不同剂量碱性成纤维细胞因子对人类胚胎干细胞生长、凋亡和DNA完整性的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)浓度对人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)特性的影响.方法 建立化学限定性hESCs培养体系,以有饲养细胞培养体系作为参照,比较4、40 ng/ml和100 ng/ml bFGF对hESCs多能性标记、细胞周期、细胞凋亡和DNA完整性的影响.结果 ①低浓度bFGF(4 ng/ml)足以维持hESCs在化学限定性培养基(基础培养基DMEM/F12,N2,B27, 简称 NB 体系)中培养;②bFGF可以抑制hESCs细胞凋亡,且具有剂量依赖性,而对hESCs细胞周期没有影响;③bFGF有助于hESCs DNA完整性维持,在NB体系加入4 ng/ml bFGF时,hESCs在DNA水平上存在75个异常区域,而在加入40 ng/ml bFGF时,只存在1个异常区域.结论 高剂量bFGF有助于hESCs体外快速扩增和hESCs DNA完整性维持.提高bFGF浓度为hESCs体外培养所必需.     

浅谈经皮椎弓根钉内固定治疗腰椎骨折的手术配合

微创经皮椎弓根钉内固定术,是我院近年来开展的骨科微创手术。因手术切口小,组织损伤及出血量少,术后恢复快等优点,值得临床推广。通过充分的术前准备,术中密切配合,能有效的缩短手术时间,使患者平稳安全度过手术期。     

人工全髋关节置换术的手术配合及护理体会

【】S 目的 总结人工全髋关节置换手术的手术配合和体会 方法 选择我院2012年1月至2013年7月实施的人工关节置换术26例,对其手术的护理配合内容进行分析总结。结果26例患者的置换手术,均取得了理想的效果。结论 手术室护士应认真配合手术医生完成手术,术中密切观察患者病情变化,以利手术顺利安全进行。     

二代测序技术在植入前遗传学诊断中的应用

二代测序技术在植入前遗传学诊断、筛查中的应用正在迅速发展,其不仅能进行胚胎染色体的全面筛查和诊断,还能检测单基因病。文章就二代测序技术在染色体病、单基因病的植入前     

超声刀在胃癌根治手术中的应用

超声刀由于其本身具有的特性,如产生的热能低,对组织损伤小,精确的切割与可控制的凝血等,对富含细小血管而又紧邻重要解剖结构的淋巴结周围组织的切割止血可以达到十分满意的效果,我院2010年引进一台美国强生公司生产的GEN300超声刀用于胃癌根治术28例取得了满意效果。     

不同培养体系可逆改变人类胚胎干细胞的分化倾向

背景: 人类胚胎干细胞可以在饲养细胞依赖性培养体系和化学限定性培养体系下维持未分化状态,能够在体内外诱导分化成三胚层来源的细胞类型.目的: 比较饲养细胞和化学限定性培养体系对人类胚胎干细胞特性的影响.方法: 将在饲养细胞培养体系下培养27代的人类胚胎干细胞转入到化学限定性培养基体系中培养56代,然后再将其转回到饲养细胞培养体系中,将3种培养条件下的人类胚胎干细胞(饲养细胞培养体系培养70代、化学限定性培养体系培养56代、化学限定性培养体系下培养70代后转回饲养细胞培养体系下培养13代和20代)进行多能性分子标记SSEA4流式分析等检测分析,同时对3种培养条件下人类胚胎干细胞经拟胚体诱导分化后分别检测多能性基因和三胚层分化基因的表达.结果与结论: 人类胚胎干细胞在饲养细胞和化学限定性培养体系下表现出不同的诱导分化倾向,在化学限定性培养体系下表现出向神经诱导分化抑制,这种不同的诱导分化倾向可发生可逆性转换,当人类胚胎干细胞由化学限定性培养体系转回到饲养细胞培养体系时,诱导分化倾向表现出与其在饲养细胞下诱导分化一致的模式.在拟胚体分化中,多能性基因Nanog高可能对诱导分化倾向起着重要作用.与此同时,人类胚胎干细胞SSEA4细胞亚群发生相应的变化,人类胚胎干细胞在饲养细胞和化学限定下培养体系下表现的分化倾向与人类胚胎干细胞亚群所占的比例存在关联.     

无饲养细胞无外源因子条件下高克隆密度 维持人类胚胎干细胞自身未分化状态

目的：建立人类胚胎干细胞（human embryonic stem cells, hESCs）无饲养细胞无外源性细胞因子体外培养体系。方法：比较hESCs克隆种植密度对其无饲养细胞无外源性细胞因子体外培养的影响,以及克隆种植密度对hESCs培养体系骨形蛋白(bone morphology protein, BMP)样诱导活性的影响。结果：在没有外源性细胞因子条件下,高克隆密度（34克隆/cm2）可以维持hESCs处于未分化状态,而低克隆密度不能维持hESCs处于未分化状态。同时, NB体系BMP样诱导活性可以被hESCs克隆种植密度所改变,高hESCs克隆密度时,培养基具有高的BMP样诱导活性。结论：高hESCs克隆种植密度可以改变自身生长的微环境,可以维持自身未分化状态,这?鱤ESCs自身未分化状态机制和简化hESCs无饲养培养体系提供了新的思路。     

不同培养体系可逆改变人类胚胎干细胞的分化倾向

背景：人类胚胎干细胞可以在饲养细胞依赖性培养体系和化学限定性培养体系下维持未分化状态,能够在体内外诱导分化成三胚层来源的细胞类型。 目的：比较饲养细胞和化学限定性培养体系对人类胚胎干细胞特性的影响。 方法：将在饲养细胞培养体系下培养27代的人类胚胎干细胞转入到化学限定性培养基体系中培养56代,然后再将其转回到饲养细胞培养体系中,将3种培养条件下的人类胚胎干细胞(饲养细胞培养体系培养70代、化学限定性培养体系培养56代、化学限定性培养体系下培养70代后转回饲养细胞培养体系下培养13代和20代)进行多能性分子标记SSEA4流式分析等检测分析,同时对3种培养条件下人类胚胎干细胞经拟胚体诱导分化后分别检测多能性基因和三胚层分化基因的表达。 结果与结论：人类胚胎干细胞在饲养细胞和化学限定性培养体系下表现出不同的诱导分化倾向,在化学限定性培养体系下表现出向神经诱导分化抑制,这种不同的诱导分化倾向可发生可逆性转换,当人类胚胎干细胞由化学限定性培养体系转回到饲养细胞培养体系时,诱导分化倾向表现出与其在饲养细胞下诱导分化一致的模式。在拟胚体分化中,多能性基因Nanog高可能对诱导分化倾向起着重要作用。与此同时,人类胚胎干细胞SSEA4细胞亚群发生相应的变化,人类胚胎干细胞在饲养细胞和化学限定下培养体系下表现的分化倾向与人类胚胎干细胞亚群所占的比例存在关联。     

胚胎植入前遗传学检测技术的临床应用和发展前景

<正>植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing, PGT)是辅助生殖与遗传学诊断技术相结合的一种胚胎检测技术，指对植入前的胚胎进行染色体或者特定基因检测，使得面临较高遗传风险妊娠的夫妇在选择遗传学正常的胚胎植入子宫后，可以降低自然流产的风险或者避免遗传性出生缺陷。相比于传统的产前诊断技术，PGT技术可以避免因发现胎儿遗传异常后不得不面临的选择性流产的身心痛苦，越来越成为人们首先考虑的生殖干预方式。