C—myc在正常人外周血淋巴细胞及肿瘤细胞株上的表达

探讨癌基因Ｃ－ｍｙｃ在正常人外周血淋巴细胞及肿瘤细胞株上的表达情况。方法：分离正常人外周血淋巴细胞及肿瘤细胞株ＲＮＡ,利用反转录聚合酶链反应技术,比较正常人与肿瘤细胞株Ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达程度。结果：ＨＬ－６０细胞系Ｃ－ｍｙｃＲＮＡ表达最强,ＧＢＣ胃癌细胞株较正常人为高。结论：Ｃ－ｍｙｃ参与了正常、异常细胞生长的调节。     

人乳头状瘤病毒亚型PCR/RDB基因分析方法的建立及初步评价

目的建立一种基于PCR和RDB技术的临床实用、价格低廉、能对目前已知的绝大多数高危型及常见的低危型人乳头状瘤病毒(HPV)进行基因分型的检测方法(PCR/RDB法),并对该方法用于HPV分型检测做出方法学评价。方法根据HPV基因序列设计可扩增包含目前常见的HPV型别的通用引物,并根据14种HPV高危亚型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68)和7种低危亚型(6、11、42、43、44、53、CP8304)的序列特点设计针对这21种HPV型别的型特异性探针。21种HPV亚型标准毒株PCR产物与HPV型特异性探针进行杂交,建立一次性对21种HPV亚型进行分型的PCR/RDB检测方法。将PCR/RDB法用于213例经杂交捕获法(hybird capture,HCⅡ)检测为高危型HPV阳性样本的HPV型别诊断。结果建立的PCR/RDB法均能鉴定出21种HPV亚型,无假阳性和假阴性结果,未出现交叉反应;含有相当于10个以上HPV分子的质粒标准品均能成功获得PCR产物检测的阳性结果;盲法分析结果显示,195例经HCⅡ法检测为高危型HPV阳性的样品被PCR/RDB检测出具体的HPV型别,共检测出13种高危型HPV亚型,检出率分别是32.31%(16型)、23.08%(52型)、17.95%(58型)、11.79%(31型)、10.26%(68型)、9.74%(33型)、8.21%(18型)、6.15%(66型)、3.08%(59型)、2.05%(45型)、2.05%(39型)、1.54%(56型)、1.03%(51型)。单一HPV亚型感染及2种、3种和4种HPV亚型混合感染构成比分别为59.46%、30.81%、8.65%和1.08%。18例未能检测出HPV的具体型别,PCR/RDB法与HCⅡ法的高危型HPV检测结果的符合率为91.5%(195/213)。结论PCR/RDB法与HCⅡ法高危型HPV检测阳性符合率高,并可一次性分析出21种HPV型别,是一种准确、高效、经济的HPV型别检测方法,可用于HPV的常规基因型分型诊断及人群筛查。     

应用多重连接依赖探针扩增技术对脊髓性肌萎缩患者及致病基因携带者进行基因诊断

目的探讨多重连接依赖探针扩增（MLPA）技术对脊髓性肌萎缩（SMA）患者及携带者基因检测的临床应用价值,为进一步创建可靠的SMA产前诊断技术平台奠定基础。方法运用MLPA技术对6例SMA患者及双亲进行运动神经元生存基因（survival of motor neuron gene,SMN）检测,用PCR限制性内切酶片段长度多态性技术（PCR-RFLP）和DNA测序技术对MLPA检测结果进行验证。结果 MLPA试剂盒P021-A1检测6个患者中4个患者为SMN1的外显子7和外显子8缺失纯合子,2个患者为SMN1外显子7缺失纯合子;6例患者的12名双亲的SMN信号值均明显比正常对照组低30%～50%。同时还检测出部分患者及携带者GTF2H2（BTF2p44）和BIRC1（NAIP）基因存在病变。P060-A2检测出12名携带者SMN1信号比正常对照组降低30%～50%,其中3名合并BIRC1基因信号降低。PCR-RFLP和DNA测序技术支持MLPA有关SMN基因检测结果。结论 MLPA技术能对SMA患者及携带者进行快速可靠的基因诊断。通过MLPA技术分析SMN邻近基因的基因突变和（或）缺失情况,为SMA患者基因型和临床分型诊断提供依据。     

