人BAFF-R基因启动子活性的初步研究

目的以B淋巴细胞刺激因子受体BAFF-R基因5'上游区序列为研究对象,初步鉴定、分析该基因的启动子所在区域。方法克隆BAFF-R基因5'侧翼区1823 bp序列,构建8个含有不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-B1～B8,将这8个序列缺失重组质粒与psv-β-gal质粒共转染细胞,检测荧光素酶的相对活性,确定启动子所在区域。结果8个重组质粒中pGL3-B2、pGL3-B3、pGL3-B5、pGL3-B6启动子的活性较低;pGL3-B7启动子的活性最强,pGL3-B8启动子活性最低。结论BAFF-R基因5'端-288～-430、-712～-868和-1420～-1562三个区段可能存在转录沉默子元件,-617～-712和-1277～-1420区段存在转录增强子元件,BAFF-R基因的核心启动子可能位于-1420～+261区域。     

NF-κB抑制剂和IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性的影响

目的:探讨IFN-γ和NF-κB抑制剂对人BAFF-R基因启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR方法扩增得到BAFF-R基因转录起始点上游5’端-1562~+261 bp的片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic连接构建8个序列缺失质粒。将重组质粒瞬时转染人多发性骨髓瘤细胞株KM3,通过检测荧光素酶的相对活性,确定启动子活性最强的区域;分别用NF-κB抑制剂(BAY11-7082)和IFN-γ对活性最强的启动子进行干预,测定并比较荧光素酶的相对活性;同时RT-PCR检测干预前后BAFF-R基因mRNA的表达水平。结果:IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性有促进作用并且可以上调BAFF-R mRNA的表达,NF-κB抑制剂(BAY11-7082)对BAFF-R基因启动子活性有抑制作用并且可以下调BAFF-R mRNA的表达。结论:IFN-γ和NF-κB信号通路参与了BAFF-R基因的转录调控,为进一步研究BAFF-R的调节机制提供了基本的依据。     

血栓弹力图在肝移植术后患者中的应用

目的探讨血栓弹力图(TEG)检测对肝移植术后患者合理使用血液成分的指导作用。方法选取2013年11月-2014年4月在首都医科大学附属北京佑安医院就诊的35例肝移植术后患者,采集患者的血液样本分别进行TEG检测和传统凝血项检测。选取TEG检测参数[凝血反应时间(R)、凝固时间(K)、凝固角(Angle)、血栓最大幅度(MA)]和凝血项指标进行双变量的直线相关分析,并对TEG检测指导临床使用血成分及输血量与临床申请输注血液情况进行比较。计量资料比较采用配对t检验。结果部分活化凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)与R呈正相关(r值分别为0.69、0.41,P值分别为0.001和0.030);纤维蛋白原(FIB)与K呈负相关(r=-0.03,P=0.008);血小板(PLT)与Angle、MA呈正相关(r值分别为0.46、0.68,P值分别为0.029和0.000);FIB与MA呈正相关(r=0.33,P=0.040)。R值在TEG肝素酶杯中和前后差异具有统计学意义(P=0.027)。结论 TEG检测对肝移植术后患者合理使用血液成分具有指导意义。     

将知识竞赛式教学方法应用到输血医学教学

输血医学是新成立的临床医学二级学科,输血医学的教学工作将会越来越受到重视。输血医学做为临床医学的分支,整合了多种学科的概念、技术、相关知识及相关的法律法规等,知识内容量大,输血专用术语多,要求教师应用多种教学方法充分调动学生的学习兴趣和求知欲望,从而使输血医学专业学生扎实掌握理论知识,熟练操作技能。文章尝试将知识竞赛式教学方法引入到输血医学知识的教学过程中,该方法不仅能提高学生学习的热情,培养学生实践技能操作能力,在复习过程中能有效掌握重点,使学生能深刻强化巩固知识点,进一步完善学生的技能操作,从而有效提高教学质量。     

