肺炎克雷伯菌与植生克雷伯菌喹诺酮类耐药基因研究

目的 分析宁波大学医学院附属医院克雷伯菌属的耐药性及其对喹喏酮类药物的耐药机制.方法 收集2009年10月-2011年3月分离出的20株克雷伯菌属菌株,经鉴定确认18株为肺炎克雷伯菌,2株为植生克雷伯菌.采用k-b纸片扩散法检测其对药物的敏感性.pcr法检测染色体介导的gyra、parc基因和质粒介导的aac(6’)-Ⅰ b-cr、qnra、qnrb、qnrs、qepa基因,pcr阳性产物采用pcr直接全自动荧光法测序.结果 20株克雷伯菌属菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物均表现为多重耐药性(耐药率均在80％以上),其中植生克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南敏感.18株(90％)菌株存在gyra、parc基因突变;aac(6’)-Ⅰ b-cr阳性12株(60％),qnrb和qnrs阳性均为4株(20％).结论 本组20株克雷伯菌属菌对喹诺酮类药物耐药主要与gyra和parc基因突变相关. abstract： objective to investigate the multi-drug resistance of klebsiella strains and its mechanism.methods twenty strains of klebsiella were isolated from the affiliated hospital of medical college,ningbo university from october 2009 to march 2011,in which 18 isolates were klebsiella pneumonia and 2 were klebsiella planticola. drug sensitivity was determined by k-b tests. drug resistant genes gyra,parc (chromosome mediated) and aac( 6′)-i b-cr,qnra,qnrb,qnrs,qepa (plasmid mediated) were amplified by pcr and verified by direct automated fluorogenic sequencing. results resistance to β-1actams,aminoglycosides and quinolones was observed in 20 strains,and resistant rates were all above 80％.klebsiella planticola strains were sensitive to imipenem and meropenem.mutations of gyra and parc genes existed in 18 strains (90％),and the positive rates of aac (6') -i b-c r,qnrb and qnrs were 60％ (12/20),20％ (4/20) and 20％ (4/20),respectively.conclusion the mutations ofgyra and parc genes may be the main cause of the resistance to quinolones in these strains.     

克雷伯菌属的耐药性及可移动遗传元件标记研究

目的 分析克雷伯菌属的耐药性和耐药基因载体-可移动原件的携带情况.方法 收集宁波大学医学院附属医院及宁波市医疗中心李惠利医院2009年8月-2011年3月住院患者送检标本分离出20株克雷伯菌属,经鉴定确认2株为植生克雷伯菌,18株为肺炎克雷伯菌;采用K-B纸片扩散法对其进行13种抗菌药物敏感性判断;PCR法检测13种可移动遗传元件,PCR阳性产物采用PCR直接全自动荧光法测序.结果 20株克雷伯菌属均表现对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物多药耐药性,植生克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南敏感;20株克雷伯菌属的可移动遗传元件检出率分别为:traA 10.0％、trbC 70.0％、int Ⅰ 1 100.0％、tnpU 80.0％、tnp513 100.0％、IS26 100.0％、IS903 95.0％、ISKpn6 45.0％、ISEcpl 90.0％.结论 20株克雷伯菌属多药耐药的表型可能与携带多种可移动遗传元件相关.     

社区与医院获得性感染金黄色葡萄球菌毒力因子对比分析

目的了解社区与医院获得性感染金黄色葡萄球菌的毒力因子PVL和TSST-1的携带情况。方法收集社区和医院获得性感染金黄色葡萄球菌菌株184株和262株,PCR检测毒力因子基因pvl和tst,统计分析检出率的差异。结果pvl在社区感染菌株中的检出率(11.96%)高于医院感染(0.76%),在MSSA中的检出率(7.50%)高于MRSA(2.91%);与pvl相反,tst在社区感染菌株的检出率(6.52%)低于医院感染(17.56%),在MSSA中的检出率(5.83%)低于MRSA(21.36%)。对不同感染部位菌株pvl和tst检出率进行两两比较后发现,社区皮肤/软组织感染菌株pvl的检出率最高,而医院感染菌血症菌株中tst的检出率最高。结论 PVL和TSST-1作为金黄色葡萄球菌的2种重要毒素,与感染部位、社区/医院获得性、细菌耐药性、疾病的严重性及转归都可能存在密切关系。     

鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及分子流行病学研究

目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度值;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果28株鲍曼不动杆菌对多粘菌素E耐药率最低为4．7%,头孢哌酮/舒巴坦为87%,其余抗菌药物耐药率均高于90%耐药。PFGE分型共分为4型,以A、B两型为主。28株鲍曼不动杆菌中均产OXA-23碳青霉烯酶基因,未检测到VIM、IMP型金属酶基因。结论宁波地区碳青霉烯抗生素耐药鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,3家医院均有克隆播散流行。     

