聚糖纳米微泡超声造影剂的制备及其超声显影效果

目的 制备聚糖纳米微泡超声造影剂,观察其基本特征及动物超声显影效果.方法 高速剪切法制备纳米微泡超声造影剂,光学显微镜和透射电镜观察纳米微泡大小、形态,马尔文粒度分析仪测粒径分布,细胞计数板计数纳米微泡,Zeta电位仪测表面电位,对比超声观察大鼠肾、心脏超声显影效果并测量声强度.结果 纳米微泡呈空心球形结构,分散均匀,形态规则,平均粒径(617±12)nm,浓度(7.2±0.6)×109/ml,Zeta电位(52.9±1.3)mV.24 h、45 d和90d三个时间点浓度、平均粒径和表面电位无明显差异(P＞0.05).用其可使小鼠肾、心脏超声显影明显增强,最大视频强度分别达(15.6±1.1)GU、(27.3±2.5)GU,可视增强持续时间(10±2)min.结论 聚糖纳米微泡稳定性和显像效果良好,有可能成为可穿过血管内皮间隙的新一代超声造影剂.     

壳聚糖作为药物载体的应用

甲壳素(Chitin,又名甲壳质、几丁质)是自然界中生物合成的一种氨基多糖,主要存在于蟹、虾以及昆虫的外壳中,是地球上仅次于纤维素的第2大天然高分子,其分子结构与纤维素类似。由于甲壳素分子中存在乙酰胺基,分子间形成较强的氢键,因此不溶于水和普通的有机溶剂,这种难溶制限性了甲壳素的应用。而甲壳素经过脱乙酰基后生成壳聚糖(Chitosan,又名甲壳氨、壳多糖)。壳聚糖是甲壳素脱乙酰化的产物,脱乙酰化程度不同(即含游离氨基的数目不同)可使壳聚糖具有不同的性质,但它们都溶于稀酸。     

壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜的制备及其与肌成纤维细胞的相容性

目的：制备防粘连壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜并观察其与肌成纤维细胞的相容性。方法：实验于2006-05/11在南方医科大学附属珠江医院中心实验室完成。实验材料：在透析后的壳聚糖与聚乙二醇琥珀酸酯或聚乙二醇共混后置入冻干机冻干制得壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜或壳聚糖/聚乙二醇膜，并将新生2～5d的SD大鼠骨骼肌成纤维细胞种植于膜片上。实验评估：①MTT法测定肌成纤维细胞接种在不同膜片上的吸光度值，计算相对贴附率。相对贴附率=不同膜的A490nm/培养板的A490nm×100%。②MTT法测定肌成纤维细胞在不同膜片上的生长1，5d后的吸光度值。③相差显微镜下观察肌成纤维细胞的生长形貌。结果：①肌成纤维细胞在不同膜片上的贴附率：肌成纤维细胞在壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜上能良好黏附、增殖，而在壳聚糖/聚乙二醇膜、壳聚糖膜上黏附性差。联合培养12h，5d后MTT法结果显示，壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯组的A值分别为0.074±0.009，0.141±0.031，分别为壳聚糖组的6.17倍和6.13倍（P〈0.05）。②肌成纤维细胞的生长特性：肌成纤维细胞在壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯膜上的活性最高，增殖能力最强，增长速度最快，其次为壳聚糖/聚乙二醇膜，但两者差异无显著性意义（P〉0.05），而细胞在壳聚糖膜上的增殖能力较低，膜上细胞数目较少，与其他组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。③肌成纤维细胞与不同膜片联合培养1，5d时的生长形貌：壳聚糖膜上细胞未贴壁生长，为透明的圆球形，呈游离状态，未能很好舒展，且有些皱缩，生长活力也不旺盛;细胞与壳聚糖/聚乙二醇膜、壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯膜片联合培养的生长情况要明显好于壳聚糖膜，细胞相互融合成片，多呈长梭形，细胞间隙狭窄，紧密排列成束，成指纹状结构且聚集生长的趋势也更明显。结论：将接支琥珀酰基的聚乙二醇与壳聚糖共混组成的网状系统改进了膜片的力学性能，提高了膜片的柔韧性，使其成膜性更好;壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜具有良好的生物相容性，肌成纤维细胞在壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜上的黏附及生长情况明显好于壳聚糖薄膜。     

