-雌二醇对青年期ISA蛋鸡骨代谢的影响

背景：青年期蛋鸡在性成熟前形成髓质骨，体内雌激素水平的升高对骨代谢有直接的影响。目的：观察外源性17β-雌二醇对青年期ISA蛋鸡骨代谢的影响。设计、时间及地点：随机分组设计、动物对照观察，于2007-10／2008-02在南京农业大学动物医学院畜禽骨骼生物学实验室完成。材料：92日龄青年期ISA蛋鸡180羽。17β-雌二醇由美国Cayman公司提供，玉米油为国产分析纯。方法：180羽蛋鸡按随机数字表法分成3组，空白对照组、溶剂对照组、雌激素组，每组60羽。空白对照组蛋鸡，不做任何处理；溶剂对照组为每天肌肉注射玉米油1mL，雌激素组为每天肌肉注射2g/L 17β-雌二醇玉米油溶液1mL。两组均注射20d。主要观察指标：于实验第0，5，10，15，20天，每组取12只鸡翼静脉采血5mL，用半自动生化分析仪测定血Ca、P和碱性磷酸酶活性。分光光度计测定抗酒石酸酸性磷酸酶活性。采用放射免疫法，运用智能放射免疫γ测量仪测定血浆雌二醇与睾酮。每个时间点取血后，麻醉后处死，取股骨中段样本，厚度为41nm，置于扫描仪上直接扫描后，运用Image J图像处理系统分析扫描图像，计算皮质骨厚度、皮质骨面积和皮质骨面积比例、皮质骨骨内径、皮质骨骨外径。结果：从实验第5天开始，雌激素组雌二醇显著高于空白对照组和溶剂对照组，睾酮水平显著低于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）。实验第10，15，20天雌激素组碱性磷酸酶活性显著高于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）。实验第15，20天雌激素组血钙、血磷水平显著高于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）。实验第15，20天雌激素组抗酒石酸酸性磷酸酶活性显著低于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）。空白对照组和溶剂对照组之间差异无显著性意义（P〉0．05）。雌激素组皮质骨厚度、皮质骨面积、皮质骨面积比例、骨内径及骨外径与空白对照组和溶剂对照组比较，差异均无显著性意义（P〉0．05）。结论：外源性雌激素能够促进青年期蛋鸡骨形成，抑制骨吸收，促进骨骼发育。     

17β-雌二醇对青年期ISA蛋鸡骨代谢的影响*☆

背景：青年期蛋鸡在性成熟前形成髓质骨，体内雌激素水平的升高对骨代谢有直接的影响。 目的：观察外源性17β-雌二醇对青年期ISA蛋鸡骨代谢的影响。 设计、时间及地点：随机分组设计、动物对照观察，于2007-10/2008-02在南京农业大学动物医学院畜禽骨骼生物学实验室完成。 材料：92日龄青年期ISA蛋鸡180羽。17β-雌二醇由美国Cayman公司提供，玉米油为国产分析纯。 方法：180羽蛋鸡按随机数字表法分成3组，空白对照组、溶剂对照组、雌激素组，每组60羽。空白对照组蛋鸡，不做任何处理；溶剂对照组为每天肌肉注射玉米油1 mL，雌激素组为每天肌肉注射2 g/L 17β-雌二醇玉米油溶液1 mL。两组均注射20 d。 主要观察指标：于实验第0，5，10，15，20天，每组取12只鸡翼静脉采血5 mL，用半自动生化分析仪测定血Ca、P和碱性磷酸酶活性。分光光度计测定抗酒石酸酸性磷酸酶活性。采用放射免疫法，运用智能放射免疫γ测量仪测定血浆雌二醇与睾酮。每个时间点取血后，麻醉后处死，取股骨中段样本，厚度为4 mm，置于扫描仪上直接扫描后，运用Image J图像处理系统分析扫描图像，计算皮质骨厚度、皮质骨面积和皮质骨面积比例、皮质骨骨内径、皮质骨骨外径。 结果：从实验第5天开始，雌激素组雌二醇显著高于空白对照组和溶剂对照组，睾酮水平显著低于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P < 0.05）。实验第10，15，20天雌激素组碱性磷酸酶活性显著高于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P < 0.05）。实验第15，20天雌激素组血钙、血磷水平显著高于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P < 0.05）。实验第15，20天雌激素组抗酒石酸酸性磷酸酶活性显著低于空白对照组和溶剂对照组，差异有显著性意义（P < 0.05）。空白对照组和溶剂对照组之间差异无显著性意义（P > 0.05）。雌激素组皮质骨厚度、皮质骨面积、皮质骨面积比例、骨内径及骨外径与空白对照组和溶剂对照组比较，差异均无显著性意义（P > 0.05）。 结论：外源性雌激素能够促进青年期蛋鸡骨形成，抑制骨吸收，促进骨骼发育。