不同浓度血清对大鼠骨骺干细胞向软骨细胞分化的诱导效果比较

背景：血清成分复杂，其中不仅存在促细胞生长因子，同时也存在细胞生长抑制因子，因此合适的血清浓度对于体外培养细胞的增殖和分化至关重要。目的：比较不同浓度的胎牛血清对大鼠骨骺干细胞向软骨细胞分化的影响。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2007—03／10在华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科研究室完成。材料：纯系清洁级新生24h内的SD大鼠8只，用于制备骨骺干细胞。胎牛血清为Gibco公司产品。方法：免疫磁珠分离纯化FGFR-3阳性的骨骺干细胞，稳定传至第3代后，分别用含1．25％，2．5％，5％，10％胎牛血清的软骨诱导培养基进行干预，诱导14d。主要观察指标：BrdU．ELISA法检测细胞增殖活性。应用免疫荧光染色和RT—PCR法检测细胞Ⅱ型胶原的表达。结果：骨骺干细胞向软骨细胞诱导14d后，10％胎牛血清组细胞增殖活性显著高于1．25％，2．5％，5％胎牛血清组（P〈0．05）：10％胎牛血清组Ⅱ型胶原免疫荧光染色阳性程度及Ⅱ型胶原mRNA的表达均明显强于其他3组。结论：含10％胎牛血清的软骨诱导液更有利于骨骺干细胞向软骨细胞方向分化。