胚胎碎片对早期胚胎发育影响的研究

目的:探讨胚胎碎片对早期胚胎发育的影响。方法:回顾分析3PN胚胎的囊胚形成率,根据胚胎碎片含量分为A组(10%)、B组(25%碎片≥10%)、C组(50%碎片≥25%)、D组(≥50%),检测各组活性氧(ROS)的含量。选取碎片含量10%～50%的胚胎,根据是否行显微碎片清除分为实验组(行显微去碎片)和对照组(未行显微去碎片),观察囊胚形成率。结果:D组的囊胚形成率显著低于A、B、C组,差异有统计学意义(P0.05)。随着碎片增多,胚胎的ROS逐渐增多,B组和C组间无显著差异,其余各组间有显著差异(P0.05)。去除碎片后,囊胚形成率为27.70%,显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:ROS增加可能是胚胎碎片形成的主要因素之一,去除碎片可提高囊胚形成率,但去除碎片对胚胎发育潜能的远期影响,有待进一步研究。     

促卵泡激素和血管内皮生长因子在大鼠卵巢组织冷冻自体异位移植中的保护作用

目的：探讨促卵泡激素(FSH)和血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠卵巢组织冷冻自体异位移植后对卵泡内分泌功能的影响。方法 Wistar 大鼠30只随机分为 A、B、C 组,每组10只,A 组为新鲜卵巢组织移植,B 组和 C 组卵巢组织均直接覆盖玻璃化冷冻保存2周复苏后移植,但 C 组在移植前2 d 肌内注射 FSH 和 VEGF,连续用药5 d。移植6周后计算卵泡密度;检测大鼠血清中雌二醇(E2)水平;卵巢组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况,并测定子宫重量。结果 A、B、C 组移植后卵巢组织存活率比较差异无统计学意义(P >0．05)。 A、C 组卵泡密度、血清 E2水平、PCNA 阳性率和子宫重量均高于 B 组(P <0．05),A 组和 C 组比较差异无统计学意义(P >0．05)。结论大鼠卵巢组织冷冻复苏自体异位移植前注射 FSH 和 VEGF 可以有效提高卵泡存活率,有利于恢复卵巢内分泌功能。     

两种玻璃化冷冻方法在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果观察

目的：比较直接覆盖玻璃化冷冻(direct cover vitrification, DCV)及常规玻璃化冷冻(conventional vitrifi-cation, CV)在大鼠卵巢组织冷冻中的应用效果。方法将雌性 Wistar 大鼠30只随机分为 A、B、C 组,每组10只,切除大鼠双侧卵巢组织。 A 组为对照组,B 组和 C 组分别应用 CV 和 DCV 冻存2周。复苏后观察3组卵泡的形态,并用末端脱氧核酰转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记实验(TUNEL)检测各组卵泡的凋亡率。结果 A 组各级卵泡形态正常;B 组卵泡形状不规则,卵母细胞核固缩;C 组较大的窦状卵泡损伤。除 C 组原始卵泡外,B 组和 C 组形态正常的各级卵泡比例均低于 A 组(P <0．05);C 组形态正常的各级卵泡比例高于 B 组(P <0．05)。 B、C 组卵泡凋亡率高于 A组,且 C 组低于 B 组(P <0．01)。结论 DCV 较 CV 卵巢组织效果更好,可以有效保存卵巢组织中的原始卵泡。     

不同浓度乙醇对人精子形态、前向运动力和DNA 碎片指数影响的体外实验研究

目的　探索不同浓度乙醇对体外培养的人精子形态、前向运动力和DNA 碎片指数的影响。方法　采用密度梯 度离心法处理精液后将回收的30 份精子混悬于不同乙醇浓度的精子培养液中,其中对照组0 mg/dl（A 组）,实验组（低 浓度）20 mg/dl（B 组）,C 组（中浓度）80 mg/dl 和D 组（高浓度）160 mg/dl。6h 后检测各组正常形态精子比例、前 向运动精子以及精子DNA 碎片指数。结果　B 组正常形态精子（9.60±2.13）% 与A 组（10.23±2.48）% 相比,差异 无统计学意义（P=0.128）。C 组（8.03±1.96）% 和D 组（5.23±1.23）% 正常形态精子低于A 组,差异有统计学意义 （P=0.011,0.000）。前向运动精子比例依次下降[A 组（73.03±2.83）%,B 组（63.13±4.22）%,C 组（53.03±3.05）%, D组（45.07±2.97）%],差异有统计学意义（F=283.454,P=0.000）。D组精子DFI （20.30±5.06）%,高于A组（12.37±3.68）%、 B组（12.67±3.78）% 和C 组（15.70±4.06）%,差异均有统计学意义（ P=0.000,0.000,0.001）,B 组、C 组精子 DFI 高于A 组,但差异均无统计学意义（P=0.804,0.339）,B 组与C 组精子DFI 比较,差异亦无统计学意义（P=0.478）。     

