凋亡素原核表达载体的构建和表达

目的 构建凋亡素原核表达系统，以制备抗原物质凋亡素融合蛋白。方法 通过PCR方法，以pcDNA-VP3质粒为模板，扩增出凋亡素VP3基因。将其克隆到原核表达载体pET-DsbA的多克隆位点，构建成凋亡素的高效原核表达栽体pET-DsbA-VP3，将该质粒转化到大肠杆菌E．coliBL21(DE3)plysS中，以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside，IPTG)对其进行诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。结果 转化有凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3的大肠杆菌E．coliBL21(DE3)plysS经IPTG诱导后，聚丙烯酰胺凝胶电泳出现38300的目的蛋白条带。结论 凋亡素原核表达栽体pET-DsbA-VP3能高效表达出凋亡素融合蛋白。     

X连锁凋亡抑制蛋白与肝细胞肝癌的研究进展

X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP,又称human IAP-like protein,hILP）是凋亡抑制蛋白家族（inhibitor of apoptosis proteins,IAPs）中的其中一个重要成员。IAPs首先在杆状病毒中发现,能抑制感染病毒的宿主细胞凋亡,随后逐渐发现在人类及其他物种中广泛存在。XIAP与杆状病毒IAPs有高度同源性,均具有显著的抗凋亡作用。     

腹腔灌洗对重症急性胰腺炎APACHEⅡ评分和腹痛的影响

目的 探讨腹腔灌洗对重症急性胰腺炎(SAP)患者急性生理和慢性健康评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分和腹痛的影响.方法 灌洗组32例SAP患者进行腹腔灌洗,对照组39例,均行综合内科治疗,比较两组患者的APACHEⅡ评分和腹痛评分.结果 两组治疗前APACHEⅡ评分和腹痛评分差异无显著性意义(P＞0.05).治疗第1～3天灌洗组APACHEⅡ评分较对照组显著降低 (P＜0.01),第4～5天无显著性差异.治疗后灌洗组腹痛评分均较对照组明显下降(P＜0.05 ).结论 腹腔灌洗可以降低SAP患者的APACHEⅡ评分和改善腹痛.     

375例恶性肿瘤化疗病人院内感染分析

恶性肿瘤化疗病人是院内感染的高危人群,对此种病人特点的分析,有助于我们认识其易患危险因素,并通过对危险因素的控制,有效地减少院内感染的发生。1　临床资料1.1　一般资料我院1996年至1998年病理诊断为恶性肿瘤的住院化疗病人共375例,按《医院感染学》[1]中的所附标准确定诊断。病例调查采用回顾性分析,数据用ＳＰＳＳ软件处理。1.2　各年龄段院内感染的发病情况见表11.3　住院时间与院内感染的关系见表2表1　各年龄段感染情况年龄(岁)例　数感　染%<207228.57～30311341.94～40841315.48～5010898.33～6077911.69>60681319.12合计375591…     

内镜下胃内血液清除术在急性上消化道出血中的应用

18例患者在常规急诊内镜检查时,发现大量血液影响观察,连通洗胃机,进行内镜直视下胃内血液清除,清除后进行内镜下检查和内镜治疗。结果均能发现出血病灶,其中存在多发出血病灶者9例,18例均进行了内镜下止血治疗,17例有效止血。     

凋亡素基因对人结肠癌细胞作用的研究

目的探讨凋亡素基因的导人对人结肠癌细胞的影响。方法将凋亡素基因VP3克隆人真核表达载体pEGFP-C2，构建成重组质粒pEGFP-VP3。用脂质体转染法将pEGFP-C2和pEGFP—VP3分组分别转染人类结肠癌细胞（Lovo）和小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3），通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同组细胞中的定位、表达及细胞的生长、凋亡情况，MTT法测定不同组细胞的生长曲线，并用AnnexinV—FITC流式细胞技术检测细胞的凋亡率。结果在Lovo／EGFP组和3T3／EGFP—VP3组细胞中，EGFP均匀分布于细胞中，细胞形态无明显变化，细胞凋亡率较非转染细胞组亦无明显增加。而在Lovo／EGFP-VP3组细胞中，EGFP-VP3以荧光颗粒形式集中在细胞核，并逐渐变粗，最后细胞碎裂成片状，流式细胞技术检测Lov0／EGFP-VP3组的细胞凋亡率明显高于其他对照组（P〈0．01）。结论pEGFP-VP3可诱导人类结肠癌细胞凋亡。     

软式内镜经脐路径腹腔灌洗透析治疗重症急性胰腺炎73例

目的 探讨软式内镜经脐路径腹腔灌洗透析对重症急性胰腺炎(SAP)的治疗作用.方法 73例SAP患者在常规综合治疗的基础上给予软式内镜经脐路径腹腔灌洗透析治疗.比较治疗前后腹膜刺激征评分、APACHE-Ⅱ评分、腹腔内压力(IAP)的变化及肠鸣音恢复情况;比较治疗前后血白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)水平及腹腔积液/腹膜透析液中总蛋白、有核细胞和淀粉酶水平的变化;统计住院时间及预后.结果 本组患者治愈69例(94.5%),转科4例(5.5%),住院(15.15±3.80)d.治疗后,肠鸣音次数显著增加,腹膜刺激征评分、APACHE-Ⅱ评分及IAP显著降低(P<0.05);血WBC、CRP水平及腹腔积液/腹膜透析液中总蛋白、有核细胞计数、淀粉酶含量显著下降(P<0.05).结论 软式内镜经脐路径腹腔灌洗透析治疗SAP创伤小,对急性反应期并发有腹膜炎、肠麻痹、腹腔内高压/腹腔间隔室综合征、急性肺损伤等并发症的SAP患者疗效显著,并且早期治疗效果好.     

糖尿病的护理

当前治疗糖尿病的手段主要包括宣传教育、饮食治疗、药物治疗和适量的运动四大内容，其中以宣传教育作为重要部分。护理人员除了照顾和护理病人外，更重要的是成为病人的督促者、教育者。     

内镜下尼龙圈套扎治疗急性非静脉曲张消化道出血

目的探讨内镜下尼龙圈套扎治疗（ENLL）在急性非静脉曲张消化道出血治疗的可行性和有效性。方法选择24h内有活动性非静脉曲张消化道出血患者56例，对出血病灶进行内镜下尼龙圈套扎治疗。结果56例患者巾24例为活动性出血，其中23例即时止血成功（95．9％）。无严重并发症发生。结论ENLL是一种治疗急性非静脉曲张出血的有效方法。     

凋亡素基因序列重组及其真核表达载体的构建

目的 构建携带Kozak序列的重组凋亡素基因VP3表达载体，为提高凋亡素基因在肿瘤细胞中的表达效率，增强其诱导肿瘤细胞凋亡的生物学活性奠定实验基础。方法 通过两次PCR，以pcDNA-VP3质粒为模板．扩增出带Kozak序列(真核核糖体结合位点)的凋亡素基因VP3。将其克隆到真核表达载体pRevTRE的多克隆位点，构建重组凋亡素的真核表达载体pRevTRE-VP3，将该重组表达载体分别以限制性内切酶BamHI和XhoI进行酶切鉴定，进一步将初步鉴定显示插入目的基因的质粒进行测序鉴定。结果 测序结果表明，本研究合成的凋亡素基因与Notebom报告的凋亡素基因序列一致，同源性为100％。在其起始密码子前添加了Kozak序列的凋亡素基因已成功克隆到真核表达载体pRevTRE。结论 采用两次PCR法可将提高表达效率的真核核糖体结合位点添加到凋亡素基因序列起始密码子前端，并构建成凋亡素真核表达载体。