恐惧应激对大鼠睾丸中Annexin5表达的影响

目的观察大鼠应激条件下睾丸组织中Annexin5表达的变化。方法建立SD大鼠的恐惧应激模型，分别取急性应激、急性对照、慢性应激、慢性对照SD大鼠睾丸，免疫组织化学和Western blotting分析Annexin5免疫定位和蛋白表达。结果急性应激组与对照组相比，免疫组化显示Annexin5都定位在间质细胞、支持细胞和成熟的精子头部，Western blotting分析发现Annexin5的表达降低了10．8％；慢性应激组与对照组相比，免疫组化结果显示Annexin5在精子头部的定位逐渐减少，应激1w和2w组，未见到Annexin5定位于精子头部，到了应激的3w和4w，发现Annexin5重新定位于精子的头部，而在间质细胞和支持细胞上的定位模式没有显著变化。Western blotting分析发现Annexin5的表达降低了17．4％。结论大鼠睾丸Annexin5参与了应激过程，急性应激条件下Annexin5表达降低。随着应激时间的延长，在慢性应激条件下，Annexin5的表达由减少之后而开始有缓慢增加。     

点刺牵拉活鳝鱼治疗周围性面神经麻痹

点刺牵拉活鳝鱼治疗周围性面神经麻痹（２７７１０１）山东省枣庄市市中区人民医院蒋超周围性面神经麻痹是一种常见病。主要临床表现为一侧面部表情肌运动功能障碍，部分患者伴有同侧舌前２／３味觉减退。３年来，笔者采用点刺牵拉活鳝鱼治疗周围性面神经麻痹１６０例，疗...     

菟丝子、莱菔子与其易混淆品的快速PCR法鉴别研究

完善快速PCR鉴定检测体系,并建立菟丝子或莱菔子的分子鉴别方法。收集不同地区的菟丝子、莱菔子及其易混淆品材料,所有样品进行总DNA的提取,通过对菟丝子、莱菔子及其易混淆样品ITS片段进行扩增、测序,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,采用2步法进行PCR扩增,从而对菟丝子或莱菔子进行鉴别。通过对影响PCR退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪进行考察,分别获得菟丝子、莱菔子快速PCR反应程序。在稀释后的PCR产物中加入SYBR GreenⅠ染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光,且可有效的避免因引物二聚体而存在的假阳性问题。快速PCR方法可以简单快速鉴别菟丝子、莱菔子,为实现药材分子鉴别的现场运用提供技术支撑。     

三级语言指令训练方法在老年脑卒中失语症患者康复中的应用

目的 探讨三级语言指令训练方法对老年脑卒中失语患者语言功能恢复的效果.方法 选择2018年4月-2019年6月复旦大学附属华山医院老年科收治的脑卒中后失语患者100例,采用随机数字表法分为观察组(n=50)和对照组(n=50).对照组采用常规治疗和常规语言干预的方式,观察组在对照组的基础上,遵循循序渐进的康复理念,进行...     

金银花种质资源DNA身份证构建及遗传相似性分析

利用22对SSR引物对20个产地58个金银花农家种进行扩增,从中筛选出7对多态性较强、扩增带型稳定的引物建立金银花种质资源DNA身份证。结果表明,7对核心引物可将58个金银花农家种区分。采用Pop Gene32(vesion1.32)软件包对58个金银花农家种进行遗传相似性分析,相似系数变异范围为0.366 7~0.916 7。依据相似系数,可反映58个金银花农家种之间的亲缘关系,并将58个农家种遗传一致性分为4类,为金银花的优良种质选育提供参考信息,为中药材道地性研究提供理论依据。     

