异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒的检测及临床意义

目的 为了降低异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后巨细胞病毒（CMV）感染的相关死亡率，寻求一种更快捷、更特异的诊断CMV感染的分子生物学方法。方法 2001年4月至2003年4月，从79例接受异基因造血干细胞移植的患者中采集了135份外周血标本。采用巢式聚合酶链反应（nested-PCR）方法检测患者外周血中CMVgB DNA，阳性标本做酶切分型，部分行序列测定。结果CMVgB DNA检测中有42例患者（53．9％）的66份标本（48．9％）阳性；对其中阳性患者的45份标本进行了酶切分型，结果 CMV gB1型21例（46．7％），CMV gB2型14例（31．1％），CMV gB3型7例（15．6％），CMV gB4型3例（6．7％）。先后有2种型别的CMV感染者有3例（3．8％）。经分析，CMV gB阳性和CMV gB阴性患者GVHD的发生率分别为81．0％和32．4％（P＜0.01）；CMV gB1、gB2、gB3以及gB4型Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD及慢性GVHD的发生率分别为：81．0％、50．0％、42．9％和0。结论 Nested-PCR方法可快捷特异地检测CMV感染。CMVgB1、2型中，重度急性GVHD和慢性GVHD发生率较高。CMV gB基因分型检测可有效地指导临床抗病毒治疗，且对移植后患者的临床转归有一定的预测价值。     

基于支持向量机的类风湿关节炎早期诊断模型构建及其效果评价

目的构建基于支持向量机(SVM)的类风湿关节炎(RA)早期诊断模型,并评价其预测效果。方法以240例RA患者和180例其他风湿免疫病患者作为研究对象,测定其血清抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体和类风湿因子(RF),采用SVM构建早期诊断模型,并采用五次交叉验证法评价其效果。结果 SVM仿真诊断正确率为85.48%,高于RF(70.71%)和抗CCP抗体(84.05%)。五次交叉验证结果显示,SVM仿真模型诊断RA的灵敏度(Sen)为88.33%、特异度(Spe)为81.67%,MCC值为0.702 65,说明模型性能较好。RF诊断RA的Sen为74.17%,Spe为66.11%,抗CCP抗体诊断RA的Sen为78.75%、Spe为91.11%。三者Sen、Spe比较,P均<0.01。结论成功构建基于SVM的RA早期诊断模型,其对RA的预测效果较好。     

原发免疫性血小板减少症患者外周血单个核细胞热休克蛋白90的表达及与激素疗效相关性分析

目的 探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)患者糖皮质激素受体分子伴侣--热休克蛋白90(HSP90)表达特点及与激素疗效、部分临床指标的相关性.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测44例初发ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)的HSP90 mRNA,同时检测32例正常人作为对照.将ITP患者按糖皮质激素(GC)治疗效应分为GC敏感组和GC抵抗组,再按年龄、性别、病程和病情进行分组比较,同时分析患者HSP90 mRNA与血小板数、骨髓巨核细胞数及血小板抗体IgG的相关性.结果 44例ITP患者外周血PBMC的HSP90 mRNA中位数为0.90(0.48～2.52),32例正常人为1.40(0.82～2.65),正常人较ITP患者HSP90 mRNA有升高趋势,但两组无统计学差异(P>0.05).成人急性ITP患者HSP90 mRNA表达显著高于慢性患者(P<0.05).GC敏感组HSP90 mRNA表达中位数高于抵抗组,但两组无统计学差异(P>0.05).再按性别、年龄和病情分组比较,可见年龄≤60岁较年龄>60岁患者,轻型较重型患者,HSP90 mRNA均有升高趋势,但亦无统计学差异(P>0.05).ITP患者HSP90 mRNA水平与血小板数、骨髓巨核细胞数及血小板抗体IgG无明显相关性.结论 HSP90 mRNA在急性ITP患者显著高于慢性患者,显示与病程密切相关,结合其在GC敏感组较抵抗组表达升高的趋势,推测其在ITP中表达下调与GC抵抗有关联.     

类风湿关节炎患者血清HMGB1及TGF-β1的表达及意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)血清中的HMGB1和TGF-β1的表达及临床意义。方法 112例经确诊的RA患者作为病例组,其中活动期RA患者67例,非活动期RA患者45例,选取健康体检者80人作为对照组。ELISA法测定3组血清中HMGB1及TGF-β1含量。结果活动期RA患者的血清HMGB1水平(59.40±18.74)高于非活动期患者(16.58±6.02)和对照组(13.97±2.43),差异均有显著性意义(P<0.05)。非活动期RA患者和对照组相比,血清HMGB1水平差异无显著性意义(P>0.05)。活动期RA患者(17.13±11.26)和非活动期患者(22.42±13.70)的血清TGF-β1水平均低于对照组(28.35±8.14),活动期RA患者血清TGF-β1水平低于非活动期患者,差异有显著性意义(P<0.05)。结论血清中HMGB1及TGF-β1含量与RA的疾病活动有关,但两者的作用机制仍需要进一步研究。     

应用寡聚核苷酸芯片检测白血病与其同胞供者的白血病基因表达差异

为了应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究9对白血病患者／同胞供受者对之间的基因表达谱差异以识别主要的疾病相关基因，将163条白血病／肿瘤发病相关基因组群列入芯片设计，合成寡核苷酸探针，用点样仪点片制成基因芯片。提取病初白血病患者及其供者的骨髓／外周血标本或其相对应的健康同胞供者经G-CSF动员后并经CS-3000细胞分离机采集的浓集的9份外周血造血干细胞的总RNA；分别逆转录并进行寡核苷酸探针杂交。结果表明：与其相应的正常供者配对比较，发现4例ALL患者中存在6条显著差异表达基因，其中上调表达基因5条(RIZ，STK-1，T—cell leukemia／lymphoma 1A，Cbp／p300，Opl8)，下调表达1条(hematopoietic proteoglycan core protein)；5例AML-M4和AML-M，患者中亦存在7条显著差异表达基因，其中上调表达6条(STAT5B，ligand p62 for the Lck SH2，CST3，LTC4S，myeloid leukemia factor 2，epb72)，下调表达1条(CCR5)。结论：选择有高度遗传关联的兄弟姐妹供受者对作为差异研究比照对象，利用寡聚核苷酸基因芯片技术进行疾病基因的筛查，筛查出了13条主要异常基因；进一步确认了上述基因在白血病分子发病机制中的关键性作用。     

恶性淋巴瘤相关自身免疫性溶血性贫血七例并文献复习

目的 探讨恶性淋巴瘤(ML)相关自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的临床特点及预后.方法 回顾性分析7例ML相关AIHA患者的临床资料,并进行相关文献复习.结果 4例患者出现交叉配血困难,2例急性溶血发作期间死亡,1例虽溶血得到控制,但短期内淋巴瘤疾病进展加重死亡.4例生存者中2例联合激素化疗后目前病情仍稳定,1例Ⅰ期淋巴瘤患者激素联合沙利度胺、环孢素、甲氨蝶呤口服治疗,未进行联合化疗,至截稿前病情仍稳定,1例患者失访.结论 ML合并AIHA并非罕见,更多见于T细胞亚型,可出现溶血危象,需高度警惕.