多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性研究

目的了解多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRABA)的耐药性与抗菌制剂外排泵基因的存在情况。方法收集医院2009年6-9月住院患者中分离的MDRABA共20株,菌株耐药性采用纸片扩散法测定,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析3种抗菌制剂外排泵基因:adeB、mdf A、qacE△1。结果β-内酰胺类药物中头孢菌素类耐药率达100%,亚胺培南耐药率也达80%;20株MDRABA中adeB、mdf A、qacE△1均有检出,阳性率分别为85%、90%、65%;除6、9号菌株外,大多数菌株携带2~3种外排泵基因。结论该组20株MDRAB抗菌制剂外排泵基因高阳性率是这些菌株高耐药原因之一。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布与耐药分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药情况。方法对2010年1～12月临床标本中分离的967株大肠埃希菌和988株肺炎克雷伯菌的临床分布和药敏试验结果用WHONET 5.4软件进行统计分析。结果大肠埃希菌主要从尿液（32.9%）中检出,主要来自普外科（21.9%）和重症监护病房（17.5%）,产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株检出率为58.9%;肺炎克雷伯菌主要从痰液标本中检出,主要来自重症监护病房（21.7%）和神经外科（17.3%）,产ESBLs菌株检出率为35.0%;除哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、亚胺培南、呋喃妥因外,两种细菌中产ESBLs菌株对其他抗菌药物的耐药率均高于其非产ESBLs菌株。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是临床上的常见致病菌,加强产ESBLs菌株检测和细菌耐药监测对指导临床用药具有重要意义。     

重症监护室金黄色葡萄球菌感染干预效果观察

[目的]通过监测重症监护室金黄色葡萄球菌感染及耐药性变化,探讨重症监护室综合性干预对控制医院感染的作用。[方法]采用回顾性分析的方法,对某医院2011年和2012年重症监护室采取综合性干预措施前后,患者金黄色葡萄球菌的分离结果进行对比性分析。[结果]两年间金黄色葡萄球菌的分离率无明显差异(P0.05),但耐甲氧西林金黄色葡萄球菌构成比明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。金黄色葡萄球菌对苯唑西林、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率明显下降(P0.05)。两年间重症监护室金黄色葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、呋喃妥因和喹奴普汀-达福普汀敏感率最高,均达100.00%。[结论]通过综合性干预,重症监护室金黄色葡萄球菌感染情况得到改善,耐药率总体有所下降。     

耐亚胺培南革兰阴性杆菌的变迁与临床分布

目的 调查耐亚胺培南革兰阴性杆菌的分离情况和临床分布.方法 收集2008年1月-2010年12月住院患者各种标本中分离出的病原菌,采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2全自动微生物分析系统进行鉴定和药物敏感试验,结果用WHONET 5.4软件进行分析.结果 3年内共分离出耐亚胺培南革兰阴性杆菌株906株,其中2008年185株,分离率为15.7％,非发酵菌占93.0％;2009年361株,分离率为18.0％,非发酵菌占73.4％;2010年360株,分离率为18.1％,非发酵菌占81.9％,非发酵菌主要见于鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄杆菌属、嗜麦芽寡养单胞菌等;肠杆菌科主要见于变形菌属、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、肠杆菌属.结论 医院分离的耐亚胺培南菌株中非发酵菌一直占较大比例,且2009年出现的耐亚胺培南肠杆菌科比2008年明显上升,但2010年有所下降.     

浙江省近年H_3N_2亚型流行性感冒病毒流行株的血凝素与神经氨酸酶基因与猪型流行性感冒病毒的亲缘关系分析

目的对浙江省近年两次甲3亚型(H3N2)流行性感冒(流感)病毒流行的代表株,与猪型H3N2株流感病毒在主要抗原基因间进行比较分析,探讨二者间的亲缘关系。方法对这两次流行流感病毒代表株的血凝素(Hemagglutinin,HA)与神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因作序列测定,并与同期的人、猪流感毒株的相应基因作同源性与进化树分析。结果浙江省这两次H3N2流感流行中的代表株甲(3A3)/浙江(Zhejiang,ZJ)/10/98、A3/ZJ/6/99、A3/ZJ/8/02与猪流感病毒A3/猪型(SW)/安大略(Ontario,ON)/130/97、A3/SW/香港(Hongkong,HK)/4361/99、A3/SW/HK/74/02在HA1区的同源性,分别为99.1%、99.4%、99.4%;在NA区,A3/ZJ/10/98、A3/ZJ/6/99、A3/ZJ/8/02与猪流感病毒A3/SW/ON/130/97、A3/SW/HK/4361/99、A3/SW/HK/74/02的同源性,分别达到98.2%、99.3%、99.3%。二者之间均呈现出很高的同源性,有的远高于它与同期人流感毒株的同源性,在基...     

多药耐药鲍氏不动杆菌可移动遗传元件研究

目的调查多药耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)转座子、整合子等可移动遗传元件的存在情况。方法收集宁波市李惠利医院2009年6-9月住院患者中分离的MDR-ABA共20株,采用聚合酶联反应(PCR)及序列分析的方法分析10种可移动遗传元件:tnpU、tnp513、IS26、ISEcp1、ISaba1、ISaba4、ISaba9、intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3。结果 20株MDR-ABA共检出5种基因:tnpU、tnp513、IS26、ISaba1、intⅠ1,其余5种基因未检出;各种基因阳性率以IS26和ISaba1最高16株(80%),intⅠ1次之13株(65%),tnp513为12株(60%),tnpU9株(45%);9株MDR-ABA同时检出5种基因,1株MDR-ABA同时检出4种基因,2株MDR-ABA同时检出3种基因,5株MDR-ABA同时检出2种基因,1株MDR-ABA仅检出1种基因,另有2株MDR-ABA未检出上述10种基因。结论同时检测MDR-ABA10种可移动遗传元件是国内首次报道,可移动遗传元件介导各种耐药基因使受体菌表现为多药耐药。