阿米洛利与白藜芦醇对肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨阿米洛利、白藜芦醇对大鼠肝脏缺鲥再灌注损伤的保护作用。方法取成年SD大鼠48只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、不同剂量阿米洛利、白藜芦醇药物处理组。按Pringle法建立全肝缺彬再灌注模型。6h后取血,测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性和超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,并取肝叶制作冰冻切片,HE染色观察其组织形态。结果与假手术组相比,肝缺血／再灌注组大鼠血清中AST、AIJT活性增强,SOD活性下降,MDA含量增加。白藜芦醇和阿米洛利组与缺血／再灌组相比,肝脏功能损伤较轻．AST、ALT活性下降,SOD活性增强,MDA含量下降,且有剂量依赖性。白藜芦醇和阿米洛利纽病理损害较缺血再灌注组明显减轻。结论白藜芦醇与阿米洛利对肝缺血／再灌损伤有保护作用,对临床治疗缺血性肝损伤有潜在的应用价值。     

微小RNA-23a调节前列腺癌细胞骨架蛋白的分子机制

目的 探讨微小RNA-23a(miR-23a)影响前列腺癌细胞骨架迁移及侵袭行为的分子机制.方法 PC-3前列腺癌细胞转染siPAK6、miR-23a模拟物,48 h后以共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变;Western blot法检测LIMK1、磷酸化LIMK1( p-LIMK1)、丝切蛋白(cofilin)和磷酸化丝切蛋白(p-eofilin)蛋白的表达.结果 转染siPAK6组及miRNA-23a组PC-3细胞骨架的应力纤维均明显减少,肌动蛋白形态皱缩.Western blot检测显示转染siPAK6组的p-LIMK1、p-cofilin的表达分别下降75％、80％(P＜0.01),而LIMK1、cofilin表达量无明显变化(P＞0.05);转染miRNA-23a组的p-LIMK1、p-cofilin的表达分别下降60％、70％ (P ＜0.01),LIMK1、cofilin的表达量无明显变化(P＞0.05).结论 miR-23a可通过p21活化激酶6(PAK6)-LIMKl-cofilin信号通路,影响前列腺癌细胞骨架的重构,抑制癌细胞迁移及侵袭能力.     

结节性硬化症细胞株TSC2-/-MEFs和正常细胞株TSC2+/+MEFs微小RNA表达谱的差异分析

目的：结节性硬化症是由于TSC1和TSC2基因突变导致累及多个器官、系统的常染色体显性遗传疾病,TSC2突变更为常见而且临床表型更为严重。为探讨结节性硬化症细胞株TSC2-/- MEFs与正常细胞株TSC2+/+ MEFs中微小RNA（microRNA,miRNA）表达谱的差异,以进一步研究相关miRNA在结节性硬化症发病机制中的作用奠定基础。方法：体外培养结节性硬化症细胞株TSC2-/- MEFs和正常细胞株TSC2+/+ MEFs,各选取3个样本分别作为实验组和对照组。用TRizol法提取细胞的总RNA,以紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳对RNA进行质量检测。采用miRNA芯片筛选两者之间差异表达的miRNA,样品间表达变化标准以上调至原2倍或下调至原1/2作为阈值范围,并以实时定量PCR验证miRNA芯片结果的可靠性。CCK-8法测定细胞增殖活性。 结果：在结节性硬化症细胞株TSC2-/- MEFs中,上调≥原2倍差异表达的miRNA分子有14个,下调≤原1/2差异表达的miRNA分子有26个。miRNA-199a-5p在TSC2-/- MEFs显著低表达,过表达miRNA-199a-5p可显著抑制TSC2-/- MEFs细胞增殖。结论：结节性硬化症细胞株TSC2-/- MEFs和正常细胞株TSC2+/+ MEFs存在差异表达miRNA分子。miRNA-199a-5p参与结节性硬化症的发生、发展,可能是防治结节性硬化症的重要分子靶点。     