金银花类药用植物IspE和IspH基因克隆和生物信息学分析

目的:克隆金银花类药用植物4-二磷酸胞苷-2-C-甲基赤藓糖激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,IspE)和4-羟基-3-甲基-2-邻苯基二磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase,IspH)基因,并对其基因序列、蛋白特性和转录活性进行分析、比较.方法:从忍冬Lonicera japonica转录组测序结果中分析获得了IspE,IspH基因.分别以忍冬、红白忍冬L.japonica var.chinensis、红腺忍冬L.hypoglauca和水忍冬L.dasystyla新鲜花蕾为材料,利用RT-PCR技术克隆获得了4种金银花类药用植物IspE和IspH基因的全长cDNA.运用生物信息学分析软件,预测编码蛋白的结构和功能,并通过RT-PCR检测IspE和IspH在忍冬、红白忍冬、红腺忍冬、水忍冬花蕾中的转录情况.结果:金银花类药用植物IspE基因含有1个完整的开放阅读框,长度为1 221 bp,编码406个氨基酸;IspH含有一个完整的开放阅读框,长度为1 380 bp,编码459个氨基酸.IspE和IspH均为非分泌蛋白,均定位于叶绿体中.RT-PCR分析结果表明在忍冬、红腺忍冬和水忍冬的花蕾中IspE,IspH基因的转录水平没有显著差异,但红白忍冬花蕾中IspE,IspH基因的转录水平均显著高于忍冬.结论:克隆获得忍冬、红白忍冬、红腺忍冬和水忍冬中IspE,IspH基因,并证实了其在不同金银花类药用植物中的表达,为进一步研究IspE,IspH基因对萜类化合物生物合成和花香气以及颜色的影响奠定了基础.     

且行且珍“膝”

作为人体运动和支持人体站立姿势的最关键的关节之一——膝关节,承受着全身的重量,是人体容易损伤的关节,约占一半以上的运动损伤都涉及膝关节.此外,膝关节骨关节炎是年龄相关性疾病.随着年龄的增大,膝关节患病的机会也随之增多.据统计,60岁以上的人群中有超过50％得过膝关节骨性关节炎,70岁以上的老人中有约60％以上的患病率.因此,不管是年轻人还是老年人,都应该知道如何去保护我们亲爱的膝关节.     

肌内效贴结合康复训练治疗脑卒中后肩手综合征的疗效观察

目的 观察肌内效贴结合常规康复训练治疗脑卒中后肩手综合征的治疗效果。 方法 选取脑卒中后并发肩手综合征I期患者93例,使用随机数字表法分为实验组和对照组,其中实验组47例,对照组46例。2组患者均接受脑卒中后肩手综合征常规康复治疗,实验组在常规康复治疗基础上增加肌内效贴治疗,每周治疗5次,连续治疗3周。于治疗前和治疗3周后由经专业培训的治疗师于双盲条件下采用视觉模拟评分法(VAS)、手部肿胀评定和简式Fugl-Meyer运动功能评定量表（FMA)分别评估2组患者的肩部疼痛程度、手部肿胀程度和上肢运动功能。 结果 治疗3周后,实验组和对照组VAS评分分别为（2.2±0.9）分和（4.3±1.0）分,手部肿胀程度分别为（81.4±10.8）ml和（129.6±6.1）ml,FMA评分分别为（38.9±4.4）分和（35.1±4.9）分,2组与组内治疗前比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,且实验组治疗后的VAS评分和手部肿胀程度与对照组治疗后比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 肌内效贴结合常规康复训练可有效地缓解脑卒中后肩手综合征的患肢疼痛,并减轻水肿。     

双阻滞位点特异性PCR鉴别铁皮石斛及其近缘物种

建立一种快速、准确鉴别铁皮石斛加工制品的方法。该研究通过对Gen Bank数据库收录的铁皮石斛及其同属近缘物种的ITS序列进行对比分析,根据变异位点设计双阻滞位点特异性鉴别引物,并优化PCR条件,对铁皮石斛及其69种近缘种共362个样品进行扩增和检测。结果显示,在退火温度为60℃的同一PCR反应中,铁皮石斛均扩增出397 bp条带,而其他69种近缘物种均无条带,且该方法灵敏度高,检出限可达0.03 mg·L~(-1)。该文所建立的位点特异性PCR方法可实现铁皮石斛的准确鉴别,具有操作简便、稳定可靠、应用范围广的优点。     

多重位点特异性PCR鉴别海龙及其混伪品

目的:建立一种高效、准确的中药材海龙及其常见混伪品的特异性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴别方法。方法:通过比较海龙及其混伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(cytochrome C oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因序列差异,根据变异位点设计刁海龙、尖海龙及拟海龙的特异性鉴别引物,优化反应体系,并对此方法进行耐受性和适用性的考察和验证。在此基础上,将3对特异性引物组合,构建多重PCR体系。结果:在多重PCR体系中,刁海龙能扩增出485 bp片段,尖海龙可扩增出120 bp片段,拟海龙可以扩增出240 bp片段,其他混伪品均无条带。所设计的特异性鉴别引物具有高度的特异性。结论:该文所建立的位点特异性PCR鉴别方法可实现海龙的准确鉴别。