JAK2V617F突变负荷量对ET患者临床表现和生存影响的研究

目的:观察JAK2V617F突变量对ET(原发性血小板增多症)患者的临床表现及生存影响。方法:病例来源于2013.10-2016.12月在云南省第一人民医院就诊和治疗的ET患者229例,采取患者的骨髓血标本2 ml,肝素抗凝,红细胞裂解液分离单个核细胞,使用DNA抽提试剂盒抽提患者基因组DNA。利用等位基因特异性PCR方法扩增目标DNA,琼脂糖凝胶电泳筛选出120例JAK2V617F突变阳性的标本。再通过实时定量PCR(RT-PCR)检测JAK2V617F突变负荷量,并通过测序方法检测PCR筛选的准确率。结果:伴有血栓形成的ET患者JAK2V617F突变负荷量高于未发生血栓组(23.2%vs 14.2%),(P 0.05);WBC计数升高组( 10×10~9/L)及HGb浓度升高( 150 g/L)患者JAK2V617F突变负荷量高于对照组(P 0.05),17例脾肿大患者JAK2V617F基因突变负荷量高于45例脾脏未肿大组(P 0.05),年龄、性别与JAK2V617F基因突变量之间无相关性(P 0.05)。经单因素分析显示,JAK2V617F突变量对生存率无统计学影响;多因素分析显示,WBC计数、血红蛋白浓度、年龄、性别及脾肿大对生存率无影响(P 0.05)。结论:JAK2V617F突变负荷量影响ET患者的临床表现,JAK2V617F突变负荷量与是否形成血栓相关,性别、年龄与基因突变负荷量无关。     

造血干细胞移植后早期出血并发症的危险因素与预后分析

目的了解造血干细胞移植（HSCT）患者早期出血并发症的状况,分析其危险因素及与生存的关系。方法观察318例HSCT患者的出血状况,按出血程度分为轻、中、重度出血,按出血部位分为皮肤黏膜、消化道、呼吸道、女性阴道、眼、颅内出血及出血性膀胱炎（HC）,选用Logistic回归模型分析各因素与出血的相关性,Cox比例风险模型进行预后分析。结果211例患者在移植后初期发生出血并发症,其中轻度143例（45．O％）,中度59例（18．6％）,重度9例（2．8％）。预处理方案含ATG（OR=3．460）、异基因来源干细胞（OR=1．918）、感染（OR=1．691）、急性移植物抗宿主病（aGVHD）（OR：2．252）、血小板最低值≤15×109／L（OR=2．499）是出血的危险因素,异基因移植（OR=5．431）、aGVHD（OR=5．059）、巨细胞病毒感染（OR：4．241）、多瘤病毒尿（OR=5．723）是HC的危险因素,重度出血（RR=6．106）、出血部位位于颅内（RR=12．131）及呼吸道（RR=9．202）可独立增加移植后死亡风险。结论移植期间血小板减少等多种因素可造成出血风险增加,重度出血、颅内出血及呼吸道出血增加移植后患者死亡风险。     

凝血相关因子与细胞因子在造血干细胞移植早期的临床意义

目的揭示造血干细胞移植（HSCT）早期凝血相关因子及特异性细胞因子的动态改变,探讨其在移植相关性血栓病变及其他并发症中的临床意义。方法采用ELISA法对95例接受HSCT的患者标本进行监测,观察预处理过程以及造血干细胞移植后4周内患者血浆中各种指标的动态改变。根据移植后首先出现的并发症分为4组：平稳组41例、急性移植物抗宿主病（aGVHD）组29例、血栓组6例和感染组19例进行统计分析。结果 HSCT在预处理过程中,纤溶酶原激活剂移植物（PAI-1）水平先升高,移植当周下降,随后又逐步上升;PAI-1和组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）在血栓组有明显的升高（均P〈0.001）,且两者在血栓组和aGVHD组间差异亦有高度统计学意义（均P〈0.01）。蛋白C（PC）水平的降低在aGVHD组有高度统计学意义（P〈0.001）,且在aGVHD与感染组间差异有高度统计学意义（均P〈0.01）。预处理前肿瘤坏死因子（TNF-α）水平在aGVHD组已经较正常升高（P﹤0.01）,其他患者中未见明显改变。在预处理第4天后所有患者都较前明显升高（P﹤0.05）,预处理结束TNF-α较前降低。发生aGVHD、血栓或感染时,TNF-α均明显升高,以aGVHD组升高更为明显,血栓组TNF-α升高水平大于感染组（P﹤0.05）。血栓和aGVHD组的TNF-α在发病前2周即有升高,感染组患者在发病前未见改变。白介素（IL）1-β在移植患者预处理各阶段未见明显变化,发生aGVHD、血栓、感染时IL1-β均有升高,以血栓组升高更明显,aGVHD组较感染组也明显升高（P﹤0.01）。在血栓患者发病前2周明显升高,而aGVHD组于发病前1周升高。结论 （1）血浆PAI-1水平的增高可能是移植相关性血栓病变的特异性指标,提示肝静脉闭塞病（HVDD）、血栓性微血管病（TMA）等血栓并发症的发生。（2）t-PA抗原对aGVHD和血栓有鉴别诊断的意义,PC在aGVHD的早期预测方面有一定的作用。（3）预处理可造成细胞因子TNF-α释放增加。在aGVHD发生时,血清TNF-α水平明显升高且较血栓患者升高更突出;在血栓发生时,血清IL1-β含量明显升高,并高于aGVHD患者。     