腹腔镜肾部分切除术治疗巨大囊实性肾占位(附5例报告)

目的:探讨腹腔镜肾部分切除术治疗巨大囊实性肾占位的临床疗效及安全性。方法:回顾分析2018年4～7月为5例直径≥7 cm的巨大囊实性肾占位患者行腹腔镜肾部分切除术的临床资料,其中2例行经腹腹腔镜肾部分切除术,3例行经腹膜后肾部分切除术;男4例,女1例,平均(39.8±12.1)岁,肾占位最大径平均(7.6±0.7) cm,术前肌酐平均(88.6±16.9)μmol/L。分析手术时间、热缺血时间、术中出血量、切缘阳性率、住院时间、并发症情况及术后病理结果、肾功能恢复等情况。结果:5例均顺利完成腹腔镜肾部分切除术。手术时间平均(226±32) min,热缺血时间平均(41.6±8.8) min,术中出血量平均(256±227) mL,术后平均住院(6.6±0.8) d。术后第8天1例患者出现肾周血肿。病理结果示透明细胞癌3例、多房囊性肾瘤1例、肾结核肉芽肿性炎1例。术后1周血肌酐平均(99.6±18.9)μmol/L,与术前相比差异无统计学意义。结论:具备丰富手术经验的术者,腹腔镜肾部分切除术治疗巨大囊实性肾占位安全、可行,近期疗效显著,围手术期肾功能无明显变化。     

上尿路结石所致急性梗阻性肾功能不全的微创手术治疗

目的 探讨微创手术治疗上尿路结石致急性梗阻性肾功能不全、肾积脓感染的临床效果.方法 回顾性分析2009年5月至2012年9月收治的30例上尿路结石所致的急性上尿路梗阻性肾功能不全患者.30例均合并肾积脓感染,其中予以急诊行输尿管镜下逆行插管引流21例,经皮肾穿刺造瘘9例,配合全身应用三代头孢抗生素治疗.术前及术后记录生命体征及尿量变化,检查血像及肾功能等指标.结果 全部输尿管逆行插管引流术和经皮肾造瘘术均顺利完成,所有患者均成功解除了尿路梗阻,无邻近脏器损伤或大出血、败血症等严重并发症.术后生命体征改善,急诊解除梗阻后血尿素氮(BUN)由(23.2±3.8) mmol/L降至(5.6 ±2.2) mmol/L、血清肌酐(Scr)由(472.3± 142.5) μmol/L降至(54.8±22.3)μmol/L,尿量明显增加,肾功能改善,手术前后比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 上尿路结石引起肾功能不全合并肾感染积脓的处理原则是早期解除梗阻,联合全身抗感染治疗.输尿管插管引流术与经皮肾造瘘术均是有效的微创治疗方法.     

单孔腹腔镜下无功能肾切除术的应用体会

腹腔镜下肾切除手术已成为临床治疗无功能性萎缩肾的常用术式[1]。单孔腹腔镜手术(laparoendoscopic single-site surgery,LESS)是最近应用于临床的新术式,传统腹腔镜肾切除术需要3～5个戳口,但LESS通过自然腔道或仅需单一的体表切口进行操作,减少了患者的伤口数,皮肤美容效果较佳[2-3],受到部分有美容需求患者的欢迎和选择。本组近期应用LESS开展无功能     

1例以皮肤损害为首发症状的结节性硬化症并多学科讨论

报告1例以面部血管纤维瘤为首发症状的结节性硬化症病例并进行多学科讨论。患者为年轻女性,以皮肤美容为目的就诊于皮肤科。完善辅助检查后发现该患者全身多器官受累,其中包括巨大的肾血管平滑肌脂肪瘤压迫肝脏。患者无任何自觉症状。经中南大学湘雅医院结节性硬化症多学科团队会诊后,给予患者口服依维莫司治疗,并定期随访。皮肤科医师需要关注以皮肤损害为首发症状的结节性硬化症患者全身各器官受累的情况,以早期治疗内脏病变,延长患者的生命,改善患者的生活质量。多学科协作对该病进行终身的疾病管理是提高结节性硬化症的诊治水平,改善患者预后的关键。     

美满霉素治疗非淋菌性尿道炎及前列腺炎的应用评价

目的探讨美满霉素治疗非淋菌性尿道炎与前列腺炎的临床疗效。方法尿道炎和前列腺炎患者各60例,各随机分配为研究组和对照组。其中研究组尿道炎30例,前列腺炎30例,以美满霉素胶囊口服治疗10d;对照组尿道炎30例,前列腺炎30例,以环丙沙星片剂口服治疗10d。停药2周后,复诊观察临床症状改变情况及检测病原体,并进行统计学分析。结果研究组的病原菌清除率为83.3%,明显高于对照组53.3%（P〈0.01）;研究组尿道炎和前列腺炎的总有效率分别为96.7%和90.0%,明显高于对照组的56.7%和53.3%（P〈0.01）。大部分患者无明显副作用。结论美满霉素胶囊治疗非淋菌性尿道炎及前列腺炎有较满意的疗效,副作用较小。     

微小RNA-23a-p21活化激酶6通路对前列腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响

目的 探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与前列腺癌侵袭及迁移的关系.方法 生物信息学预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blot 法及实时定量逆转录-聚合酶链反应( Real-time PCR)检测PC-3细胞PAK6的表达,荧光素报告酶实验检测预测miRNA对PAK6的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 生物信息学预测miRNA-23a可能是调控PAK6的靶miRNA. Western blot检测转染miRNA-23a组PAK6表达量下降79％,而转染miRNA-23a抑制剂组PAK6表达量上升40％,差异均有统计学意义(P＜0.05).荧光素报告酶实验结果显示,转染miRNA-23a后野生型PAK6组荧光素酶活性下降32％,而突变组差异无统计学意义(P＞0.05).Real-time PCR检测3组PAK6 mRNA的表达,差异无统计学意义(P＞0.05).体外迁移及侵袭实验示,转染miRNA-23a组迁移细胞数减少57％,侵袭的细胞数减少91％.结论 微小RNA-23a通过下调靶蛋白PAK6的表达从而引起前列腺癌迁移及侵袭能力下降.     

前列腺癌miRNA表达谱及miR-96在氧化应激信号通路中的作用

【目的】 检测miRNA在前列腺癌与正常前列腺组织的表达差异,并探讨表达异常的miRNA在前列腺癌发病中的作用?【方法】 前列腺癌和正常前列腺组织样品(100 mg),Trizol法提取RNA,应用聚合酶链反应(PCR)芯片检测miRNA的表达;同时以250 μmol/L的过氧化氢(H2O2)刺激前列腺癌PC-3细胞4 h,继续正常培养12 h?检测不同时间点细胞内活性氧(ROS)水平,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-96在各组细胞中的表达?【结果】 与正常前列腺组织相比,前列腺癌组织中miR-144?miR-216a上调5.9倍,miR-96上调30.4倍,miR-488?miR-873下调到4.9%,差异有统计学意义(P < 0.05)?PC-3细胞内ROS为RWPE-1细胞的5.2倍(P < 0.05),miR-96在PC-3细胞中的表达为RWPE-1细胞的15.4倍(P < 0.05)?H2O2刺激PC-3细胞1?4 h后,胞内ROS为对照组的4.3?6.4倍(P均 < 0.05),miR-96表达水平为对照组的10.2?18.9倍(P均 < 0.05);10?16 h组胞内ROS为对照组的2.5倍?1.2倍,miR-96表达水平为对照组的2.7?1.9倍(P均 > 0.05)?【结论】 在前列腺癌组织中发现了若干有表达差异的miRNA;miR-96参与前列腺癌细胞的氧化应激信号途径,可能是防治前列腺癌的重要分子靶点?