卵母细胞分泌因子在卵巢储备功能减退患者中的表达及对胚胎发育的影响

目的 分析卵母细胞分泌因子在卵巢储备功能减退(DOR)患者卵丘颗粒细胞(CCs)中的表达情况,预测不同的促排卵方案对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响,为DOR不孕女性寻找更有效的促排卵方案。方法 收集接受卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)助孕治疗的80例DOR患者,425份CCs为研究对象,其中微刺激方案组30例171份CCs,促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-A)方案组30例165份CCs, PPOS方案组20例89份CCs,单卵丘颗粒细胞群与卵母细胞一一对应。提取卵母细胞周围CCs的mRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组CCs中生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)和转化生长因子-β1(TGF-β1)相对表达量。结果 GnRH-A方案组中采用促性腺激素(Gn)天数及Gn剂量明显多于其余两组(P<0.05)。在3种促排卵方案中,MⅡ期GDF-9、BMP-15和TGF-β1相对表达量高于MⅠ和GV期;正常受精组的GDF-9、BMP-15和TGF-β1相对表达量高于异常受精组;优质胚胎组的GDF-9、BMP-15和TGF-β1相对表达量高于非优质胚胎...     

异常受精胚胎临床利用价值探讨

目的:探讨常规体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期中异常受精胚胎的临床利用价值。方法:回顾性分析2013年4月至2015年6月在白求恩国际和平医院生殖中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗(包括常规IVF和ICSI)的955个周期的实验室和临床数据。结果:ICSI周期双原核(2 PN)受精率显著高于IVF周期2 PN受精率(88.20%vs 72.04%,P0.01),而ICSI周期的未见原核(0 PN)、单原核(1 PN)及多原核受精率均低于IVF周期(P0.01),差异有统计学意义。第5天(D5)0 PN的囊胚形成率和可利用囊胚率显著高于2 PN和1 PN组(P0.01)。新鲜移植周期和冻融卵裂胚移植周期,0 PN组种植率和临床妊娠率显著低于2 PN组(P0.01),但是冻融囊胚移植周期,0 PN组的种植率和临床妊娠率与2 PN组相比,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:IVF/ICSI周期中没有2 PN胚胎可供选择移植时,可选择0 PN胚胎,囊胚培养是合理利用异常受精胚胎的有效手段。     

宫腔灌注对胚胎反复种植失败患者在冻融胚胎移植周期中的影响

目的 探讨对于胚胎反复种植失败(RIF)患者,宫腔灌注不同物质对冻融胚胎移植(FET)周期妊娠结局的影响。方法 回顾性分析2018年5月至2021年10月于中国人民解放军联勤保障部队第九八○医院生殖中心接受冻融胚胎移植(FET)治疗并行宫腔灌注的120例RIF患者的临床资料。根据宫腔灌注药物不同分为3组：宫腔灌注HCG的HCG组(44例),宫腔灌注粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的G-CSF组(42例),宫腔灌注G-CSF+地塞米松磷酸钠注射液(DexSPI)的G-CSF+DexSPI组(34例);选择同期行激素替代周期准备内膜、仅行FET(未行宫腔灌注)的36例患者为对照组。比较各组患者的一般情况、胚胎移植和内膜情况及妊娠结局。结果 4组患者间平均年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)及基础雌二醇(bE₂)水平比较均无显著性差异(P>0.05)。4组患者间既往移植失败周期数、移植失败周期优胚数、本次移植胚胎数、优胚数、转化日内膜厚度及胚胎移植日内膜厚度比较均无显著性差异(P>0.05)。HCG组、G...     

单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中生长分化因子-9和骨形成蛋白-15的表达水平与胚胎发育潜能的研究

目的评估单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15的m RNA表达水平对卵母细胞发育潜能的影响。方法采用长方案治疗25例ICSI助孕的女性,取卵当天收集180份单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞,随后提取卵丘颗粒细胞的m RNA,进行实时荧光定量分析,对GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平采用独立样本t检验分析。结果常规长方案CCs 180份,因卵子与收集的卵丘颗粒细胞是一一对应的,根据卵子受精情况将CCs分为正常受精组CCs 129份,异常受精组CCs 51份;正常受精组根据第3日胚胎卵裂情况分为优质卵裂胚形成组CCs 58份,非优质卵裂胚形成组CCs71份;非优质卵裂胚继续培养,根据第5日形成囊胚情况,分为优质囊胚形成组CCs 25份,非优质囊胚形成组CCs 46份。GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率显著相关。正常受精组GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平显著高于非正常受精组(P0.01),优质胚胎组显著高于非优质胚胎组(P0.01)。结论单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率和优质囊胚形成率呈显著正相关,提示其可以作为预测卵母细胞的发育潜能的指标。     

冻融卵母细胞显微受精后冻融胚胎移植成功妊娠一例

随着辅助生殖技术发展，卵子冷冻应被视为辅助生殖技术重要的组成部分[1]。2013年美国生育年会颁布的指导原则表明，目前成熟卵子的冷冻已不再局限于实验研究[2]。解放军白求恩国际和平医院生殖医学中心采用玻璃化冷冻胚胎取得了满意的种植率和妊娠率。2014年该中心采用玻璃化冷冻经历了冻卵、冻胚的双冻试管婴儿1例，获得临床妊娠，现报告如下。