多糖对免疫细胞调节作用的新视角 ——对树突状细胞的影响

多糖作为一种免疫调节和促进剂对巨噬细胞、T/B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的功能都有调节作用,树突状细胞(DC)是功能最强大的抗原提呈细胞,多糖对树突状细胞功能的影响近年来也有所报道,主要包括多糖对树突状细胞表面分子的表达、细胞因子分泌、吞噬功能、多糖受体及信号转导途径等方面的调节作用。     

丹参素在Caco-2细胞单层模型中的跨膜转运研究

目的:研究丹参素在Caco-2细胞模型中的跨膜转运机制。方法:通过研究丹参素在模型中的双向转运,考察时间、药物浓度及转运蛋白抑制剂对丹参素吸收的影响。用液相-质谱联用法检测药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:表观渗透系数P_app值随时间延长而增大,到一定时间趋向饱和状态,并随丹参素浓度的增加而逐渐减小。双向转运的P_app比值即P_ratio均大于1.5。在加入P-gp转运蛋白抑制剂维拉帕米后,丹参素P_app,A-B值显著增大,而P_app,B-A值显著降低。结论:丹参素在Caco-2细胞模型中的转运可能主要是由P-gp转运蛋白介导的主动转运。     

100名健康人群CYP2C19基因型检测

CYP2C19又称为S—美芬妥英羟化酶,1993年Wrishton等从人类肝脏分离出来的一种酶,被发现参与十几种药物的代谢。美芬妥英羟化代谢在人群中有遗传的多态性,羟化速度快者为快代谢者(extensive metabolism EM),羟化速度慢者为慢代谢者(poor metabolism PM)。1994年de Morais等先后发现了CYP2Cl9的两个等位基因:CYP2C19ml     

基于三色荧光探针的红花肾保护活性物质筛选研究

该研究采用3种荧光探针FDA,MTR,Hoechst 33342对盐酸阿霉素损伤的HK-2细胞进行标记,通过细胞荧光显微成像平台进行荧光图像采集及分析,建立了一种潜在的肾保护活性物质筛选方法。应用该方法对红花的53个化学组分进行筛选,发现C17,C18,C19 3个组分对盐酸阿霉素损伤的HK-2细胞具有较好的保护作用,运用液相色谱质谱联用（LC-MS）技术对其进行定性分析,初步推测出8个化合物,羟基红花黄色素A,6-羟基山柰酚-3-O-芸香糖-6-O-葡萄糖苷,6-羟基山柰酚-3,6-二-O-葡萄糖苷或6-羟基山柰酚-6,7-二-O-葡萄糖苷,6-羟基山柰酚-3-O-芸香糖苷,6-羟基山柰酚-3-O-葡萄糖苷或6-羟基山柰酚-7-O-葡萄糖苷,芦丁,异槲皮素和山柰酚-3-O-芸香糖苷。与对照品比对后确认其中4个化合物为异槲皮素、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷及羟基红花黄色素A,并对这4个化合物的肾细胞保护作用进行了验证,发现均具有一定的肾细胞保护作用,其中异槲皮素的保护作用最强,且具有良好的量效关系。实验结果提示,异槲皮素、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷及羟基红花黄色素A可能是红花发挥肾保护作用的活性成分。     

虚拟仿真一流课程建设的探索与实践

通过对虚拟仿真一流课程建设要素的剖析和解读,结合国家级虚拟仿真一流课程建设的探索和实践,阐述了虚拟仿真一流课程建设的主要内容、要点和建设成就,为虚拟仿真一流课程的建设提供可借鉴的经验,并对虚拟仿真课程建设的发展方向提出了自己的见解。     

