呼吸道黏蛋白MUC5AC表达调控的研究进展[综述]

MUC5AC是呼吸道黏液中重要的黏蛋白，感染、炎症因子、环境污染物等多种因素可在转录、转录后和表观遗传等多水平实现对其表达调控。在多种气道黏液高分泌疾病，如哮喘、慢性阻塞性肺疾病、慢性鼻窦炎的发生、发展及预后中，MUC5AC表达异常发挥重要作用。随着研究的不断深入，对MUC5AC的表达调控是临床诊疗和新药研发的重要靶点。本文就黏蛋白生理特点、MUC5AC表达调控机制及在呼吸道疾病中的研究进展做一综述。     

阿尔茨海默病患者β淀粉样肽40人单链抗体在大肠杆菌的表达和纯化

目的：重组表达并纯化抗β淀粉样肽40的人单链抗体，为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料。方法：实验于2004-08／2005-03在核医学实验室完成。自制人单链抗体基因。将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗p淀粉样肽40人单链抗体基因，克隆到pET22b（&;#177;）质粒，转化BL21-gold大肠杆菌，经0．5mmol／L异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导表达抗β淀粉样肽40的人单链抗体。采用Ni^2&;#177;-NTA-树脂柱亲和纯化尿素变性的包涵体内表达产物，经柱上复性，含咪唑缓冲液洗脱获得人单链抗体。应用Western blot和酶联免疫吸附实验鉴定纯化的抗β淀粉样肽40的人单链抗体。用Branford法测定纯化抗体的浓度。结果：①抗β淀粉样肽40人单链抗体基因长度约为750bp，重组表达产物相对分子质量33000.②经过一次亲和柱纯化，从细菌包涵体中纯化出高纯度的抗β淀粉样肽40人单链抗体。③酶联免疫吸附实验分析表明纯化单链抗体和β淀粉样肽40结合的A595nm。高于对照，差异显著（0．59&;#177;0．06，0．12&;#177;0．02，P〈0．05），表明从包涵体中纯化出来β淀粉样肽40人单链抗体保持了结合抗原的免疫活性。纯化β淀粉样肽40人单链抗体浓度为96mg／L。结论：抗β淀粉样肽40的人单链抗体在大肠杆菌系统得以重组表达，利用亲和层析成功获得高纯度的重组单链抗体。     

人膜联蛋白V的重组表达与细胞凋亡显像

移植肿瘤模型的研究表明,化疗和放疗对肿瘤的杀伤效应是通过对细胞凋亡过程的迅速诱导来实现的[1]。膜联蛋白V(Annexin-V)结合细胞膜磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl-serine,PS)。PS是组成型的阴离子细胞膜磷脂,在正常情况下,它位于细胞膜脂质双层结构的内侧,而启动程序性细胞死亡的     

呼吸道黏蛋白MUC5AC表达调控的研究进展

MUC5AC是呼吸道黏液中重要的黏蛋白,感染、炎症因子、环境污染物等多种因素可在转录、转录后和表观遗传等多水平实现对其表达调控。在多种气道黏液高分泌疾病,如哮喘、慢性阻塞性肺疾病、慢性鼻窦炎的发生、发展及预后中,MUC5AC表达异常发挥重要作用。随着研究的不断深入,对MUC5AC的表达调控是临床诊疗和新药研发的重要靶点...     

中药治疗结核病临床评价的Meta分析

目的 采用Meta分析综合评价基于随机对照临床试验中药治疗结核病临床疗效,研究中药治疗与结核病治疗结局的相关性。方法 在中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库（Wanfang Data）、PubMed、EMBASE、The Cochrane Library数据库中,采用主题词检索的方式检索有关中药治疗结核病的随机对照临床试验（randomized controlled clinical trials, RCTs）检索时间为建库截至2022年1月30日。采用改良Jadad评分对纳入文献的质量进行评价,以比值比（odds ratio, OR）及95%可信区间（confidential interval, CI）比较试验组和对照组治疗效果,采用漏斗图和Begg检验评价发表偏倚。应用Revman5.4和Stata12.0软件统计分析。结果 对10项RCTs文献进行定性分析,其中, 4篇RCT报道芩部丹治疗,样本量共517例,试验组261例,对照组256例。4篇RCT报道芪甲利肺治疗,样本量共473例,试验组239例,对照组234例。2篇RCT报道益肺通络辅助治疗,样本量共有325例,试验组...     

阿尔茨海默病患者β淀粉样肽40人单链抗体在大肠杆菌的表达和纯化

目的:重组表达并纯化抗β淀粉样肽40的人单链抗体,为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料。方法:实验于2004-08/2005-03在核医学实验室完成。自制人单链抗体基因。将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗β淀粉样肽40人单链抗体基因,克隆到pET22b( )质粒,转化BL21-gold大肠杆菌,经0.5mmol/L异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导表达抗β淀粉样肽40的人单链抗体。采用Ni2 -NTA-树脂柱亲和纯化尿素变性的包涵体内表达产物,经柱上复性,含咪唑缓冲液洗脱获得人单链抗体。应用Westernblot和酶联免疫吸附实验鉴定纯化的抗β淀粉样肽40的人单链抗体。用Branford法测定纯化抗体的浓度。结果:①抗β淀粉样肽40人单链抗体基因长度约为750bp,重组表达产物相对分子质量33000。②经过一次亲和柱纯化,从细菌包涵体中纯化出高纯度的抗β淀粉样肽40人单链抗体。③酶联免疫吸附实验分析表明纯化单链抗体和β淀粉样肽40结合的A595nm高于对照,差异显著(0.59±0.06,0.12±0.02,P<0.05),表明从包涵体中纯化出来β淀粉样肽40人单链抗体保持了结合抗原的免疫活性。纯化β淀粉样肽40人单链抗体浓度为96mg/L。结论:抗β淀粉样肽40的人单链抗体在大肠杆菌系统得以重组表达,利用亲和层析成功获得高纯度的重组单链抗体。     

PM2.5暴露对慢性鼻窦炎患者鼻黏膜上皮细胞影响的转录组学分析

目的　研究PM2.5暴露对慢性鼻窦炎患者鼻黏膜上皮细胞（human nasal epithelial cells，HNECs）基因表达的影响，并探讨可能作用的机制。方法　6例慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者的HNECs气液交界培养后分为对照组（PBS处理）和PM2.5组（100 μg/ml PM2.5处理），干预24h后提取各组细胞RNA进行转录组学测序（RNA sequencing，RNAseq），筛选差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）并进行基因本体论（gene ontology，GO）及京都基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析，采用实时荧光定量PCR（realtime fluorescence quantitative PCR，RT-PCR）检测关键基因（CYP1A1、CYP1B1）的表达。结果　RNA-seq表明PM2.5组与对照组相比DEGs共279个，其中上调表达76个，下调表达203个，CYP1A1和CYP1B1是排名前两位的上调DEGs，而下调DEGs主要与DNA复制和蛋白质合成相关。通过GO和KEGG富集分析发现DEGs主要参与应激反应、氧结合、脂类物质代谢等，其中细胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）酶起重要作用。RT-PCR结果显示，PM2.5组CYP1A1、CYP1B1表达量显著上调（P<0.05），这与RNA-seq测序结果一致。结论　PM2.5可能通过调控CYP450酶中相关基因的表达，影响脂类物质代谢诱导HNECs氧化应激和促炎反应。