N-软脂酰基壳聚糖的制备及其改善靛玉红水溶性的药动学研究

目的制备N-软脂酰基壳聚糖（PLCS）纳米胶束,改善难溶性药物靛玉红的溶解性与生物利用度。方法首先使用溶胀的壳聚糖与软脂酸酐在二甲基亚砜溶剂中反应合成水溶性的PLCS,通过IR和1H-NMR表征PLCS的结构;然后用其负载靛玉红,以激光散射和透射电镜检测载药纳米胶束的物理特征,用HPLC法测定其包封率。最后进行载药纳米胶束腹腔注射给药后在大鼠体内的药动学实验,与靛玉红混悬剂对照。结果合成得到的PLCS能很好地负载并增溶靛玉红,载药率可达10%左右。药动学研究表明,用PLCS载靛玉红后较靛玉红混悬剂的AUC提高了2.21倍,显著提高了靛玉红在大鼠体内的生物利用度。结论PLCS可作为提高难溶性药物靛玉红生物利用度的有效载体,进而可能改善靛玉红治疗白血病的疗效。     

以N-软酯酰基壳聚糖为壳膜的新型超声微泡造影剂的对比成像

目的 制备N-软酯酰基壳聚糖微泡(PCMB)类超声造影剂,评价其超声对比成像效果.方法 以N-软酯酰基壳聚糖为膜材料采用声振法制备PCMB造影剂,用光学显微镜、库尔特计数仪、Zeta电位仪检测其大小、形态、浓度和表面电位.经大鼠尾静脉团注0.1 ml该造影剂观察大鼠左心室、肝脏、肾脏超声造影效果,脱机分析峰值强度(PI)、达峰时间(TTP)、峰值减半时间(HPT)、廓清时间等参数,并与全氟显进行造影性能比较.结果 PCMB分布均匀,浓度为(2.88±0.45)×109/ml,直径为(1.31±0.07)μm(99.98%微泡直径小于8μm),表面电位为(55.03±3.08)mV;对大鼠左心室、肝脏、肾脏超声造影图像清晰,PI和TTP与全氟显相近(P>0.05),但HPT及廓清时间明显延长(P<0.001).结论 以廉价和生物相容性好的N-软酯酰基壳聚糖为壳膜材料制备新型超声造影剂具有良好的超声对比成像效果.     

N-软脂酰基壳聚糖叶酸靶向微泡的体内外特性和靶向效果

目的 应用N-软脂酰基壳聚糖制备叶酸靶向微泡,评价其基本特征、体外靶向性及体内超声显影效果.方法 以高速剪切法制备叶酸靶向微泡和对照微泡,观察叶酸靶向微泡的大小、形态和叶酸分子在微泡的分布及对昆明鼠肾脏的超声显影效果和体外靶向效果,并与对照微泡比较.结果 叶酸靶向微泡呈空心球形结构,形态规则,分散均匀,平均粒径(1.32±0.20)μm,浓度(1.93±0.01)×109/ml;鼠肾对比显影明显增强,1 min、7 min视频强度分别为(30.35±5.01)GU、(17.41±3.15)GU,可视性对比增强持续时间(10.00±3.00)min;与叶酸受体高表达细胞结合数明显大于叶酸受体低表达细胞组和对照微泡组(P<0.01).结论 N-软脂酰基壳聚糖构建的叶酸靶向微泡可与叶酸受体有效结合,可用其作为分子探针,对叶酸受体高表达的肿瘤进行超声分子成像.     

壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯/丝裂霉素C释药系统预防椎板切除术后硬脊膜外瘢痕粘连的实验研究

目的 研究壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯(chitosan/polyethylene glycols-suceinate,CH/PEG-SA)/丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)薄膜局部释药系统对硬脊膜外瘢痕粘连的治疗作用. 方法 按摩尔比3:1制得PEG-SA后,将其与CH及MMC(质量比为1:1.5)在一定条件下制成CH/PEG-SA/MMC薄膜.取成年雄性SD大鼠30只,制作L1椎板切除模型.将大鼠按体重编号,随机分为I～Ⅵ组,每组5只.I组硬脊膜后方植入20 mg CH膜片,Ⅱ组植入20 mg CH/PEG膜片,Ⅲ组植入20 mg CH/PEG.SA膜片,Ⅳ组用0.05 mg/mL MMC溶液浸润硬脊膜5 rain,V组植入20 mg CH/PEG-SA/MMC膜片,Ⅵ组不作处理.术后4周取材,通过大体观察(Rydell评分)比较硬脊膜外瘢痕的增生情况;行免疫组织化学观察,计算羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;HE染色行组织学观察.结果所有动物术后情况良好,无步态异常、躁动、感染、死亡,各组间Rydell评分比较差异均有统计学意义(JP<0.05).I～Ⅵ组硬膜外瘢痕组织中Hyp含量分别为(0.570 8 ±0.345 0)、(0.728 6 ±0.150 6)、(0.553 4 ±0.122 3)、(0.313 3 ±0.106 4)、(0.2619±0.1021)及(1.020 1±0.120 6)μg/mg:I～V组Hyp含量均低于Ⅵ组,差异有统计学意义(P<0.05);IV、V组与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组比较,差异有统计学意义(P<0.05).组织学观察见V组胶原纤维少且与硬脊膜平行排列,走向清晰、规则,有少量炎性细胞浸润及毛细血管,无巨噬细胞反应. 结论 CH/PEG-SA/MMC膜片能有效减少硬脊膜外瘢痕中Hyp含量,抑制椎板切除术后硬脊膜外瘢痕粘连,是一种预防瘢痕粘连的良好辅助治疗手段.     

基于改性壳聚糖纳米胶束的制备和表征及其细胞毒性评价

背景：壳聚糖进行化学改性以制备性能优良且细胞毒性低、生物相容性高、可降解的聚合物纳米胶束，在药物控释、组织工程等领域获得普遍应用。 目的：将强疏水链十八烷氧基接枝到N-琥珀酰壳聚糖分子中，制备结构稳定、粒径较小的聚合物胶束，以获得可适用于药物传递载体或医学生物材料领域的聚合物纳米胶束。 方法：用N-琥珀酰壳聚糖和十八烷基缩水甘油醚反应，在壳聚糖衍生物中引入长链疏水基。 结果与讨论：成功制备出聚合物纳米胶束，通过红外光谱和1H核磁波谱表征，证实壳聚糖分子中成功引入了琥珀酰基和十八烷氧基。通过动态激光散射测量出其粒径在136~166 nm，其临界胶束溶度在1.67×10-3~3.35×10-3 g/L，反映出胶束具有非常好的稳定性，而且其临界胶束浓度值和粒径随着疏水链接枝率的增加而减少。MTT法检测说明该胶束对细胞毒性极低。     

聚合物纳米粒子作为抗肿瘤药物载体的应用

聚合物纳米粒子作为抗肿瘤药物载体具有优良的性能和广阔的应用前景,主要表现在其能增溶疏水性抗癌药物,增加抗癌基因药物与蛋白类药物的稳定性和提高基因的转染率,提高药物针对肿瘤的靶向性。聚合物纳米粒子作为抗癌中药的载体将为中药的发展带来巨大机遇。     

苦竹叶总黄酮的超声提取及其抗氧化研究

目的 探讨苦竹叶中总黄酮的提取、鉴别方法及对羟自由基的清除能力,以充分利用苦竹叶植物资源,避免资源的浪费.方法 采用超声波乙醇浸提法从苦竹叶中提取黄酮类化合物,用分光光度法测定黄酮类化合物的总含量,并利用对羟自由基的清除能力就苦竹叶总黄酮的抗氧化性进行研究.结果 测得样品中黄酮类化合物的总含量为C=0.407 mg/ml,回收率为100.5%,其纯度和产率均较高.结论 该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取苦竹叶中黄酮类化合物的有效途径.苦竹叶黄酮类化合物提取液对 Fenton体系产生的·OH自由基有很好的清除作用.