利用人气道基底细胞体外构建类气管球

目的:利用人气道基底细胞体外培养类气管球.方法:利用河南省人民医院肺移植术中弃用的供肺分离并培养人气道基底细胞、肺成纤维细胞.将气道基底细胞和肺成纤维细胞1:1混合,重悬于基质胶,用EpiX Base培养基培养,以单独培养的基底细胞或肺成纤维细胞为对照.观察是否形成类气管球及不同时间点类气管球的形态,并采用免疫荧光染色...     

MicroRNA与脓毒症作用机制研究进展

脓毒症指是指宿主对感染产生的失控反应,并出现危及生命的器官功能障碍,是临床危重患者死亡的重要病因之一,其主要病理生理机制包括机体失控的炎性反应、凝血和免疫功能障碍,涉及细胞内多条信号传导通路的活化和分子机制.MicroRNA(miRNA)是一类长度约为21~25个核苷酸序列的内源性非编码RNA,通过转录后水平抑制靶基因表达及调节免疫细胞的分化,进而调控脓毒症的发生发展.因此深入研究microRNA与脓毒症的作用机制,可为预防与治疗脓毒症开拓新的思路.本文就目前已研究较为清楚的几种miRNA与脓毒症作用机制作一简要综述.     

肺炎继发脓毒症患者血清降钙素原和C反应蛋白变化及预后因素分析

目的探讨肺炎继发脓毒症患者血清降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的变化及预后危险因素。方法 122例肺炎患者,其中单纯肺炎52例为肺炎组,肺炎继发脓毒症57例为继发脓毒症组,肺炎继发脓毒性休克13例为脓毒性休克组;比较3组PCT、CRP、急性生理与慢性健康状况(Acute Physiology and Chronic Health EvaluationⅡ,APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭估计(Sequential Organ Failure Assessment,SOFA)评分;绘制ROC曲线,分析PCT、CRP、APACHEⅡ评分对肺炎继发脓毒症和脓毒性休克的诊断价值;继发脓毒症患者70例根据预后分为存活组32例和死亡组38例,比较2组临床资料及PCT、CRP、APACHEⅡ评分和SOFA评分,采用多因素logistic回归分析肺炎继发脓毒症死亡的危险因素。结果肺炎组白细胞计数、PCT、CRP、APACHEⅡ评分[7.59(5.44,10.28)×10~9/L、0.12(0.05,0.33)μg/L、26.85(7.95,74.40)mg/L、2.0(1.0,4.0)分]低于继发脓毒症组[12.20(7.25,17.55)×10~9/L、0.80(0.21,1.96)μg/L、97.80(55.95,127.40)mg/L、11.0(7.5,17.0)分]、脓毒性休克组[15.90(7.00,22.34)×10~9/L、3.49(0.29,50.00)μg/L、122.90(48.90,200.00)mg/L、21.0(15.5,26.0)分](P0.05),继发脓毒症组PCT、APACHEⅡ评分及SOFA评分[5.0(3.0,7.0)分]低于脓毒性休克组[9.0(7.5,11.5)分](P0.05),白细胞计数、CRP水平与脓毒性休克组比较差异无统计学意义(P0.05);PCT、CRP、APACHEⅡ评分及三者联合检测诊断肺炎继发脓毒症的AUC分别为0.791、0.770、0.924、0.943,诊断脓毒性休克AUC分别为0.736、0.718、0.898、0.899;肺炎继发脓毒症死亡组年龄[(69.9±15.2)岁]、SOFA评分[(7.7±3.5)分]、氧合指数SOFA评分[3.0(2.0,4.0)分]、意识障碍发生率(71.1%)、APACHEⅡ评分[(16.7±7.1)分]高于生存组[(58.6±21.3)岁、(4.7±1.9)分、3.0(2.0,3.0)分、37.5%、(9.6±5.0)分](P0.05);氧合指数SOFA评分增高及APACHEⅡ评分增高是肺炎继发脓毒症死亡的独立危险因素(OR=2.979,95%CI:1.307~6.791,P=0.009;OR=1.179,95%CI:0.997~1.394,P=0.050)。结论 PCT、CRP及APACHEⅡ评分对肺炎继发脓毒症诊断有一定价值,APACHEⅡ评分对肺炎继发脓毒症及脓毒性休克的诊断准确性高于PCT、CRP,且三者联合可提高肺炎继发脓毒症的诊断效能;氧合指数SOFA评分和APACHEⅡ评分升高是肺炎继发脓毒症患者死亡的危险因素。     

原代人气道基底细胞的分离与培养

目的:构建成熟的原代人气道基底细胞的分离、培养与传代体系。方法:从废弃的供肺或切除的病肺中分离出气管或较大的支气管;采用蛋白酶、DNA酶消化,搔刮气管或支气管内膜分离基底细胞,接种于Purecol包被的培养瓶,Epi XBase培养基培养、传代;免疫荧光染色法鉴定TRP63+KRT5+基底细胞;比较健康捐赠者和病肺来源的原代气道基底细胞活性。结果:成功分离培养38株人原代人气道基底细胞。标本来源宿主中男性21名、女性17名,年龄中位数59岁(2,77)。其中健康捐献者12例,慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者11例,特发性肺纤维化(IPF)患者9例,系统性硬化肺纤维化3例,朗罕氏细胞增生症1例,尘肺病1例,特发性肺高压1例。人气道基底细胞镜下呈多边形,成片连接,形似蜂巢,细胞间连接紧密。成熟细胞形态较均一,细胞核大,胞浆内可见颗粒。免疫荧光染色证实为TRP63+KRT5+基底细胞。38株人气道基底细胞第1代细胞活性为81.25%±0.12%。健康捐献者来源(12例)与病肺来源(26例)的细胞株活性无明显统计学差异。结论:本研究中,分离和培养人气道基底细胞成功率高,细胞纯度高,细胞活性也较...