下尿路感染患者菌群分布及对磷霉素氨丁三醇散敏感度分析

目的 检测下尿路感染患者尿液中菌群分布及对磷霉素氨丁三醇散的敏感度。 方法 对2011年3~10月就诊于首都医科大学附属北京朝阳医院京西院区泌尿外科的80例表现为尿频、尿急、尿痛且尿常规提示脓尿的患者给予磷霉素氨丁三醇散治疗,治疗前留取清洁中段尿行细菌培养+药敏检查。对尿培养阴性患者治疗后1周行尿常规检查。对尿培养阳性患者治疗后1周行尿常规和尿培养检查,尿常规正常患者,停用磷霉素氨丁三醇散,1周后再次复查尿常规和尿培养检查;尿常规异常患者,继续口服磷霉素氨丁三醇散治疗1周,1周后再次复查尿常规和尿培养检查,间接分析磷霉素氨丁三醇散的敏感性。 结果 80例患者中,初次尿培养阳性72例,阴性8例,主要致病菌为大肠杆菌;72例下尿路感染患者中单纯性尿路感染50例,复杂性尿路感染22例;尿培养阳性者治疗1周后66例尿常规恢复正常,停用磷霉素氨丁三醇散,尿培养转阴,第3次尿常规和尿培养均为阴性;6例尿常规阳性患者继续口服磷霉素氨丁三醇散1周,尿培养均转阴,第3次尿常规和尿培养均为阴性;8例初次尿培养阴性者治疗1周后尿常规提示脓尿均消失。 结论 下尿路感染主要致病菌为大肠杆菌;磷霉素氨丁三醇散对革兰阳性菌和革兰阴性菌导致的下尿路感染均有效;对单纯性泌尿系感染和复杂性泌尿系感染均有良好的治疗效果,可以作为下尿路感染的经验用药。     

戴安娜全自动血型仪在血型鉴定及交叉配血中的应用

目的：探讨戴安娜全自动血型仪在血型鉴定及交叉配血中的应用。方法使用全自动血型仪和传统试管法检测2300份标本的血型;用微柱凝胶法和聚凝胺法对900例患者进行交叉配血试验。结果全自动血型仪和试管法检测血型一次性判读准确率分别为99．87％、100．00％;在900例交叉配血试验中,微柱凝胶法配血不合30例,主侧不合3例,次侧不合27例,将微柱凝胶法配血不合的标本用聚凝胺法检测,主侧不合3例,次侧不合3例。结论全自动血型仪用于 ABO 血型和 RhD 血型检测安全、快速、可靠、灵敏度高;微柱凝胶法进行交叉配血较敏感,但假凝集及不规则抗体的存在会导致配血困难,耗时较长;聚凝胺法简便、快速、假阳性较少,但有可能导致抗体漏检。     

冰冻血浆融化后不同放置时间血栓弹力图部分参数的变化

目的探讨冰冻血浆融化后不同放置时间血栓弹力图部分参数的变化,从而更好地指导临床输血。方法采用血栓弹力图仪器TEG-5000分别对20份新鲜冰冻血浆(FFP)和20份普通冰冻血浆(FP)融化后0、2、4、6、12、24h测定凝血时间(R)、Angel角。结果新鲜冰冻血浆在4℃冰箱放置12h后R值有明显改变,与0h比较差异有统计学意义(P0.05);放置24h后R值、Angel角均有明显改变,与0h比较差异有统计学意义(P0.05)。普通冰冻血浆在4℃冰箱放置12、24h后R值、Angel角均有明显改变,与0h比较差异有统计学意义(P0.05)。结论冰冻血浆融化后要及早输注,从而保证凝血因子的活性,确保输注患者血浆的效果。     

B淋巴细胞刺激因子及其受体与多发性骨髓瘤

B淋巴细胞刺激因子(BAFF)属于肿瘤坏死因子家族的成员,通过与3个受体(TACI、BCMA、BAFF-R)结合,发挥生物学功能,参与B、T淋巴细胞增殖和功能的调节;BAFF过度表达与受体结合后,可促使B淋巴细胞不断增殖并分泌自身抗体,从而导致一系列自身免疫性疾病的发生;BAFF过度表达,也会使淋巴细胞增殖失控,导致B细胞恶性肿瘤的发生。多发性骨髓瘤是骨髓内浆细胞异常增生的1种B细胞恶性肿瘤,恶性B细胞自分泌产生BAFF,在MM发病过程中起重要作用。     

IFN-γ和IL-6对多发性骨髓瘤B淋巴细胞刺激因子表达变化的调控研究

目的 探讨IFN-γ和IL-6对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)B淋巴细胞刺激因子(BLyS)表达变化的影响及相关机制.方法 采用流式细胞术、实时荧光定量PCR、E1.ISA及Western blot方法 分析人MM肿瘤细胞KM3在IFN-γ和IL-6以及相关信号通路特异性抑制剂作用前后BLJys表达水平的变化.结果 lFN-γ和IL-6促进KM3细胞BLyS的表达水平;NF-KB抑制剂能够抑制BLyS的表达水平;NF-KB抑制剂BAY11-7082能够完全下调IFN-γ引起的BLyS表达的上调作用;抑制促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性能够下调BLyS的表达水平.结论 MAPK与NF-KB信号通路参与了Blys的表达调节.