快速检测牛奶中单核细胞增多症李氏菌PCR试剂盒的研制

快速检测牛奶中单核细胞增多症李氏菌的ＰＣＲ试剂盒与分离培养法平行检测６０份牛奶样品，两者的符合率为１００％。实验证明，该试剂盒具有良好的特异性和可重复性，可测出样品中至少２６０ＣＦＵ细菌，并在２４ｈ内取得结果，具有推广应用价值。     

重组猪戊型肝炎病毒ORF2区主要抗原域的原核表达及鉴定

目的：在大肠杆菌中表达猪戊型肝炎病毒ORF2区主要结构蛋白,并对其进行血清学鉴定。方法：通过RT-PCR技术从一份猪粪中扩增并克隆戊型肝炎病毒主要的结构基因片段,将该片段插入pET-32a表达载体,在原核系统中融合表达蛋白,Western blot和间接ELISA方法分析该蛋白的抗原性。结果：SDS-PAGE分析结果表明,获得45kD的目的蛋白,该重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,而不与阴性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。结论：本研究获得了猪戊型肝炎病毒重组抗原,可与HEV阳性血清产生特异性的结合反应,可以作为诊断用的重组蛋白,为研制敏感、特异的HEV诊断试剂盒,行之有效的HEV基因工程疫苗及为HEV感染的预防和临床治疗提供资料。     

萘普生口服混悬液的相对生物利用度研究

萘普生(Naproxen,甲氧萘丙酸)是常用的非甾体消炎镇痛药,主要用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、强直性脊椎炎、各种类型的风湿肌腱炎、肩关节周围炎等[1].萘普生口服混悬液是萘普生新剂型,我们对萘普生口服混悬液和片剂进行了药物动力学及相对生物利用度的研究,为临床合理用药提供药物动力学依据.     

骨关节结核各类标本进行结核分枝杆菌培养与PCR检测的阳性率结果分析

目的 比较骨关节结核病灶中脓液、干酪、肉芽及死骨组织的结核分枝杆菌培养阳性率,及结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960（简称“MGIT 960”）培养、改良罗氏培养基培养、PCR检测的联合阳性率.方法 2011年6月至2012年5月首都医科大学附属北京胸科医院收治的经病理明确诊断为骨关节结核的患者50例,通过手术获取病灶中的脓液（50份）、干酪（42份）、肉芽（48份）及死骨组织标本（43份）,分别进行结核分枝杆菌MGIT 960培养及改良罗氏培养基培养,比较4种组织标本的培养阳性率,计算2种培养方法的联合阳性率;对脓液标本单独通过PCR方法进行了阳性率检测;计算脓液标本3种方法的联合阳性率.结果 4种标本MGIT 960培养的阳性率依次为：死骨组织（41.9％,18/43）＞脓液（40.0％,20/50）＞肉芽（33.3％,16/48）=干酪（33.3 ％,14/42）;4种标本改良罗氏培养阳性率依次为：肉芽（20.8％,10/48）＞脓液（20.0％,10/50）＞死骨组织（16.3 ％,7/43）＞干酪（14.3％,6/42）;脓液的PCR检测阳性率为48.0％（24/50）.MGIT 960和改良罗氏培养2种结核分枝杆菌培养方法的联合阳性率为50.0％（25/50）,而PCR检测、MGIT960和改良罗氏培养3种方法的联合阳性率为68.0（34/50）.结论 骨关节结核患者,应尽可能选择多种标本以提高培养阳性率.MGIT 960培养可以作为首选的细菌学诊断方法,但如果再联合使用改良罗氏培养和PCR扩增技术,能够进一步提高检出阳性率.     