三氧化二砷治疗骨髓纤维化一例

患者,男性,63岁,2010年1月因WBC、Plt升高来我院就诊,当时血常规示:WBC22.84×109/L,Hb99g/L,Plt 417×109/L,骨髓形态:骨髓增殖性肿瘤(MPN)可能大,有核细胞增生明显活跃,粒细胞系统占80.5％,其中原始粒细胞1％,早幼粒细胞1％,红细胞系统增生相对低下,仅占5.5％,粒红比14.64∶1,巨核细胞数全片＞100个,可见小核、巨核,血小板大、成堆易见.JAK2突变基因检测阴性,染色体核型分析未见明显异常,融合基因检测:PML-RARa阴性,多重PCR未检测到常见的29种白血病融合基因转录本,血小板聚集功能降低(ADP和Risto诱导最大聚集力分别是35.51％、33.58％).     

组织因子微颗粒的检测及其在出凝血异常中的临床意义

本研究应用流式细胞术(FCM)建立组织因子微颗粒的检测方法,并探讨其在出凝血异常中的临床意义。应用特异性荧光抗体CD142-PE标记组织因子,采用FCM建立组织因子微颗粒的检测方法。测定20例血栓性疾病患者及25例初治急性早幼粒细胞白血病(APL)患者治疗前后的组织因子微颗粒,观察组织因子微颗粒在各组患者中的变化。结果表明,20例血栓性疾病患者组织因子微颗粒〔(123.28±197.03)/μl〕明显高于20例健康对照组〔(33.27±16.14)/μl,P<0.05〕;25例APL患者治疗前组织因子微颗粒为(75.24±104.58)/μl,亦高于正常对照组(P<0.05),经过诱导治疗缓解后组织因子微颗粒水平明显下降至(34.24±25.20)/μl(P<0.01)。在这25例APL患者中,18例合并弥散性血管内凝血(DIC)患者的组织因子微颗粒在治疗前后有明显差异(P<0.05),7例未合并DIC患者治疗前后的组织因子微颗粒水平未见明显变化。结论:采用流式细胞术检测组织因子微颗粒可对血栓性疾病的诊断提供帮助,并对APL的DIC状况与疾病预后做出评估。     

移植和一些临床因素对弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后影响

本研究回顾性分析经正规R-CHOP方案治疗弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者的生存状况,探讨自体造血干细胞移植（auto-HSCT）、病理类型、国际预后指数（IPI）等因素对预后的影响。收集2004-2011年在本院接受R-CHOP21≥6次化疗的DLBCL患者116例。分析单纯化疗及化疗联合自体造血干细胞移植取得的疗效,以及不同免疫病理类型、临床观察指标如IPI、超敏C反应蛋白（HSCRP）、a-羟丁酸脱氨酶（HBDH）等因素对DLBCL患者预后的影响,包括对总体生存率（OS）、无进展生存率（PFS）的系统观察。结果表明,接受R-CHOP21方案治疗的116例DLBCL患者5年OS为72.4%,其中30例患者接受自体造血干细胞移植（Ann Arbor分期均为Ⅲ-Ⅳ期）。30例移植组患者预后较86例单纯化疗组好（5年OS为82.5%vs 69.0%,5年PFS为77.1%vs 68.3%）（P〈0.05）;生发中心（GCB）型组患者预后较活化亚型（ABC）组好（P〈0.05）;IPI 3-5分、年龄≥60岁、B症状、LDH升高、HSCRP升高、HBDH升高是预后不良因素（P〈0.05）,其中LDH升高、年龄≥60岁、B症状是本研究患者的独立危险因素（P〈0.05）。结论：自体造血干细胞移植联合R-CHOP治疗方案能明显改善DLBCL患者的预后,GCB型患者预后优于ABC型,B症状、IPI评分、LDH、HSCRP、HBDH是预后的影响因素。