改良孕中、晚期羊水细胞培养制备染色体方法的探讨

目的改良孕中晚期羊水细胞培养制备染色体技术。方法收集45例孕24-32w具有产前诊断指征的的孕妇羊水,根据羊水细胞生长特点,在培养过程中调整换液时间及培养方式收获细胞。结果45例孕中晚期羊水细胞培养全部成功。结论该方法细胞岛多,染色体有效分裂相多,培养成功率高,可满足临床产前诊断的要求。     

染色体异常核型两家系

家系1 先证者,男,30岁.其妻妊娠3次,均在孕6个月左右B超发现胎儿复杂型先天性心脏病后引产.最近1次于我院引产后取脐带血行染色体检查.夫妇体健,表型、智力均正常,非近亲婚配,孕期无有害物质及放射线接触史.     

男性染色体异常核型四例

例1 男,26岁,结婚多年未育.体格健壮,非近亲婚配,表型及智力正常.精液常规检查:精子数量5×10~6/mL(正常值:).采用多重PCR技术检测Y染色体AZF区域AZFa区sY84、sY86,AZFb区sY127、sY134、sY129,AZFc区sY254、sY255,AZFd区sY152 8个序列标签位点(sequence tagged sites,STS)及件别决定基因(sex-deternining region of Y gene,SRY)均未发现缺失.     

丝氨酸526位点在MEKK3介导的IL-1信号途径中的作用

目的:确定MEKK3分子中介导IL-1信号途径的关键性氨基酸.方法:对哺乳动物MEKK3活性环526位点的丝氨酸进行人工诱变后,用瞬时转染的方法分别将526A基因单独及与TRAF6基因同时导入GES-1细胞中;用免疫印迹、NF-κB 荧光素酶报告基因测定及免疫沉淀实验检测了526A突变体的表达水平、对IL-1及TRAF6介导的NF-κB基因的表达及MEKK3与TRAF6相互作用的影响.结果:通过与野生型MEKK3的对比,观察到526A不但阻断了IL-1及TRAF6介导的依赖于MEKK3的NF-κB基因的激活,同时阻断了TRAF6与MEKK3的相互作用.结论:526位点的丝氨酸在MEKK3介导的IL-1信号途径中起关键性的作用,是不可缺少的关键性氨基酸.     

CLOUTER流式细胞仪几类常见故障的排除和预防措施

随着免疫学和细胞化学、单克隆抗体等技术的发展,流式细胞仪在许多大中型医院及科研单位中得到了广泛应用.     

MEKK3稳定表达细胞株的建立及其对A549细胞增殖的影响

目的 构建人MEKK3基因编码区序列(cDNA)的真核表达载体、建立其稳定表达细胞株并观察其对肺腺癌细胞增殖的影响.方法 从A549细胞中提取总RNA,应用RT-PCR扩增MEKK3 cDNA的全长序列后克隆入pcDNA3.1/hygro(+)质粒中,构建成MEKK3基因的真核表达载体,然后转染入人肺腺癌A549细胞...     

丝氨酸526位点在MEKK3介导的IL-1信号途径中的作用

目的：确定MEKK3分子中介导IL-1信号途径的关键性氨基酸。方法：对哺乳动物MEKK3活性环526位点的丝氨酸进行人工诱变后，用瞬时转染的方法分别将526A基因单独及与TRAF6基因同时导入GES-1细胞中；用免疫印迹、NF-κB荧光素酶报告基因测定及免疫沉淀实验检测了526A突变体的表达水平、对IL-1及TRAF6介导的NF-κB基因的表达及MEKK3与TRAF6相互作用的影响。结果：通过与野生型MEKK3的对比，观察到526A不但阻断了IL-1及TRAF6介导的依赖于MEKK3的NF-κB基因的激活，同时阻断了TRAF6与MEKK3的相互作用。结论：526位点的丝氨酸在MEKK3介导的IL-1信号途径中起关键性的作用。是不可缺少的关键性氨基酸。     

1203例不育患者的精子DFI与精液质量参数的相关性分析

目的分析不育患者精液质量、年龄与精子DNA断裂指数(DFI)的关系,探讨精子DNA损伤的机制。方法回顾性分析1 203例不育患者的精子DFI、精子浓度、活力和年龄等指标。按少、弱精子症进行分组,并进行精子DFI与精子浓度、活力的相关性分析。结果精子DFI与精子浓度无相关性,而与精子活力呈负相关(r=-0.457,P0.05)。少、弱精子症组的DFI较正常组高,各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。年龄与精子DFI呈正相关(r=0.172,P0.05),在弱精子症组中,不同年龄组DFI值比较差异有统计学意义(P0.05)。结论精子DFI在弱精子症患者中明显升高,其升高水平与精子活力下降的程度有明显的相关性。年龄与精子DFI呈正相关。     

CLOUTER XL型流式细胞仪常见报警的检修及预防

流式细胞仪是一种能够快速定性、定量分析细胞的高新技术仪器,它集中了计算机、流体力学、激光光学、电子学和单克隆抗体技术等多项先进技术。能对细胞进行多参数分析及分选纯化。随着免疫学和细胞化学、单克隆抗体技术的发展,流式细胞仪在许多大中型医院及科研单位中得到了广泛应用。但要使检测顺利进行．得到准确的测量结果,对流式细胞仪的维护保养尤其重要。下面对CIDUTER XL型流式细胞仪结构和原理进行分析,     

一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别

目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA，采用荧光多重PCR技术，扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列（STR）基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对，确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏，但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型：基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型，所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言，尸体软骨组织是首选。