慢性粒细胞白血病的发生机制及治疗策略

慢性粒细胞白血病(CML)是人造血干细胞发生的一种恶性肿瘤,临床上慢粒是以异常的、不成熟的恶性造血祖细胞的大量增生为特征。病理特征是因第九与第22位染色体易位{t(9:22)}形成的pH~1染色体,该染色体易位产生的BCR/ABL融合基因表达的具有高酪氨酸激酶活性的p210~(BCR/ABL)融合蛋白是慢粒发生的分子基础,它能结合或激活细胞内多种信号相关的分子,为造血细胞的恶性转化必要而充分的条件。该病的p210~(BCR /ABL)是通过什么分子机制引起这些变化仍不清楚,目前临床上除干细胞移植外尚无治愈的方法。     

逆转录病毒IL-6/IL-2融合蛋白载体构建及其对K562细胞诱导分化作用

我们在构建的人重组ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合蛋白 (ＣＨ92 5 ) [1,2 ] 基础上 ,构建了逆转录ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ融合基因载体 ,并转染Ｋ5 6 2细胞 ,进行ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合基因对Ｋ5 6 2细胞系增殖、分化调控作用的研究 ,探讨其在慢性粒细胞白血病诱导分化治疗中的应用前景和意义 ,现将有关实验研究结果报告如下。材料和方法1　逆转录病毒载体ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ构建　逆转录病毒载体ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ包含ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合基因和一个新霉素抗性(Ｎｅｏ)基因。使用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ从ｐｆＩＬ 6 /ＩＬ 2质粒消…     

研究慢性粒细胞性白血病病理发生中下游信号传导和分子调控的干细胞模型

获得慢性粒细胞白血病人原代干祖细胞模型 ,旨在研究慢粒白血病病理发生中信号传导的分子机制。方法　转导b3a2bcr/ablcDNA到正常人CD34 细胞中构建人原代慢性粒细胞性白血病模型。采用细胞免疫组化测定了p2 10 BCR/ABL在CD34 细胞中的表达 ;细胞粘附、迁移实验进行模型鉴定 ;FACS法测定了p2 10 BCR/ABL转导及对照CD34 细胞p2 7kip和MDR 1Pgp的表达。结果　相对于对照的CD34 细胞 ,转导了bcr/abl的CD34 细胞对纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)的粘附性下降 ;而在FN上的迁移能力增强 ;在低浓度细胞因子或血清条件下表现为凋亡延迟 ;细胞的粒系克隆形成单位数量明显增多 ,这一模型再现了原代慢粒白血病的异常表型特征 ,并以此模型发现p2 10 BCR/ABL转染CD34 细胞上调了p2 7Kip水平并可诱导MDR 1Pgp异常表达。结论　该模型适用于慢粒病理发生中的信号分子传导及分子调控研究 ,提示了慢粒耐药的分子机制。     

慢性粒细胞白血病cyclin D2基因的表达研究

目的研究cyclin D2基因表达与慢性粒细胞白血病(CML)特征性的P210^BCR/ABL蛋白酪氨酸激酶活性之间的相关性。方法以RT-PCR、免疫印迹法及流式细胞术检测cyclin D2基因在BCR／ABL K562细胞系中的表达。通过表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的模型即K562-ib-eGFP细胞，检测cyclin D2表达的变化。结果在P210^BCR/ABL蛋白酪氨酸激酶活性受抑制的K562-ib-eGFP细胞中，cyclin D2的表达(18．90％)明显低于K562细胞组(48．10％)，且K562-ib-eGFP组S期细胞比例(40．40％)也明显低于K562细胞组(64．34％)。结论cyclin D2可能是CML-P210^BCR/ABL蛋白酪氨酸激酶下游相关信号传递分子，其表达增高可能促进了CML细胞的过度增殖。