C—myc癌基因在正常人外周血淋巴细胞及肿瘤细胞株上的表达

目的 探讨癌基因Ｃ－ｍｙｃ在正常人外周血淋巴细胞及肿瘤细胞株上的表达情况。方法 分离正常人外周血淋巴细胞，采用异流握酸胍一步法提取正常人外周血淋巴细胞及肿瘤细胞株ＲＮＡ，利用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术。比较正常人与肿瘤细胞株Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达程度。结果 ＨＬ－６０细胞系Ｃ－ｍｙｃＲＮＡ表达最强，ＧＢＣ胃癌细胞株较正常人为高。结论 Ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达程度。结果 ＨＬ－６０细胞系     

完全型雄激素不敏感综合征雄激素受体基因突变分析

目的 对完全型雄激素不敏感综合征一家系雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行突变检测;并对发现突变的基因进行分析.方法 应用PCR扩增、DNA序列测定等技术分析所有AR基因外显子及其邻近DNA序列片段;应用核苷酸内切酶诊断方法观察其是否存在于正常人群;应用跨物种比对方法探讨突变所在位置的保守性.结果 3例患者AR基因第4外显子均发生E681D(GAG→GAT)错义突变,患者母亲为此突变杂合子携带者;患者父亲未见异常;正常人群未发现AR基因E681D突变;681位谷氨酸在不同物种间高度保守.结论 AR基因E681D(GAG→GAT)突变可能是导致完全型雄激素不敏感综合征新的突变方式.     

Molecular and prenatal diagnosis for a Chinese pregnant woman with a novel mutation of β thalassemia

Objective To conduct molecular and prenatal diagnosis for a couple with β thalassemia.Methods Blood routine examination and hemoglobin analysis were used for screening of thalassemia. Seventeen common Chinese mutations of β thalassemia were detected for the carriers with β thalassemia using PCR/RDB. The unknown mutation of β thalassemia was identified by DNA sequencing and DHPLC analysis. Results The husband was heterozygote of CD41/42(-TCTT). The wife carried a mutation IVS- Ⅰ -110(G→A)of β thalassemia having not been reported in Chinese so far. The fetus was a double mutated heterozygote of IVS- Ⅰ -110(G→A)and CD41/42(-TCTT). The pregnancy was terminated. Conclusion Mutation IVS- Ⅰ -110(G→A)of β thalassemia in Chinese is of importance to the genetic counseling and prenatal diagnosis of thalassemia.     

人附红体的电镜特点及附红体病的临床治疗观察

附红细胞体 (Ｅｐｅｒｙｔｈｒｏｚｏｏｎ简称附红体 )是寄生于人和动物红细胞表面、血浆及骨髓中的一群多形态的微生物。192 8年Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇ和Ｄｉｎｇｅｒ首次在啮齿类动物中查到了附红体。以后相继在其它动物和家畜中也证实了有附红体感染的存在[1～ 3 ] ,。迄今为止     

人类乳头瘤病毒亚型dHPLC基因分型方法的建立

目的:对高危型人类乳头瘤病毒(HPV)亚型进行基因分型,并进行分子流行病学分析。方法:建立9种高危型HPV亚型(即82亚型、52亚型、16亚型、31亚型、59亚型、58亚型、53亚型、51亚型、45亚型)重组质粒PCR扩增产物dHPLC标准分离图谱。按标准方法提取194例子宫颈脱落细胞标本DNA,PCR扩增,产物进行dHPLC分析,记录各标本分离峰的出现时间,并与HPV重组质粒dHPLC参照分离图形进行比较,作出临床标本HPV亚型诊断。结果:在194例临床标本中,各HPV亚型的检出率为:16亚型32.47%、52亚型23.20%、58亚型18.04%、31亚型11.86%、53亚型8.25%、59亚型3.09%、45型(2.06%)、51型(1.03%),未发现82亚型。结论:HPV基因L1区通用引物PCR扩增产物结合dHPLC分析,可进行常见高危型HPV亚型分析。     

PCR-高效液相色谱法检测线粒体DNA A1555G突变

目的 探讨PCR-变性高效液相色谱(PCR-DHPLC)分析技术在检测线粒体(mt)12S rRNA 基因第1 555位A-G均质点突变中的应用.方法 4例临床诊断为氨基糖苷类抗生素耳聋的患者及40例听力正常体检者,分别运用PCR-DHPLC技术、酶切技术及DNA测序技术进行mtDNA1555位点检测.结果 PCR-D...     

婴幼儿血清呼吸道病毒抗体检测分析

为满足临床快速检测呼吸道病毒的需要,我院于2003年8月起采用ELISA法对临床住院的呼吸道感染患儿进行其血清呼吸道病毒IgA、IgC抗体的检测。包括腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、A型流感病毒(INF A)、B型流感病毒(INF B)、副流感病毒1～4型(PIN_(1-4))。现已检测了585例,报告如下: