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为了建立一种能广泛应用于临床快速、简便、灵敏度和特异性较好的风疹病毒(RV)定量诊断方法。针对RV基因保守序列设计两对引物和一条荧光双标记探针。将PCR扩增所得到的产物片段克隆,作为定量检测的标准品,进行Real-time PCR检测,绘制标准曲线。将此方法和ELISA试剂盒平行检测50份孕妇血清,评估两种方法检出阳性率的差异显著性。Real-time PCR法能较好地检出RVcDNA载量。曲线的相关系数(r)为0.998,可检测线性范围大约在103~109copies/μl,灵敏度接近103copies/μl;批间、批内CV值分别为3.36%、0.94%;也有较好的特异性。与经典的ELISA方法相比,有显著性差异。Real-time PCR方法操作简单、快速,并能避免PCR后处理导致的假阳性污染,实现实时定量。此方法对RV感染的临床诊断和疗效判断等方面有较大的指导意义。 相似文献
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风疹病毒 (RV)是一种导致全球性传染病、给人类健康带来极大危害的病原体。现分别对该病毒分离、血清学诊断、分子生物学检测技术作简要介绍 ,并对不同来源标本作简要比较 ,从中得到最佳检测标本。目前的检测方法都或多或少存在一些不足之处 ,但随着荧光定量PCR的出现 ,其早期、快速、定量的特点使其有望取代传统方法 ,成为RV临床感染早期诊断的新技术。 相似文献
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检验项目比对之初探 总被引:3,自引:3,他引:0
目的通过对同一项目不同仪器检测结果进行分析,以期了解不同仪器检测结果的准确性和结果不一致的可接受限。方法以参加室间质评而且成绩优秀的仪器为参比仪器,其他仪器为待比对仪器,其结果以美国临床实验室修正法案(CLIA′88)规定的室间质量评价允许误差的1/2为标准进行比较分析。结果生化检测项目和血凝部分结果及血细胞分析中的WBC、RBC、Hb、PLT等不同仪器之间的结果有很好的相关性,r均在0.975~1.000之间,血细胞分类则形成明显的两大趋势:所有三分类血球仪的分类结果和显微镜下的分类结果有很好的相关性,r在0.909~O.919之间,但与五分类血球仪的分类结果存在明显的差异(P%0.01);凝血酶时间(TT)结果则相差甚远(P〈O.01)。结论本室所有同一项目不同仪器检测的结果除血细胞分类结果和TT外,其他项目的结果均可接受,五分类血球仪的细胞分类需调试,TT结果的准确性有待进一步提高。 相似文献
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