参麦注射液保护氧化损伤心肌细胞线粒体的机制研究

目的: 探究参麦注射液对氧化损伤心肌细胞的保护作用及其对线粒体能量代谢过程的影响。方法: 采用叔丁基过氧化氢（t-BHP）诱导构建H9c2心肌细胞氧化损伤模型。分别采用MTT法和化学发光法检测参麦注射液对细胞存活率和ATP水平的影响;采用Clark氧电极检测参麦注射液对细胞有氧呼吸速率的调节作用;采用ELISA法检测丙酮酸及丙酮酸脱氢酶（PDH）的含量及活性;采用蛋白质印迹法检测丙酮酸脱氢酶亚基（PDHA1）含量;采用实时定量RT-PCR检测丙酮酸脱氢酶激酶1（PDK1）mRNA的表达。结果: 与氧化损伤模型比较,参麦注射液可有效提高心肌细胞存活率和ATP水平（均P < 0.01）,提高细胞氧呼吸速率,减少丙酮酸含量,并提高PDH活性（P < 0.05或P < 0.01）。在分子水平上,参麦注射液可提高PDHA1蛋白表达（P < 0.05）,并具有降低PDK1 mRNA表达的趋势（P>0.05）。结论: 参麦注射液可有效保护氧化损伤心肌细胞,其机制可能与提高PDH活性、减少丙酮酸堆积,从而维持线粒体功能稳定和细胞能量代谢稳定有关。     

巨噬细胞表面的主要模式识别受体研究进展

巨噬细胞表面表达一系列受体分子,这些受体分子基本上都属于模式识别受体。它们能够与相应的病原体相关分子模式结合,介导巨噬细胞识别各种内源和外源抗原分子,是巨噬细胞发挥黏附,吞噬,调理,清除,杀伤和递呈功能,参与机先天性和获得性免疫应答的关键性环节。     

基于声表面波器件的仿生嗅觉受体传感器的研究

嗅觉受体可以与气味分子发生特异性的相互作用,这一机理不仅在生物嗅觉系统分辨和识别气味的过程中发挥着重要作用,而且也为解决传统嗅觉传感器特异性低的问题提供新的途径。从仿生设计角度,利用嗅觉受体对其配体特异性识别的机理,提高嗅觉传感器的特异性。以嗅觉受体作为敏感元件,声表面波器件作为二级传感器,构建一种可用于特异性气味检测的新型嗅觉受体传感器。选择秀丽线虫嗅觉受体ODR-10作为生物识别元件,通过基因工程的方法,将其表达在人乳腺癌细胞MCF-7细胞质膜上,提取含有ODR-10的细胞质膜组分,将其涂覆在声表面波器件的敏感区域。结果表明,ODR-10可以有效地表达于MCF-7的细胞质膜上,用这种异源表达的ODR-10构建的仿生嗅觉传感器对ODR-10的配体丁二酮具有很高的灵敏度,并具有很好的特异性。实验结果证实,这种基于嗅觉受体的仿生嗅觉传感器不仅适用于特异性气味检测,也适用于筛选特异性的嗅觉受体-配体对,将进一步推动嗅觉传导机理研究的进展。     

川楝子中肝毒性成分的快速筛查研究

使用荧光探针FDA标记的HepG2细胞模型及细胞荧光显微图像自动分析法,对川楝子的23个化学组分进行快速筛查,发现5个组分具有明显毒性.对其中的2个组分进行液质联用分析,推测鉴定了10个化学成分,制备并鉴定出其中3个成分的分子结构(meliasenin B,trichilinin D,1-O-tigloy-l-O-debenzoylohchinal).进一步实验研究发现,这3个成分对HepG2细胞呈量-毒关系,提示川楝子中这些成分可能引起肝毒性.     

ELISA方法研究多糖与人干扰素-γ相互作用

目的:建立一种体外研究多糖与干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)相互作用的ELISA方法.方法:在硼氰氢化钠作用下合成肝素-牛血清白蛋白复合物(Heparin-BSA Complex,HBC),Sepharose 4B凝胶过滤系统分离纯化HBC,并用SDS-PAGE鉴定.将HBC(相当于0.5 μg蛋白含量)包被在酶标板上,ELISA方法检测HBC与IFN-γ的相互作用,并探讨游离肝素、低分子量肝素、硫酸软骨素A、硫酸软骨素C和透明质酸,以及卡拉胶等多糖对这种结合的影响.结果:IFN-γ与HBC的结合呈IFN-γ剂量依赖性,2 ng左右达到饱和.游离肝素和低分子量肝素以及其他多糖均不同程度地抑制了IFN-γ与HBC的结合,肝素和低分子肝素的IC50分别为2.4 μg/ml和18.6 μg/ml.结论:IFN-γ与肝素、卡拉胶高亲和力结合,而与硫酸软骨素A、硫酸软骨素C、透明质酸结合力极弱.ELISA是一个简单、灵敏的研究细胞因子与多糖相互作用的方法.