分子杂交法快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的初步评价

目的评价结核分枝杆菌鉴定试剂盒(分子杂交法)进行分枝杆菌菌种初筛的准确性,并探讨如何快速准确地鉴定结核分枝杆菌复合群(MTC)和非结核分枝杆菌(NTM)混合感染标本。方法采用分子杂交法对200株结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。人工制备结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌、结核分枝杆菌和脓肿分枝杆菌、结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌的混合感染模型,评价基因测序法、芯片法和Hain test在检测分枝杆菌混合感染中的准确性。结果以对硝基苯甲酸(PNB)分离鉴定结果为参照,分子杂交法的敏感性和特异性分别为65.12%(65/86)和98.25%(112/114)。对于人工制备的13种不同比例混合的H37Rv和NTM,芯片法和Hain test均可以准确鉴定出混合感染标本中的混合菌种,而基因测序结果表明,H37Rv:偶发分枝杆菌的比例在10%~90%范围内才能区分出混合感染的类型。结论分子杂交法对于结核分枝杆菌诊断有较高的特异性,一旦经该法鉴定为NTM,则具有很高的诊断意义。明确标本中存在混合感染后可以采用芯片法或Hain test对临床上高致病的分枝杆菌进行菌种水平的鉴定。     

建立计算机数据文件方法(一)键盘输入大量数据

随着计算机的普及运用,有愈来愈多的非计算机专业的用户来到计算机旁,“入门既不难,深造也是办得到的”。由于容易得到各种用计算机高级语言编的应用程序,所以在用计算机解决某个实际问题时,遇到最费事的工作往往是如何把数据(包括各种文字资料)送到计算机的内存或外存中去。在各种高级语言中,都有一些现成语句能达到这一目的,经常在同一语言里又有好几种方法。于是在建立数据文件时,就要考虑以下几个问题: 1.节省数据所占的存储空间; 2.节省数据处理过程所用时间;     

建立计算机数据文件方法(三) 显微光度数据压缩

计算机控制扫描显微镜用于分析生物、医学样品时,有时只关心其化学组成,即只要得到光度值的频数分布就够了。例如,在载玻片上扫描面积为100×100个点,可以在扫描过程中统计出从0到255各光度值的频数;或者先把一次测量的结果暂记于磁盘,然后调回内存并统计成直方图,再记盘保存。以上两种方法都以光度值做为下标变量进行累计。为说明这些方法,我们引入下面一段程序:     

婴儿肥厚型心肌病1例报告

婴儿肥厚型心肌病１例报告成者军区昆明总医院（６５００３２）儿科赵立平，周琴兰，娄新黔成都军区昆明总医院（６５００３２）心功能室孔庆恒，沈景科患儿男，２个月。因慢性咳嗽、喘息及紫绀１个月余入院。系第４胎第２产，足月顺产儿。生后１个月因受凉出现咳嗽、喘息...     

采用DNA指纹图谱技术分析中长跑运动员肠道菌群结构特征

目的:用DNA指纹图谱技术分析中长跑运动员肠道菌群区系结构的特征.方法:对7名中长跑运动员进行连续6天的跟踪观察,直接从其粪便样品中提取出总DNA为模板,进行ERIC-PCR扩增,得到反映肠道微生物菌群结构特征的DNA指纹图.结果:根据图谱多样性指数变化和相似性系数值的分布特征,受试运动员表现出两种类型:一类菌群区系结构稳定,受运动负荷变化影响较小;另一类菌群区系结构随运动负荷的增减出现较大波动.结果表明:运动员DNA指纹图谱特征存在明显个体差异;运动负荷的变化可能改变运动员肠道菌群区系结构.提示稳定的菌群结构可能是运动员在剧烈运动条件下保持良好机能状态的重要因素之一.     

复方胃速康胶囊三联疗法治疗Hp相关性消化性溃疡48例

目的观察复方胃速康胶囊三联疗法治疗Hp相关性消化性溃疡的疗效。方法96例Hp阳性消化性溃疡患者随机分为两组，治疗组采用复方胃速康胶囊、法莫替丁、阿莫西林三联疗法，对照组采用标准三联疗法（奥美拉唑、阿莫西林、甲硝唑）；均治疗4周后评效。结果治疗组总有效率97．92％、根除率85．42％，对照组分别为93．75％及83．33％。结论复方胃速康胶囊三联疗法疗效肯定，副作用明显低于标准三联疗法，患者依从性好。